周立
- 作品数：46 被引量：142H指数：8
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 可诱导心肌特异性表达IL-22转基因小鼠模型的建立被引量：1
- 2014年
- 目的建立心肌特异性、高效表达白介素22的转基因小鼠模型。方法将TRE-Tight-IL-22转基因载体显微注射入C57BL/6小鼠受精卵细胞中,得到含有其中1段转基因载体的转基因小鼠,再将这种转基因小鼠与含有能够控制TRE-Tight下游基因在心肌特异性表达的α-MHC-rtA-hGH的转基因小鼠进行交配,获得同时含有TRE-Tight-IL-22和α-MHC-rtTA-hGH这2段基因的双阳性子代转基因小鼠。使用强力霉素(Dox)持续诱导6周龄双阳性小鼠6周,再用ELISA方法检测转基因小鼠心肌细胞中IL-22表达量。结果与野生型C57BL/6小鼠比较,经过强力霉素诱导的双阳转基因小鼠心肌细胞有高表达量的IL-22(P<0.05)。结论得到了可诱导、高效表达IL-22的转基因小鼠系,为IL-22与心力衰竭关系的深入研究和治疗提供新的研究思路。
- 程鹏飞唐景峰周立
- 关键词：强力霉素
- FQ-PCR同步检测HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ方法的建立及临床应用
- 2012年
- 目的:建立可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,并对所建体系进行方法学评价。方法:根据HTLV-Ⅰpol基因和HTLV-Ⅱtax基因的保守序列设计引物及TaqMan-LNA探针,构建重组质粒作为荧光定量PCR的标准品。优化荧光定量PCR反应条件,建立起可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法。结果:结果显示该方法对HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ的线性范围分别为108-102 copy/μl和107-10copy/μl;检测灵敏度分别为102copy/μl和10copy/μl。对阳性标本检测均呈阳性,对非目标菌检测均呈阴性。应用该方法对175例临床标本进行考核,有HTLV-Ⅰ阳性6例,HTLV-Ⅱ阳性3例,其中HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ双阳性2例。结论:本研究建立的双重FQ-PCR方法特异、快速、灵敏,对HTLV的血液筛查有重要意义。
- 陈琦唐景峰程鹏飞张长明周立汪晓莉王业富
- 恒河猴外周血单核巨噬细胞体外培养方法的建立被引量：6
- 2015年
- 目的 建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法.方法 用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）.同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清.将猴PBMCs置于CellBIND Surface的96孔（0.8 ×10^6个细胞/孔）或48孔培养板（3×10^6个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24 h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7d后观察细胞形态学.分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域.胞体形态多样,多数呈长梭形.用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度.并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达.此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIV-mac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制.结果 在含2％猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（＞85％）猴单核细胞能在24 h内贴壁,体外分化5-7d后,猴巨噬细胞纯度大于96％.相比而言,含较高浓度（4％,8％或10％）猴自体血清或FCS的RPMI 1640培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差.分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子.此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒.结论 含2％猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化.该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段.
- 桑明代明周立刘金彪郭铭马同翠肖前浩霍文哲
- 关键词：恒河猴艾滋病毒单核细胞巨噬细胞
- 一种恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法及其应用
- 本发明涉及恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法，具体为分离外周血单个核细胞，收集的外周血单个核细胞用PBS重悬、洗涤2次，洗过的细胞经离心回收，每次1200rpm离心8min，最后用含2%-4%猴自体血清、1%青链霉素和1...
- 桑明霍文哲刘金彪代明周立高建峰杨四军刘航
- 文献传递
- 钙调磷酸酶调节因子1在疾病发生中的研究进展被引量：1
- 2017年
- 钙调磷酸酶调节因子1基因是新兴发现的致病基因,该文综述近几年该基因与疾病研究的最新进展,为相关疾病的治疗提供思路。该文依次介绍钙调磷酸酶调节因子1基因及其表达方式,该基因参与三种疾病的方式的异同,并罗列了目前研究中遇到的问题,提出有效的措施,最后对该基因在疾病治疗中的应用进行展望。钙调磷酸酶调节因子1基因作为一个致病基因,其涉及疾病广泛多样,深入了解其作用机制,对疾病的治疗将大有好处。
- 刘春燕高建峰桑明周立杨四军
- 关键词：线粒体功能活性氧疾病发生
- 表没食子儿茶素没食子酸酯在制备预防HIV性传播的药物中的应用
- 本发明公开了表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）在制备预防HIV性传播的药物中的应用。利用目前研究HIV感染的最佳动物模型（SIV或SHIV感染猕猴），在局部直肠应用EGCG，确定EGCG具有预防艾滋病毒直肠感染的效果。...
