周建武
- 作品数：15 被引量：28H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市研究生教育教学改革研究项目国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- AP2α荧光素酶报告基因的构建及在BMPs诱导成骨分化研究中的应用被引量：2
- 2013年
- 目的构建一种携带转录蛋白AP2α效应元件的荧光素酶报告基因载体,并应用于筛选BMPs对AP2α转录活性的影响。方法设计4个串联的AP2α效应元件(AP2α-RE),将其克隆至经Bam HⅠ和MluⅠ双酶切的pBGLuc荧光素酶报告基因质粒构建pBGLuc-AP2α-RE载体。重组腺病毒Ad-AP2α及其两种显性负性突变体Ad-dnAP2α感染小鼠间充质干细胞C3H10,通过Realtime PCR、Western blot检测AP2α的mRNA和蛋白水平表达,EMSA检测AP2α的DNA结合能力。pBGLuc-AP2α-RE转染C3H10细胞,荧光素酶报告基因检测同上各组AP2α的转录活性。Ad-BMPs感染pBGLuc-AP2α-RE转染的C3H10细胞,荧光素酶报告基因筛选BMPs对AP2α转录活性的影响。结果经PCR、酶切及测序鉴定,证实AP2α-RE正确克隆至pBGLuc-AP2α-RE荧光素酶报告基因载体,Ad-AP2α感染能显著提高AP2α的表达及结合DNA的能力。显性负性突变体可以表达各自的突变体,EMSA结果显示Ad-dnAP2α-△bHLH组能显著抑制AP2α结合DNA的能力,而Ad-dnAP2α-△TAD组结合的DNA探针强于对照组。荧光素酶报告基因提示AP2α过表达组能促进AP2α转录活性,而两种显性负性突变体均能抑制AP2α转录活性。重组腺病毒BMPs感染组的AP2α转录活性均有增高,其中BMP9最为显著。结论成功构建携带转录蛋白AP2α效应元件的荧光素酶报告基因载体用于检测AP2α的转录活性,并初步发现BMP9对AP2α的转录活性有明显的促进作用。
- 龚梦嘉周建武毕杨
- 关键词：荧光素酶报告基因骨形态发生蛋白
- 卵巢自截3例报告及文献复习被引量：1
- 2018年
- 卵巢自截又称异位卵巢,是卵巢或卵巢包块扭转后的罕见并发症,文献报道中发病率约为1/11 421（[1]）。随着国家二胎政策的推行和超声技术的进步,越来越多的盆腔包块在产检中被发现,并成为小儿外科工作中遇到的新问题。现将本院2011年8月至2016年12月收治的3例卵巢自截病例报道如下：
病例1,女,3个月,因“产前彩超发现盆腔包块3个多月”入院.体格检查：腹软,腹部稍膨隆,右下腹扪及质中包块,基底不固定,活动可,按压后患儿无哭吵,腹壁局部无红肿,无静脉显露,肝脾肋下未触及。
- 杜逸飞王珊孔祥如章均李长春杨超赵珍珍邓晓斌彭亮周建武
- 关键词：异位卵巢文献复习卵巢包块盆腔包块罕见并发症外科工作
- 重组siRARγ腺病毒构建及其对小鼠肝脏祖细胞分化的影响被引量：2
- 2014年
- 目的构建并筛选小鼠RARγ基因的siRNA腺病毒载体,并探讨抑制RARγ表达对小鼠肝脏祖细胞分化的影响。方法设计3对特异性针对小鼠RARγ基因的siRNA序列,体外退火形成双链,与SfiⅠ酶切后的pSES-HUS质粒连接,随后在BJ5183中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组获得pAd-siRARγ重组腺病毒质粒,并在HEK293细胞中包装腺病毒Ad-siRARγ。腺病毒感染小鼠肝脏祖细胞HP14.5d,real-time PCR及Western blot检测RARγ的表达,1μmol/L ATRA诱导肝细胞分化,ALB-Gluc活性及PAS染色检测肝脏细胞分化的状态。结果 PCR、酶切鉴定均证实siRNA正确克隆至腺病毒质粒中,测序结果与设计的siRNA序列一致。腺病毒在HEK293细胞中包装10 d可见红色荧光细胞的云雾状扩增,HP14.5d细胞的48 h腺病毒感染率为60%。其中,Ad-siRARγ2、3可有效抑制小鼠HP14.5d细胞中RARγ的表达(P<0.05)。ATRA可诱导肝细胞分化,ALB-Gluc活性及PAS染色阳性细胞明显高于对照组,Ad-siRARγ2,3可显著抑制ATRA诱导的小鼠HP14.5d细胞的ALB表达和糖原合成能力(P<0.05)。结论成功构建并筛选出能有效抑制RARγ表达的siRNA腺病毒,感染小鼠肝脏祖细胞HP14.5d能显著抑制ATRA诱导的肝细胞成熟分化。
