刘艳华 作品数:11 被引量:26 H指数:3 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
PRDM1和GATA2基因mRNA作为活动性结核和潜伏感染鉴别诊断标志物的可能性研究 2022年 目的活动性结核病的诊断仍然是结核病防治的重点和难点,差异表达基因有望成为结核病新的诊断靶标。本研究通过检测结核分枝杆菌不同感染状态下人外周血中PR/SET域1(PR/SET domain 1,PRDM1)和GATA结合蛋白2(GATA binding protein 2,GATA2)基因的mRNA表达,分析其作为诊断标志物的能力。方法收集活动性结核病患者、结核分枝杆菌潜伏感染者和健康人外周血,荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中PRDM1和GATA2的m RNA水平,分析各组受试者PRDM1和GATA2基因表达差异及其鉴别活动性结核和潜伏感染的诊断能力。结果活动性结核病患者外周血单个核细胞中PRDM1和GATA2的表达显著低于潜伏感染者和健康人(H=69.27,P<0.0001;H=37.97,P<0.0001)。PRDM1鉴别诊断活动性结核和潜伏感染的曲线下面积为0.8967,灵敏度为80.22%,特异度为87.1%。GATA2鉴别诊断活动性结核和潜伏感染的曲线下面积为0.8061,灵敏度为82.35%,特异度为70.97%。PRDM1和GATA2联合诊断活动性结核和潜伏感染的曲线下面积为0.935,诊断的灵敏度为76.9%,特异度为100%。结论外周血单个核细胞中PRDM1和GATA2的mRNA表达水平是鉴别活动性结核和潜伏感染者的潜在标志物,有助于活动性结核的辅助诊断。 刘艳华 王若 杨秉芬 曹志红 翟斐 孙雯娜 苏瑾文 俞珊 程小星关键词:活动性结核 诊断标志物 HPV16型L1蛋白优势表位原核表达及其血清学验证 被引量:1 2020年 目的利用原核系统对人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白优势抗原表位进行重组表达与纯化,并检测血清学反应。方法对HPV16型L1蛋白优势抗原表位进行全基因合成,将核酸片段克隆至pET-DsbC原核表达载体,重组质粒转化大肠埃希菌Rosetta(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,采用亲和层析对表达产物进行纯化,采用免疫印迹法、酶联免疫吸附试验(ELISA)验证重组蛋白的免疫学活性。结果成功构建了pET-DsbC-HPV16 L1表达载体,并在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中实现了稳定的可溶性表达。重组DsbC-HPV16 L1蛋白经亲和层析进行纯化,相对分子质量为45000,纯度为95%,重组蛋白纯化得率为22%。免疫印迹法结果显示,重组DsbC-HPV16 L1蛋白可与HPV16型阳性血清产生特异的抗原-抗体反应,与重组DsbC蛋白或健康人血清无交叉反应,具有良好的特异性。ELISA结果显示,重组DsbC-HPV16 L1蛋白与HPV16型阳性血清有较强的免疫反应性,A450 nm均值为0.56,高于健康人血清和磷酸盐缓冲液(PBS)阴性对照(A450 nm均值分别为0.24和0.21)。结论采用原核表达系统实现了HPV16型L1蛋白优势抗原表位的可溶性高表达,获得的重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫学活性。 侯江厚 张灵霞 孙雯娜 刘艳华 杨秉芬 孙卫国关键词:原核表达 血清学反应 背景音乐在“身心并护”优质护理服务中的实施与作用 被引量:5 2014年 目的探讨背景音乐在"身心并护"优质护理服务中的作用。方法将512名患者设为调查组、486名患者设为对照组,调查组分别在晨间护理、早饭后、探视结束时间、晚间护理时选择性播放不同背景音乐,研究背景音乐在"身心并护"优质护理服务中的作用。结果与对照组护理质量调查情况相比较,调查组患者对护理质量满意率显著提升,病区陪伴率显著下降,护理用于陪伴管理的时间显著缩短,患者的汉密尔顿焦虑评分显著降低。