周雷
- 作品数:4 被引量:20H指数:3
- 供职机构:甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 奶牛乳房炎乳腺膜蛋白的比较蛋白质组学研究被引量:8
- 2010年
- 【目的】通过分析临床健康和乳房炎奶牛乳腺组织膜蛋白的差异表达,以期在蛋白质水平探索奶牛乳房炎的发生机理。【方法】采用二维凝胶电泳技术分离了临床健康和乳房炎奶牛的乳腺组织膜蛋白,经考马斯亮蓝染色后PDQuest 7.4软件匹配、检测凝胶中差异表达的蛋白点,对12个差异蛋白点采用高效液相色谱串联离子阱质谱分析,SEQUEST软件搜索NCBInr数据库。半定量RT-PCR分析差异表达蛋白的mRNA水平。【结果】12个差异蛋白点鉴定为11种蛋白质,其中9个蛋白点在临床型乳房炎奶牛乳腺组织膜蛋白中表达量上调而3个蛋白点表达量下调,主要涉及细胞膜骨架系统、信号转导、物质结合和传递等生物学功能。半定量RT-PCR分析表明,乳房炎奶牛乳腺组织中钙粒蛋白B的mRNA表达水平是健康奶牛的1.6倍。【结论】推测这些差异蛋白的表达变化与奶牛乳房炎发生相关,为从蛋白质水平揭示奶牛乳房炎的发生机理以及发现潜在的治疗目标蛋白提供了理论依据。
- 杨永新张勇周雷程广龙陶金忠赵兴绪
- 关键词:奶牛乳房炎蛋白质组
- 奶牛β-防御素5基因的克隆与原核表达被引量:7
- 2009年
- 根据已发表的β-防御素5基因序列设计引物,采用RT-PCR技术扩增奶牛白细胞β-防御素5基因片段,构建原核表达载体并进行诱导表达.结果表明:将PCR产物插入pGEM-T easy载体后,经琼脂糖凝胶电泳、PCR、酶切及DNA测序证明构建的重组克隆载体完全正确,以该重组质粒为模板扩增目的基因的成熟肽片段,产物用EcoR I+NotⅠ双酶切并与原核表达载体PET28a连接,获得了预期的重组表达质粒.将重组表达质粒转化到BL21(DE3)宿主菌中,用异丙基--βD-硫代半乳糖苷诱导表达,经尿素-SDS-PAGE检测表明表达产物为6.4 kda的融合蛋白.
- 周雷张勇王建锋赵兴绪
- 关键词:奶牛基因克隆原核表达
- 几种奶牛乳房炎相关基因在白细胞内的表达及克隆表达
- 奶牛乳房炎是严重危害奶牛业的一种常见的复杂多发性疾病,目前尚无十分有效的治疗方法。近年来,随着分子生物学的发展,对乳房炎的研究逐渐深入到分子水平,对乳房炎相关基因的研究也取得了新的进展。
本研究以中国荷斯坦奶牛...
- 周雷
- 关键词:奶牛乳房炎基因表达基因克隆
- 文献传递
- 乳牛乳腺炎发病机制的蛋白质组学研究被引量:3
- 2009年
- 为了从蛋白质水平揭示乳牛乳腺炎的发病机制,分析乳腺炎病牛乳腺组织可溶性蛋白的表达变化,采用二维凝胶电泳技术获得了健康乳牛与乳腺炎病牛乳腺组织的可溶性蛋白表达图谱,经PDQuest7.4软件自动匹配,检测出17个差异蛋白斑点;经液相色谱串联离子阱质谱分析,获得了16种主要涉及细胞运动、物质运输和催化作用等生物学功能的蛋白质。结果表明,健康乳牛与乳腺炎病牛乳腺组织可溶性蛋白的表达存在明显差异。
- 张勇杨永新张进隆周雷赵兴绪
- 关键词:乳牛乳腺炎乳腺组织可溶性蛋白蛋白质组