- 霍文哲刘金彪王旭李结良鲜巧阳王勇庄柯周立李湘东
- 文献传递
- 多重RT-PCR方法对人肺炎链球菌菌种、血清型及耐药性的鉴别检测被引量：4
- 2018年
- 首先,选择肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)基因LytA、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)基因P1、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,CP)基因ompA作为目标检测靶点设计引物探针,建立鉴别肺炎链球菌菌种的多重RT-PCR方法.其次,针对肺炎链球菌cps基因座序列,利用MGB-TaqMan探针的多重RT-PCR方法对肺炎链球菌的血清型进行鉴别检测.最后,针对肺炎链球菌耐药基因ermB、mefA为靶标设计引物探针,采用多重RT-PCR方法对其临床阳性样本的耐药性进行鉴别检测.肺炎链球菌鉴别检测多重RT-PCR方法,线性范围为102~107 copies/mL,R2分别为0.999、0.996和0.995,灵敏度可达102copies/mL,与其他病原体无交叉反应.512例临床样本经多重RT-PCR方法鉴别检测,肺炎链球菌189例(189/304,62.17%),肺炎支原体83例(83/304,27.30%),肺炎衣原体32例(32/304,10.53%),与单重FQ-PCR及基因测序法比较无统计学差异(P>0.05).189例肺炎链球菌临床样本,经多重RT-PCR检测,血清分型为:19(19.58%,37/189)、23(15.87%,30/189)、6(13.23%,25/189)、14(6.3%,12/189),其他血清型(22.75%,43/189),其他血清型(22.22%,42/189).肺炎链球菌抗药菌株突变检测为:ermB突变115例(115/189,60.85%),mefA突变56例(56/189,29.63%),两基因共突变15例(15/189,7.94%).
- 程弘夏付敏周立秦文英周策凡唐景峰
- 关键词：多重RT-PCR肺炎链球菌血清分型耐药性
- 快速同步检测沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体的试剂盒
- 本发明公开了一种快速同步检测沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体的试剂盒，涉及一种性传播疾病病原体基因检测试剂盒。本发明主要包括：1)DNA核酸提取液；2)含有三种病原体检测序列的阳性质粒，三种病原体包括沙眼衣原体、细小脲...
- 王业富吕振兴周立唐景峰张长明
- 文献传递
- 运用智能手机实现细胞生物学实验显微成像互动教学研究被引量：5
- 2016年
- 细胞生物学实验课程是涵盖植物学、动物学、组织胚胎学、病理学、生物技术以及临床应用等专业的一门重要实践教学课程。为了提高实验课堂教学的质量,激发学生学习的热情和动力,我们在细胞生物学实验教学中引入智能手机,在不使用价格昂贵的显微数码互动系统的情况下,研究利用光学显微镜和智能手机,使学生们可就观察到的显微图像与教师在课堂上进行实时双向交流,以实现教学效果评价的即时性,使学生出现的错误能及时得到发现和纠正,促进教师的进步,实现教学相长。
- 周立卢晅郭铭包容
- 关键词：智能手机显微成像互动教学细胞生物学
- 莲藕品种DNA指纹图谱的绘制被引量：20
- 2004年
- 采用RAPD技术对14个莲藕品种进行遗传多态性分析,用5个Operon引物和80个SBS的RAPD引物进行筛选,从中选出来自SBS的RAPD-C13和RAPD-D15扩增出的8条多态性条带,绘制了14个品种的DNA指纹图谱,在该图谱中每个品种均有各自特异的DNA指纹。
- 韩延闯刁英周立刘静宇周明全胡中立宋运淳
- 关键词：DNA指纹遗传多态性莲藕RAPD
