吴义真
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
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- 相关领域：生物学更多>>
- Cryptococcus laurentii B40胞外脂肪酶的分离纯化及特性分析
- 罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)B40是一株产胞外碱性高温脂肪酶的野生菌株。本文对其发酵培养基进行优化获得其最佳发酵配方,并通过硫酸铵沉淀、DEAE Sephadex A-25离子交换层析和 ...
- 王彩梅蔡少丽吴义真林俊涵章文贤施巧琴林琳
- 关键词：分离纯化脂肪酶
- 文献传递
- 扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建被引量：3
- 2007年
- 利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并将含突变基因的重组质粒pAO815-ep8-R182K在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-R182K表达产物与野生型PEL、PEL-ep8比较实验表明:叠加突变体表达蛋白PEL-ep8-R182K最适反应温度与野生型PEL、PEL-ep8一致,均为40℃;热稳定性与野生型相似,比PEL-ep8降低2.25℃。但是,在比活上,PEL-ep8-R182K与PEL-ep8、野生型PEL相比,其比酶活分别提高了14.03%和3.86%。
- 王彩梅蔡少丽吴义真林琳
- 关键词：扩展青霉脂肪酶叠加突变最适温度热稳定性
- 异常毕赤酵母1003胞外脂肪酶的分离纯化及表征研究
- 本文报道了对异常毕赤酵母(Pichia anomala Kurtzman)1003发酵培养基的优化、所产胞外脂肪酶的分离纯化及表征研究。通过培养基优化获得了适合该菌发酵和纯化的培养基配方：通过硫酸铵沉淀、Sephacry...
- 吴义真
- 关键词：脂肪酶分离纯化
- 文献传递
- 脂肪酶催化合成生物柴油的瓶颈问题及其对策被引量：13
- 2008年
- 生物柴油,一种新型的清洁能源燃料,具有可再生、可生物降解、环境友好等优良的品性,可部分或全部替代石化柴油。碱催化法、脂肪酶催化法及超临界法是合成生物柴油的主要工艺,其中脂肪酶催化法是一种节能型、环保型工艺,在节能和环保方面,有着碱催化法无可比拟的优越性,具有良好的工业应用前景。但目前在实现产业化的进程中仍存在如酶成本高、稳定性较差、甲醇对酶的失活效应及反应时间长等瓶颈问题。通过固定化技术和全细胞催化剂的采用、甲醇流加方式的改进、溶剂工程的改善及酰基受体和耐醇酶的开发等技术手段,结合固定床生物反应器,较好地解决了这些瓶颈问题,从而推进了酶催化法合成生物柴油的工业化进程。主要对酶法合成生物柴油工艺存在的主要问题及相应对策研究进展进行概括介绍,并对其工业化发展前景进行讨论。
- 吴义真邹有土林琳
- 关键词：生物柴油脂肪酶酶催化法
- K202A突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的影响被引量：7
- 2007年
- 利用易错PCR定向进化扩展青霉脂肪酶(PEL),获得了一株热稳定性有所提高的随机突变体(ep8),ep8包含有一个氨基酸的改变。为进一步提高其热稳定性,利用重叠延伸PCR法,以ep8基因为模板,将第202位赖氨酸突变为丙氨酸(K202A),构建表达质粒pAO815-ep8-K202A。并将其引入毕赤酵母GS115构建叠加突变体(PEL-ep8-K202A)。同时以野生型lip07为模板构建单点突变体:PEL-lip07-K202A。15%SDS-PAGE结果分析表明突变体分子量与野生型一致,约为28kDa。表达产物热稳定性分析结果表明:野生型(PEL)的Tm值为39.03℃,而以野生型为模板进行定点突变得到的单点突变酶(PEL-lip07-K202A),其Tm却降低了2℃,为37.08℃。叠加突变酶(PEL-ep8-K202A)的Tm为41.66℃,比野生型酶提高2.63℃,比随机突变体ep8生产的酶(PEL-ep8)的Tm提高了1.21℃。
- 邹有土吴义真施文芳林琳
- 关键词：扩展青霉脂肪酶
