吴玉水
- 作品数：78 被引量：169H指数：8
- 供职机构：工业微生物教育部工程研究中心更多>>
- 发文基金：福建省重点科技计划项目福建省农科院青年科技人才创新基金军队医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人氨肽酶N基因克隆和原核表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建人氨肽酶N(APN) 谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)融合蛋白 (APN GST) ,并进行原核表达。 方法 :根据人APNmRNA序列设计合成特异性引物 ,从人肝组织中提取总RNA并反转录成cDNA第一链 ,RT PCR扩增人APN基因 ,并插入融合蛋白原核表达载体 pGEX 4T ,转化宿主菌BL2 1(DE3)细胞 ,异丙基锍基半乳糖(IPTG)诱导表达APN蛋白。包涵体经尿素变性、重折叠和亲和层析纯化。 结果 :重组质粒测序和酶切结果显示 :APN基因已正确插入 pGEX 4T ,重组蛋白及纯化产物SDS PAGE在 135 0 0 0处有一条明显的蛋白表达条带。 结论 :人APN基因已被成功地克隆、表达和纯化。
- 涂向东谢飞吴玉水兰风华朱忠勇
- 关键词：氨肽酶N基因克隆原核表达纯化
- 应用全血直接PCR酶切法快速诊断儿童脊肌萎缩症被引量：2
- 2005年
- 曾健黄梁浒杨渤生吴玉水兰风华叶礼燕
- 关键词：脊肌萎缩症全血儿童DNA抽提
- 肾上腺脑白质营养不良蛋白ATP结合区的原核表达与鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的 构建人肾上腺脑白质营养不良 ( adrenoleukodystrophy,ALD)蛋白 ( ALD protein,ALDP) ATP结合区的原核重组载体并进行表达和鉴定。方法 自行设计引物 ,通过 PCR技术 ,以人全血 RNA为模板扩增ALDP ATP结合区编码序列 ,PCR产物经 Eco R /Xho 双酶切后 ,将其克隆至 p GEX-4T-2载体中 ,在大肠杆菌 BL2 1中诱导 GST融合蛋白的表达。结果 在 IPTG的诱导下 ,重组菌高效表达出一相对分子质量约为42 0 0 0的产物 ,与预期大小相符。对重组质粒的序列分析表明 ,插入片段的序列与 Genbank登录的编码序列完全一致。Western blot结果显示 ,目的条带可被鼠抗人 ALDP单克隆抗体识别。结论 人 ALDP ATP结合区的编码序列已被克隆至 GST融合表达载体 p GEX-4T-2 ,并在大肠杆菌 BL2 1中获得高表达。
- 黄梁浒郑德柱谢飞涂向东吴玉水兰风华
- 关键词：营养不良ALD原核表达单克隆抗体
- 产毒大肠杆菌菌毛抗原F_(41)单克隆抗体的研制与鉴定
- 1990年
- 作者报道以纯化的产毒大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株高滴度的抗F_(41)抗原的单克隆抗体,经鉴定1F6,2C5,3B6为IgG_1 1H5,4E11为IgM。腹水抗体效价达10^(-6),通过免疫扩散,免疫印迹法及固相菌体ELISA试验证实,5株单克隆抗体均为针对产毒大肠杆菌菌毛F_(41)抗原的特异性抗体;红血球凝集抑制及肠上皮细胞粘附阻断试验证明1F6,2C5,3B6具有生物学活性,1H5,4E11无生物学活性。
- 李元吕苹吴玉水汪美先
- 关键词：大肠杆菌单克隆抗体抗原
- 日本脑炎病毒基因疫苗的研究进展被引量：21
- 2002年
- 吴玉水马文煜等
- 关键词：日本脑炎日本脑炎病毒基因疫苗
- 细胞色素b5还原酶缺陷的分子生物学研究最新进展被引量：4
- 1997年
- 遗传性高铁血红蛋白血症主要由NADH-细胞色素b5还原酶(Cytb5R)缺陷引起。膜结合型和胞浆可溶型cytb5R由定位于22号染色体的同一基因编码。多种突变类型可导致该基因编码有缺陷的酶蛋白。本文就目前有关NADH-细胞色素b5还原酶蛋白特性与基因结构特点,基因突变与酶缺陷机制,以及可能建立的基因诊断方法等研究现状作一综述。
- 吴玉水黄长晖朱忠勇
- 关键词：血红蛋白病高铁血红蛋白分子生物学
- 杂化杂交瘤产生双特异性单克隆抗体研究进展被引量：2
- 1995年
- 杂化杂交瘤产生的双特异性单克隆抗体已广泛应用于体内外研究，包括细胞间的相互作用、改进免疫学诊断方法、自身免疫性疾病和肿瘤的导向治疗等诸多领域。本文着重就杂交瘤融合技术制备的双特异性单克隆抗体的有关理论和技术的优缺点，以及应用研究进展作一简要综述。
- 吴玉水朱忠勇
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤技术双特异性抗体
- NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究
- 2007年
- 目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。
- 郑德柱兰风华黄粱浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶原核表达GST融合蛋白
- 1例新的遗传性高铁血红蛋白血症复合杂合子基因型的鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的 从分子水平对 1例遗传性高铁血红蛋白血症患者进行确诊。方法 通过RT PCR产物直接测序 ,分析患者和正常对照b5R基因的cDNA编码序列。用PCR 限制性内切酶分析患者、其父母和正常人基因组DNA。结果 患者的一个b5R等位基因第 72位密码子 (位于外显子 3)发生了CTC→CCC突变 ,原来的亮氨酸被脯氨酸替换。患者另一个b5R等位基因第 2 0 3位密码子 (位于外显子 7)发生了TGC→TAC突变 ,原先的半胱氨酸被酪氨酸取代。结论 在中国患者确定了一个新的遗传性高铁血红蛋白血症基因型 ,即L72P/C2 0 3Y。
- 程鲁京郑德柱吴玉水朱忠勇兰风华
- 关键词：遗传性高铁血红蛋白血症杂合子基因型外显子密码子限制性内切酶
- 肾上腺脑白质营养不良蛋白ATP结合区的原核表达与鉴定
- 2003年
- 黄梁浒郑德柱谢飞涂向东吴玉水兰凤华
- 关键词：肾上腺脑白质营养不良ALDATP原核发病率基因突变
