周贤婧
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：兰州理工大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 马铃薯α-淀粉酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2010年
- 利用RT-PCR方法从马铃薯(Solanum tuberosum)茎段总RNA中扩增、克隆amyA1基因(NCBI登录号GQ406048.1)。采用半定量RT-PCR方法检测amyA1基因在马铃薯茎、叶等不同组织中的表达强度,表明在茎组织中的表达丰度略高。利用生物信息学软件分析amyA1密码子的偏好性;同时对AmyA1氨基酸的理化性质、细胞内定位、保守结构及高级结构进行预测。基于NCBI数据库中有物种代表性的29种α-淀粉酶基因序列构建了基因进化树。amyA1基因全长1224bp,可编码一条理论分子质量为46.40kD、407个氨基酸残基组成的、可能为亲水性的胞外酶。与NCBI已登记的马铃薯α-淀粉酶基因(登录号M79328.1)核苷酸及氨基酸序列同源性达98%。第20～348位点范围内的氨基酸残基含有与淀粉酶13家族及亚家族相似的催化活性域(PF00128、SM00624),第349～407位点范围内的氨基酸残基含有α-淀粉酶C-末端β折叠区域(PF07821)。蛋白质结构预测表明氨基酸残基序列有维持淀粉酶活性的(β/α)8桶状结构以及其他几个功能域结构。所构建的基因进化树表明,两个马铃薯α-淀粉酶基因与木薯、苹果的序列同源性较高,与菜豆的次之,与水稻、大麦、玉米等单子叶植物的序列同源性较低。
- 王永刚马建忠马雪青周贤婧李昆鹏赵虎彪
- 关键词：马铃薯Α-淀粉酶基因克隆生物信息学
- 利用套叠PCR技术合成人胰岛素原基因的临床研究
- 2010年
- 目的设计并分子克隆适宜于大肠杆菌表达系统的人胰岛素原基因。方法以美国国家基因库(GenBank)发布的人胰岛素原的氨基酸序列为模板,参考大肠杆菌表达系统的密码子偏好性以及所用表达载体(pGEX-3x)的特点,经计算机分析、设计人胰岛素原基因为8个寡核苷酸片段,以重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术体外延伸获得完整的人胰岛素原基因,分子克隆后测定所得基因的核苷酸序列。结果经限制性内切酶分析确定为重组克隆的质粒进行核苷酸序列分析,结果表明,我们所克隆的基因序列完全符合我们先前的设计。结论SOE-PCR技术可用于体外寡核苷酸片段的延伸并获得完整长度的基因。TaqDNA聚合酶延伸反应前以Klenow片段处理可提高较短覆盖末端或较低专一性末端正确延伸的成功率。
- 马建忠周贤婧王永刚
- 关键词：人胰岛素原基因克隆
- 巴斯德毕赤酵母GS115基因组研究进展被引量：2
- 2010年
- 毕赤酵母生物表达系统已成功地表达了多种重组外源活性蛋白,广泛地被应用于能源、医疗、科学研究等方面的研究。综述了2008年以来毕赤酵母GS115基因组研究,以期从分子水平解释转录调控、表达调控及翻译后修饰等机理,进而解决毕赤酵母发酵过程中产量低、过糖基化等瓶颈。
- 王永刚马雪青王倩周贤婧赵虎彪马建忠
- 关键词：毕赤酵母GS115基因组
- 人胰岛素原基因的设计克隆及在大肠杆菌中的表达
- 目前世界上近两亿名患者用胰岛素进行治疗(发展中国家患者的数量还在逐渐增加)，治疗上的进步使糖尿病患者寿命延长。胰岛素一般是从猪、牛胰中提取、由于其分子结构与人胰岛素存在差异，而且在动物内脏中胰蛋白酶比较活跃，因此胰岛素在...
- 周贤婧
- 关键词：糖尿病胰岛素制剂大肠杆菌分子克隆
- 文献传递
- 马铃薯病毒的检测技术被引量：5
- 2010年
- 快速、准确地定性或定量检测马铃薯植株中病毒、类病毒的种类和数量是控制马铃薯病毒病害的有效方法。该文就马铃薯病毒检测方法的基本原理和研究进展作了较为详尽的介绍与评价。并比较了各种方法的优缺点。
- 马雪青王永刚周贤婧王倩李昆鹏马建忠
- 关键词：马铃薯病毒
- 马铃薯病毒研究新进展被引量：8
- 2010年
- 马铃薯病毒作为影响马铃薯产量的主要因素,备受研究者的青睐。国际上对马铃薯病毒结构、检测手段的研究,逐渐从病毒形态学研究转到病毒基因组学及功能组学的研究。伴随着测序技术的不断发展,目前已有14种马铃薯病毒全基因测序完成,对马铃薯病毒种属鉴定、检测技术、基因结构和功能、复制与转录、传播及抗病毒的研究有了最新的进展。本文就上述研究给予总结,对14种马铃薯病毒进行了进化树分析,同时对马铃薯病毒蛋白质组学和代谢组学进行展望。
- 马雪青王永刚周贤婧赵虎彪李昆鹏马建忠
- 关键词：马铃薯病毒进化