- 周建武何昀龚梦嘉毕杨
- 关键词：腺病毒载体小干扰RNA肝细胞分化
- 师生共建典型案例教学法在小儿肿瘤外科临床实践教学中的应用初探被引量：4
- 2018年
- 目的探讨师生共建典型案例教学法在小儿肿瘤外科临床实践教学中的应用。方法选取2011级临床医学专业的148名学生为研究对象,随机分为两组,实验组(74名)采用师生共建典型案例教学法,对照组(74名)采用传统教学法,学期末,采用考试成绩和问卷调查的形式对两种教学效果进行评价。结果实验组无论是理论考试还是病案分析成绩均高于对照组(P<0.05)。问卷调查显示:实验组的大部分学生赞成师生共建典型案例教学法,认为其对各种学习能力(自主学习能力、主动获取知识的能力、文献检索能力、灵活运用知识的能力、表达能力、培养创新能力)等方面有帮助,对学习主动性、积极性有帮助,对临床思维及实际解决问题的能力有帮助,但是实验组比对照组花费时间较长。结论在小儿肿瘤外科临床实践教学中应用师生共建典型案例教学法利于提高学生对疾病知识的系统掌握,利于学生临床思维及临床判断能力的培养,值得推广。
- 李长春章均赵珍珍杨超邓晓斌彭亮杜逸飞周建武孔祥如
- 关键词：小儿肿瘤外科临床实践教学
- β-catenin对骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨经典Wnt信号通路关键节点β-catenin对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响。方法用重组腺病毒介导BMP9在C3H10T1/2细胞中过表达,联用β-catenin重组腺病毒上调β-catenin的表达,并通过RNA干扰抑制β-catenin的表达。分析C3H10T1/2细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的变化;RT-PCR检测细胞成骨分化相关基因骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和骨钙蛋白(osteocalcin,OC)基因mRNA的转录水平;茜素红S染色检测细胞的钙盐沉积。结果 BMP9单独作用能诱导C3H10T1/2细胞向成骨方向分化,并增强细胞ALP活性;单独的β-catenin无成骨诱导作用,但可剂量依赖性地增强BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性,并促进BMP9诱导的细胞OPN和OC基因mRNA的转录水平及钙盐沉积;抑制β-catenin表达可显著降低BMP9诱导的C3H1OT1/2细胞的ALP活性(P<0.05),下调OPN和OC基因mRNA的转录水平,并抑制钙盐沉积。结论经典Wnt信号通路可能通过β-catenin协同BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化,且BMP9诱导的成骨分化可能需要通过Wnt/β-catenin途径来实现。
- 林良波徐娇张晓符纯锋王志强周建武毕杨黄伟
- 关键词：WNTΒ-CATENIN间充质干细胞成骨分化
- 骨形成蛋白信号分子在小鼠椎间盘发育中的表达
- 2013年
- 目的：探索促进成骨相关的骨形成蛋白（BMP）-2、-4、-6、-7、-9以及抑制成骨作用的BMP-3在小鼠不同年龄段椎间盘中表达情况，为椎间盘发育过程中BMP信号途径的研究奠定重要基础。方法：解剖获取出生后1d、3d、1周、1个月、3个月、6个月龄小鼠的椎间盘及胸腰椎脊柱。RT-PCR检测BMP-2、-3、-4、-6、-7、-9在生后不同年龄段小鼠椎间盘的表达情况，免疫印迹及免疫组织化学验证在RT—PCR中有明显表达差异的BMP-3、-6。结果：RT-PCR结果显示BMP-2、-7、-9的表达在小鼠椎间盘组织中有一定的基础表达，但随着年龄增大没有明显的变化趋势，而BMP-3和BMP-6的表达整体呈现出下降的趋势，BMP-4在椎间盘中无表达，免疫印迹及免疫组织化学结果也证实BMP-3和BMP-6随着小鼠椎间盘的发育表达降低。结论：正常小鼠脊柱，随着年龄的增加，椎间盘中BMP-2、-7、-9的表达无明显变化趋势，各年龄段都维持着一定量的表达，BMP-3和BMP-6的表达整体呈现出下降的趋势，具有明显成骨作用的BMP-4则没有表达。
- 周建武何通川毕杨何韵张弢刘传康
- 关键词：骨形成蛋白椎间盘
