吕国平 作品数:40 被引量:149 H指数:8 供职机构: 石家庄市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 石家庄市科学技术研究与发展计划 河北省科技计划项目 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 农业科学 更多>>
钢铁厂冷却塔水嗜肺军团菌分离株分子流行病学研究 被引量:1 2017年 目的调查某钢铁企业冷却塔水嗜肺军团菌的污染状况及分子流行病学特征,为预防控制军团菌病的传播提供科学依据。方法 2011年3月—2012年9月,对石家庄市某钢铁厂车间冷却塔水进行监测,分离培养嗜肺军团菌,对得到的菌株进行血清分型、毒力基因检测(lvh、rtxA)和多位点序列分型研究。结果 182份冷却塔水中有67份检出嗜肺军团菌,检出率为36.8%;共分离培养得到菌株84株,包括7种血清型,其中LP1型占63.1%(53/84)、LP6型占19.0%(16/84)。lvh和rtxA基因检测阳性的分别有79株和83株,二者均为阳性的有78株。多位点序列分型可分为32个型,SBT1型占36.9%(31/84),为主要优势型别,有21个型别为首次发现。结论钢铁企业冷却水存在嗜肺军团菌污染,携带有毒力基因,血清型和SBT型呈多样性分布。 赵冬 柏佳宁 王蕾 李丽婕 李丽萍 高伟利 吕国平 徐保红关键词:嗜肺军团菌 毒力基因 多位点序列分型 石家庄市集中空调冷却塔水中嗜肺军团菌的基因序列分型研究 2012年 目的采用基因序列分型方法(sequence-based typing,SBT)研究石家庄市集中空调冷却塔水中军团菌基因特征。方法将石家庄市集中空调冷却塔水中分离出的35株Lp1血清型嗜肺军团菌提取基因组DNA,选取嗜肺军团菌7个管家基因flaA、pilE、asd、mip、mompS、proA、neuA进行PCR扩增,将扩增产物纯化后测序。测序结果上传欧盟军团菌感染工作组(EWGLI)数据库进行比对,得到基因型别(sequence type,ST),对结果进行基因序列分型和系统进化分析。结果 35株Lp1血清型嗜肺军团菌共分为4个ST型,其中1株由于neuA基因不能被扩增而未分型;1株为新的ST型,已获EWGLI分配序号(ST1021);其余为ST1型32株,ST345型1株。结论石家庄市集中空调冷却塔水中嗜肺军团菌分离株的流行以ST1型为主,ST345型和ST1021型为特有型别。SBT分型可以作为研究嗜肺军团菌进化关系的重要手段之一。 郭玉梅 周吉坤 剧慧栋 秦丽云 王苋 徐保红 吕国平关键词:嗜肺军团菌 基因型 空气环境中葡萄球菌的鉴定及耐药性分析 被引量:2 2018年 目的对环境中分离的葡萄球菌进行种属鉴定和药敏实验,研究环境中葡萄球菌的分布状态、生化特性和耐药特征。方法以空气撞击法收集石家庄市距地面10~15 m的室外空气微生物样品37份及某公共场所室内空气样品5份,对分离的细菌纯化培养后进行革兰染色、16S r DNA序列分析、生化鉴定和耐药性分析。结果分离出19株葡萄球菌属细菌,分别属于头状葡萄球菌(6株)、人葡萄球菌(4株)、溶血葡萄球菌(3株)、表皮葡萄球菌(2株)、猪葡萄球菌(1株)、沃氏葡萄球菌(1株)、葡萄球菌科氏亚种(1株)和金黄色葡萄球菌(1株)。环境中人葡萄球菌和表皮葡萄球菌对头孢类、氨基苷类、大环内酯类和氟喹诺酮类药物敏感;人葡萄球菌和溶血葡萄球菌对四环素类药物敏感;葡萄球菌均对磺胺类药物有不同程度的耐药。结论空气环境中存在多种葡萄球菌,且对抗生素有一定耐药性。 吕国平 李亚子 李丽婕 秦丽云 徐保红关键词:空气微生物 葡萄球菌属 RDNA 耐药性 石家庄2013年鸡肉沙门菌污染状况分析 被引量:5 2014年 目的调查市售各类肉鸡产品沙门菌污染情况,为沙门菌所致食物中毒的流行病学调查和防控提供科学依据。方法采集市售鸡肝、鸡心和鸡胸,进行沙门菌分离培养、生化鉴定和血清分型。结果 2013年共检测样品331份,检出沙门菌89株,检出率为26.89%,鸡肝、鸡心、鸡胸的检出率分别为37.56%(77/205)、11.11%(11/99)和3.70%(1/27)。