结论背景音乐对患者食欲、情绪、睡眠均有积极有效的影响。播放背景音乐参与管理,可使病区陪伴率下降,并能够提高病区晨晚间护理质量,提高患者对护理工作服务满意率,实现了护理工作中"身心并护"的完美结合,是临床工作中优质护理的需要和体现。 王晶 黄秋艳 刘艳华 游薛慧关键词:音乐 优质护理 三种不同护理措施在卵巢癌患者HIPEC治疗中渗液管理的效果观察 2020年 目的:探讨卵巢癌患者行HIPEC治疗中三种不同护理措施针对患者腹腔灌注管周围渗液时的管理效果。方法:将2017年1月至2018年12月在解放军总医院妇科行HIPEC治疗的114例中晚期卵巢癌患者随机分为三组,分别为可塑贴环固定法组、胶布固定法组、腹壁加压包扎法组。观察三组患者腹腔灌注管周围渗液发生率、腹壁及皮肤刺激、损伤情况、患者主观舒适度。结果:可塑贴环固定法在HIPEC治疗中可显著降低腹腔灌注管松脱以及渗液现象、有效降低皮肤损伤率、提高患者舒适满意度。结论:可塑贴环固定法可减少卵巢癌患者HIPEC治疗中腹腔灌注管周围渗液发生率,减少不良事件的发生,保障护理安全。 王晶 刘艳华 高军谊 杨博 陈建华关键词:HIPEC 卵巢癌 结核性胸膜炎患者MAIT细胞Granzyme B免疫应答特征及其与疾病转归的相关性 被引量:10 2019年 目的研究结核性胸膜炎患者胸腔积液中MAIT细胞颗粒酶B(Granzyme B)免疫应答特征及其与疾病转归的相关性。方法提取25份结核性胸腔积液PFMCs,用结核分枝杆菌H37Rv裂解液刺激后收集细胞,进行流式抗体染色。另外有10例患者重复收集胸水,其中7例治疗效果好,胸水吸收,另3例无明显治疗效果,比较其治疗前后Granzyme B^+MAIT细胞比例。结果结核分枝杆菌抗原刺激后,结核性胸膜炎患者胸腔积液中Granzyme B^+MAIT比例为(25.34±5.37)%。男女性和不同年龄患者的Granzyme B^+MAIT细胞比例均差异无统计学意义。7例治疗效果好的患者治疗后Granzyme B^+MAIT细胞比例明显上升,治疗前后比例分别为(30.41±2.78)%和(40.61±2.61)%,差异有统计学意义(t=9.867,P <0.000 1)。3例治疗效果不好的患者Granzyme B^+MAIT细胞比例明显低于治疗效果好的患者,且治疗后比例上升不明显。结论 MAIT细胞生成颗粒酶B通过细胞毒性杀伤作用而在局部抗结核免疫中发挥重要作用。 曹志红 蒋静 俞珊 杨秉芬 刘艳华 安红娟 王若 翟斐 程小星关键词:结核 胸腔积液 结核性胸膜炎患者MAIT细胞IFN-γ免疫应答特征及其与疾病转归的相关性 被引量:6 2019年 目的研究结核性胸膜炎患者胸腔积液中MAIT细胞IFN-γ免疫应答特征及其与疾病转归的相关性。方法提取61份结核性胸腔积液PFMCs,用结核分枝杆菌H37Rv裂解液刺激后收集细胞,进行流式抗体染色。另外有17例患者重复收集胸水,10例治疗效果好,胸水吸收,另7例无明显治疗效果,比较其治疗前后IFN-γ^+ MAIT细胞比例。结果结核分枝杆菌抗原刺激后,结核性胸膜炎患者胸腔积液CD8^+T细胞亚群中MAIT细胞对结核抗原应答生成的IFN-γ比例为(30.49±3.23)%。男女性别和不同年龄患者的IFN-γ^+ MAIT细胞比例均无显著差异。痰涂片/培养阳性和阴性患者的IFN-γ^+ MAIT细胞比例分别为(53.44±5.48)%和(33.98±2.45)%,差异有统计学意义(P=0.0027)。治疗效果好的患者治疗后IFN-γ^+ MAIT细胞比例明显上升,治疗前后比例分别为(34.3±3.69)%和(49.9±3.79)%,差异有统计学意义(P=0.0003)。治疗效果不好的患者IFN-γ^+ MAIT细胞比例也有所上升,但差异没有统计学意义。结论 MAIT细胞通过生成细胞因子IFN-γ而在局部抗结核免疫中发挥重要作用。 曹志红 蒋静 俞珊 杨秉芬 刘艳华 安红娟 王若 翟斐 程小星关键词:结核 IFN-Γ 胸腔积液 结核分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)对CD4^+ CD154^+ T细胞的影响 被引量:2 2010年 目的通过研究结核分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)对CD4+ CD154+ T细胞亚群的影响,探讨结核分枝杆菌分泌蛋白的致病性。