- 700例儿童颅外生殖细胞肿瘤单中心临床诊疗总结被引量：1
- 2023年
- 目的回顾单中心儿童颅外生殖细胞瘤诊治情况,分析总结儿童颅外生殖细胞瘤治疗效果和影响预后的因素。方法收集重庆医科大学附属儿童医院肿瘤外科2012年8月—2020年4月收治的700例颅外生殖细胞肿瘤患儿临床资料。按照性别、年龄、部位、病理类型、预后等因素分析。共收集成熟型畸胎瘤482例;未成熟畸胎瘤86例;恶性生殖细胞瘤132例。结果(1)成熟型畸胎瘤:2y-OS100%、EFS 98.3%,5y-OS 100%、EFS 97.9%。(2)未成熟型畸胎瘤:2y-OS 100%、EFS 94.1%,5y-OS 100%、EFS 92.4%。(3)恶性生殖细胞瘤:2y-OS96.6%、EFS 85.5%,5y-OS 96.6%、EFS 82.5%。原发部位及临床分期是影响预后的重要因素(P<0.05)。结论临床分期、肿瘤原发部位是影响生存率的重要因素,经规范综合治疗颅外生殖细胞肿瘤是治疗效果较好的儿童重大疾病。
- 王珍妮王珊李长春杨超赵珍珍杜小瑜邓晓斌孔祥如吕麟亚章均彭亮杜逸飞周建武孙建
- 关键词：儿童生存率
- 糖皮质激素注射联合弹性钢针固定治疗股骨近端单纯骨囊肿的初步观察被引量：1
- 2019年
- 目的初步探讨糖皮质激素囊腔内注射联合弹性髓内针髓腔内固定治疗股骨近端单纯骨囊肿的效果。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院2013年4月至2015年11月收治的25例股骨近端单纯骨囊肿患儿资料,患儿均行穿刺抽吸囊液,无水酒精灭活囊壁细胞,采用醋酸泼尼松囊腔内注射联合弹性髓内针髓腔内固定的手术方式。术后拍摄X线片,并结合Capanna提出的诊断标准随访治疗效果。结果 25例股骨近端单纯骨囊肿患儿中,合并病理性骨折21例,活跃型骨囊肿19例。术后平均随访11. 6个月(6～30个月)。10例完全治愈(CapannaⅠ),14例部分治愈(CapannaⅡ),1例复发(CapannaⅢ)。患儿术后均未出现患肢发育畸形等并发症。结论糖皮质激素囊腔内注射联合弹性髓内针髓腔内固定治疗股骨近端骨囊肿具有创伤小、术后患肢功能恢复较快、患肢发育畸形及生长停滞发生率低等特点,初步治疗效果较为理想。
- 周建武宁尚坤宁尚坤
- 关键词：股骨骨囊肿弹性髓内针
- 骨形态发生蛋白-2、-3对胚胎小鼠椎间盘细胞的成软骨及成骨作用被引量：4
- 2013年
- 目的探索成骨作用的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及抑制成骨作用的骨形态发生蛋白-3(BMP-3)对胚胎小鼠椎间盘细胞的成软骨及成骨作用,为BMPs临床治疗椎间盘相关疾病提供实验依据。方法运用腺病毒介导的BMP-2和BMP-3在胚胎小鼠椎间盘细胞中表达,RT-PCR检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)、蛋白多糖(ACAN)、骨钙素(OC)、骨保护素(OPG)和骨桥蛋白(OPN)成软骨及成骨相关指标mRNA水平的表达,甲苯胺蓝染色检测软骨基质的表达,碱性磷酸酶(ALP)读数及ALP染色检测ALP的活性。结果 BMP-2和BMP-3表达对于椎间盘纤维环(AF)细胞的成软骨和成骨均没有作用。对椎间盘髓核(NP)细胞的软骨相关指标ColⅠ、ColⅡ、ACAN mRNA的表达同样没有影响,但可促进NP细胞的成骨,其中BMP-2和BMP-3均可促进OC mRNA的表达升高,而仅BMP-2可促进其OPG和OPN的mRNA表达升高。甲苯胺蓝染色证明BMP-2和BMP-3对椎间盘细胞软骨基质分泌的影响并不显著。NP细胞在BMP-2和BMP-3腺病毒感染后ALP活性明显增强,在AF细胞中则未观察到这种变化。结论 BMP-2和BMP-3均可促进胚胎小鼠NP细胞的成骨作用,但对AF细胞的成骨及成软骨作用及对NP细胞的成软骨作用没有影响。
- 周建武何通川毕杨刘传康宿玉玺
- 关键词：骨形态发生蛋白胚胎成骨成软骨椎间盘细胞
- BMPs在小鼠椎间盘发育中差异表达谱及对椎间盘细胞影响的研究
- 青少年特发性脊柱侧弯(adolescent idiopathic scoliosis AIS)是一种严重的发育畸形，特指初诊年龄在10～18周岁的特发性脊柱侧弯患儿。因其发病原因至今都不清楚，因此对于AIS的治疗主要是对...
- 周建武
- 关键词：差异表达谱纤维环细胞