89株沙门菌分离株共分为10种血清型,优势血清型为肠炎沙门菌、印第安纳沙门菌、山夫登堡沙门菌。其他血清型有肯塔基沙门菌、Rissen沙门菌、Redba沙门菌、Fillmore沙门菌、鼠伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、鸡-雏沙门菌。农贸市场和超市采集的鸡肝样品沙门菌阳性率差异无统计学意义。结论沙门菌广泛存在于市售各类肉鸡产品中,沙门菌血清型别呈多态型分布,且有地区特异性,有引起食物中毒的风险。 郭玉梅 秦丽云 徐保红 张慧贤 王苋 吕国平关键词:沙门菌 鸡肉 血清型 食物中毒 食源性致病菌 石家庄市水环境中嗜肺军团菌AFLP分型研究 被引量:1 2011年 目的对石家庄市水环境中分离到的嗜肺军团菌进行分子分型,研究嗜肺军团菌AFLP分型特征,为建立嗜肺军团菌分子型别库提供资料。方法运用欧洲军团菌感染工作组(European Working GrouponLegionella Infection,EWGLI)组织制定的扩增片断长度多态性分型(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)方法,对石家庄市水环境中分离到的39株嗜肺军团菌进行分子分型,对分型结果进行聚类分析,探讨菌株间的相互关系。结果按照血清分型方法,将水样中嗜肺军团菌分为Lp1型和,Jp2~14型。运用AFIJP技术对39株嗜肺军团菌菌株分型,其中,将31株Lp1血清型分为18种AFLP型,分别记为AFLP1~AFLP18,以AFLP1型与AFLP11型为主要型别;8株幻2~14血清型分为7种AFLP型,分别记为AFLPI~AFLPVII,以AFLPm为主要型别;在同一地区嗜肺军团菌菌株问,相同血清型别的相似性系数存在差异较大,但仍存在优势株;不同地区之间有部分菌株相似性系数为100%,表明不同地区的水样嗜肺军团菌菌株来源同一性。结论AFLP分型所得到的不同图谱表明各嗜肺军团菌株基因型呈多态性。 秦丽云 张鑫 郭玉梅 徐保红 陈慧巧 王苋 吕国平 曹春红关键词:嗜肺军团菌 血清分型 金黄色葡萄球菌的多重PCR快速鉴定方法 被引量:3 2012年 目的建立多重PCR快速鉴定金黄色葡萄球菌检测方法,并了解nuc和nucA基因在食源性金黄色葡萄球菌中的分布状况。方法设计nuc、nucA和16S rDNA基因的引物,利用单重PCR方法和测序验证引物的特异性;建立多重PCR快速检测方法,并应用此方法对23株食源性金黄色葡萄球菌、15株其他种属细菌以及一起食物中毒样品的增菌液进行检验,以评价该方法的特异性和灵敏性。结果利用单对引物对实验室的4个菌株进行盲筛,出现的条带均为单一条带,且与目的片段长度一致,测序结果显示扩增片段为目的基因片段。建立的多重PCR方法对金黄色葡萄球菌有很好的特异性和灵敏性,灵敏度达100 cfu/μl,研究所涉及的23株食源性金黄色葡萄球菌nuc和nucA基因均为阳性。结论该方法简便、快速、特异性好、灵敏度高,适用于金黄色葡萄球菌的快速鉴定。 吕国平 王苋 秦丽云关键词:金黄色葡萄球菌 多重PCR 食源性金黄色葡萄球菌耐药性和mecA基因分析 被引量:3 2013年 目的了解食源性金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)的耐药性和mecA基因的携带情况。方法采用纸片扩散法测定75株食源性金葡菌对12种抗生素的耐药性,并比较食物中毒分离株与食品分离株的耐药情况,利用PCR方法检测mecA基因。结果 75株金葡菌中,耐苯唑西林金葡菌(MRSA)为7株,占9.33%,其中mecA基因阳性株为5株;对苯唑西林敏感菌(MSSA)为66株,占88.00%,其中1株菌mecA基因阳性;中介菌株为2株,均携带mecA基因,占2.67%。97.33%的菌株对青霉素G耐药;60.00%对红霉素耐药;33.33%对克林霉素耐药;20.00%的菌株对四环素耐药;17.33%对新霉素耐药;9.33%对诺氟沙星耐药;5.33%对氯霉素耐药;2.67%对庆大霉素耐药;对利福平、万古霉素和新生霉素均未表现耐药。