方法 PPD或/和BCG刺激PBMCs后,用流式细胞术检测活动性肺结核的CD4+ CD154+ T细胞和CD4+IFN-γ+T细胞的比例变化。结果①PPD刺激显著下调CD4+ CD154+ T细胞比例,能够抑制BCG刺激产生的CD4+ CD154+ T细胞的增殖;②PPD刺激CD4+ IFN-γ+ T细胞的效果显著低于BCG。结论 PPD内存在能显著抑制机体保护性免疫的分泌蛋白,可能是结核杆菌进入人体后抑制机体免疫力的重要因素之一。 王心静 程小星 曹志红 刘艳华 蒋静 董梅 佟爱华关键词:分泌蛋白 CD4+T淋巴细胞 FCGR1B基因转录水平检测对活动性结核病诊断的价值研究 被引量:3 2022年 目的研究免疫球蛋白γFc段受体1b(Fc fragment of IgG receptor 1b,FCGR1B)基因转录水平检测对活动性结核病的诊断价值。方法2018年2—9月,收集解放军总医院第八医学中心活动性结核病患者、结核潜伏感染者(LTBI)、治愈结核病患者、健康人和肺炎患者的外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),提取总RNA并反转录为cDNA,实时荧光定量聚合酶链式反应(QPCR)检测PBMC中FCGR1B基因mRNA的相对表达量,非参数检验比较活动性结核病和对照组FCGR1B基因mRNA的表达差异、相关性分析FCGR1B基因mRNA的表达与结核病病情和感染指标的关系,受试者工作特征曲线(ROC)评估FCGR1B基因转录水平检测在活动性结核病诊断中的价值。结果与非结核组(包括LTBI、健康人、治愈结核和肺炎患者)相比,活动性结核病患者PBMC中FCGR1B基因mRNA的表达较高(u=2081,P<0.001);结核患者的载菌量越多,FCGR1B基因mRNA的表达越高(H=12.35,P=0.015),与C反应蛋白(CRP)的表达显著相关(r=0.30,P=0.008);FCGR1B基因mRNA鉴别活动性结核病的曲线下面积(AUC)为0.849,诊断的敏感度和特异度分别为71.43%和84.17%,FCGR1B基因mRNA鉴别肺外结核的AUC为0.906,诊断的敏感度和特异度分别为84.62%和91.89%。结论FCGR1B基因mRNA是潜在的活动性结核病分子诊断标志物。 刘艳华 王若 安红娟 程小星关键词:MRNA 活动性结核 诊断标志物 一次性多功能肛管 本实用新型公开了一种一次性多功能肛管,包括导气管、密封袋和三通阀门,所述导气管的一端为封闭端,且该端部呈弧形,另一端与所述三通阀门的第一接头连接,所述封闭端的附近分布有若干个通孔;所述密封袋的开口由外至内逐渐缩小,所述密... 刘艳华 王晶文献传递 ABCA2基因mRNA在结核分枝杆菌不同感染阶段的表达及其作为诊断标志物的研究 2023年 目的:比较ATP结合转运蛋白A2(ATP-binding cassette transporterA2,ABCA2)基因m RNA在活动性结核病和结核分枝杆菌潜伏感染状态下的表达差异及其作为诊断标志物的能力。方法:收集活动性结核病患者、结核分枝杆菌潜伏感染者和健康人外周血,荧光定量PCR检测受试者外周血单个核细胞中ABCA2的m RNA水平,统计学分析各组ABCA2基因表达差异,及其鉴别活动性结核和潜伏感染的能力。结果:活动性结核病患者外周血单个核细胞中ABCA2的m RNA表达显著低于潜伏感染者和健康人(H=83.38,P<0.0001)。ABCA2鉴别诊断活动性结核和潜伏感染的曲线下面积为0.9235,灵敏度为73.53%(95%的置信区间为63.87%~81.78%),特异性为93.55%(95%的置信区间为78.58%~99.21%)。结论:外周血单个核细胞中ABCA2基因m RNA是鉴别活动性结核病和潜伏感染者的潜在标志物,有助于活动性结核病的辅助诊断。 刘艳华 王若 苏瑾文 俞珊 孙雯娜 程小星关键词:活动性结核病 诊断标志物 MRNA