结论本次调查的环境中食源性金葡菌对青霉素G普遍耐药,且出现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。环境中食源性MSSA株对大部分抗生素仍保持良好的敏感性,而食源性MRSA株呈现多重耐药性。 吕国平 王苋 魏秀萍 李金山 冯佩关键词:环境微生物 MECA 基因 食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的多重PCR快速检测法 被引量:7 2012年 目的建立食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的多重PCR快速检测方法。方法根据公布的金黄色葡萄球菌肠毒素基因A~D型序列,分别设计引物并验证引物的特异性,建立多重PCR方法,检测食品风险监测和食物中毒事件中分离得到的165株金黄色葡萄球菌肠毒素基因A~D型。结果 165株金黄色葡萄球菌有95株携带肠毒素基因,毒素基因携带率为57.6%(95/165),携带一种基因型的占42.4%(72/165),同时携带两种以上毒素基因的占13.9%(23/165)。结论该方法具有简便快速、灵敏度高、特异性强等特点,适用于食源性金黄色葡萄球菌和食物中毒中金黄色葡萄球菌肠毒素的检测。 秦丽云 魏绣萍 吕国平关键词:多重聚合酶链反应 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 食源性金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳分型分析 被引量:9 2013年 对石家庄地区食源性金黄色葡萄球菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,建立石家庄市金黄色葡萄球菌PFGE分型的数据库,探讨引起食物中毒金黄色葡萄球菌菌株和其他食源性金黄色葡萄球菌的分子特征。利用PFGE分型技术对2010至2012年石家庄市的75株食源性金黄色葡萄球菌进行全基因组分析,DNA酶切图谱用BioNumerics软件进行聚类分析。75株食源性金黄色葡萄球菌的PFGE图谱的相似性系数在54%~100%之间,经聚类分析得到45个PFGE型别,6起食物中毒的金黄色葡萄球菌分别由PFGE01型、PFGE02型、PFGE11型、PFGE12型、PFGE15型和PFGE45型引起。建立的金黄色葡萄球菌PFGE分型数据库分子型别较多,且存在差异明显的多个克隆系,对石家庄地区金黄色葡萄球菌引起食物中毒的防控和溯源工作有重要意义。 吕国平 李丽婕 芦飞 徐保红 剧慧栋 郭玉梅 秦丽云关键词:食物中毒 一起食物中毒中金黄色葡萄球菌的分子特征分析 被引量:4 2019年 目的利用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术对一起食物中毒中检出的金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)进行分子分型,了解毒株的肠毒素类型,为金葡菌的分子溯源研究提供实验室数据。方法 mini VIDAS全自动荧光酶标免疫测试仪检测样品中葡萄球菌肠毒素。按照GB 4789.10-2010对样品进行菌株分离和生化鉴定,应用MLST方法对分离出的金葡菌进行基因分型,酶联免疫吸附法对分离株进行葡萄球菌肠毒素分型。结果分别从病人的呕吐物、食堂师傅手涂抹物、厨房刀涂抹物中检出金葡菌,呕吐物中检出葡萄球菌肠毒素;可疑食物中未检出金葡菌,葡萄球菌肠毒素为阴性。中毒毒株MLST分析得到4个ST序列型,ST5、ST15、ST59和ST338,其中ST5型金葡菌产肠毒素C、肠毒素D和肠毒素E;ST15型菌产肠毒素E;ST59型和ST338型菌产肠毒素B和肠毒素C。结论此食物中毒由不同MLST型别的金葡菌引起,毒株产葡萄球菌肠毒素的类别也不同。 吕国平 秦丽云 郭玉梅 任兴烨关键词:多位点序列分型 食物中毒 金黄色葡萄球菌 葡萄球菌肠毒素