刘筱
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家生猪现代产业技术体系建设项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种猪TLR4基因C1027A碱基突变的检测方法
- 本发明涉及一种猪<I>TLR4</I>基因C1027A碱基突变的检测方法，属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪<I>TLR4</I>基因序列设计特异引物，对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增；分离、纯化扩增产物...
- 方晓敏刘筱任守文孟翠李碧侠王学敏
- 文献传递
- 猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β基因表达的变化被引量：8
- 2011年
- Toll样受体(TLR)作为一种重要的模式识别受体,在动物的天然免疫中发挥重要作用,是机体抵抗感染的第1道屏障。该研究通过建立猪肺炎支原体感染模型,探讨猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA的表达及意义。选取80日龄无注射气喘病疫苗苏钟猪14头,随机分为攻毒组和对照组,攻毒组气管内注射猪肺炎支原体组织强毒,对照组气管内注射灭菌生理盐水。感染后观察临床症状,攻毒后18 d时X射线透视猪肺部,记录体重;攻毒后28 d时检测抗体,记录体重,扑杀剖检,采集肺脏。应用Real-time PCR方法检测肺组织TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1βmRNA的表达变化。结果显示:猪感染肺炎支原体后,生长缓慢,体重下降;X射线透视,肺部出现典型阴影;攻毒组猪出现典型的病理变化;TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1β表达显著升高(P<0.05)。表明:猪肺炎支原体感染后TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β表达量增加,导致肺部炎症;猪肺炎支原体感染与TLR2、TLR4的变化有密切联系,启示肺炎支原体可能通过TLR信号传导通道。
- 刘筱方晓敏邹晓龙赵芳孟翠任守文
- 关键词：肺炎支原体TLR促炎因子基因表达肺部炎症
- 猪Toll样受体基因的变异及其与支原体肺炎感染的关系被引量：8
- 2012年
- Toll样受体(TLRs)作为重要的模式识别受体,在动物的天然免疫中发挥重要作用,是机体抵抗感染的第一道屏障;TLRs基因变异会改变机体对病原的抗性或易感性,本试验旨在探讨TLR2、TLR4基因突变与支原体肺炎感染的关系。试验以国外引进猪品种(长白、大白、皮特兰)、中国地方猪品种(梅山、二花脸、姜曲海、金华)以及江苏省培育猪品种(苏钟猪)为材料,通过PCR-SSCP技术检测实验猪群TLR2、TLR4基因SNPs分布,结合动物攻毒实验及文献报道,对其中部分SNP不同基因型猪的肺部巨噬细胞做LPS感染实验,借助RT-PCR跟踪不同时间点猪TLR2、TLR4基因以及促炎性因子TNF-α、IL-1β的表达变化,揭示猪Toll样受体基因的变异与支原体肺炎感染的关系。结果表明,本实验猪群TLR4基因存在4个SNP位点:T611A、G960A、G962A、C1027A,其中G960A为同义突变,其余为有义突变;位点C1027A在中、外猪品种间呈现明显的碱基分布差异。LPS诱导下的猪肺部巨噬细胞TLR2、TLR4基因及促炎性因子TNF-α、IL-1β均表现不同程度的表达上调;其中,位点C1027A的CC型猪TLR2、TLR4基因表达水平及增速均显著高于AC型猪(P<0.01),TNF-α、IL-1β的表达水平则显著低于AC型猪(P<0.01),提示C等位基因极可能是猪抗支原体肺炎感染的优势基因。
- 方晓敏刘筱孟翠任守文李碧侠王学敏涂枫
- 关键词：TOLL样受体基因变异支原体肺炎
- 猪CACNA1S基因内含子37的克隆及多态性研究
- 2009年
- 根据不同物种间保守性及相似性的特点,跨内含子设计引物,利用聚合酶链式反应(PCR)技术对猪CAC-NA1S内含子37进行克隆;采用PCR-SSCP技术,检测金华与皮特兰杂交F2代猪(JPF2)和苏钟猪CACNA1S基因内含子37的单核苷酸突变点(SNP),并结合JPF2猪生产性状进行相关分析。结果表明:(1)克隆得到猪CACNA1S基因内含子37完整DNA序列(235bp);(2)在猪CACNA1S基因内含子37中检测到6个SNP;(3)相关分析显示,位点1S-76对体长存在显著性影响(0.01
- 王雪方晓敏刘筱唐金虎任守文
- 关键词：克隆测序PCR-SSCP
- 一种猪TLR4基因T611A碱基突变的检测方法
- 本发明涉及一种猪<I>TLR4</I>基因T611A碱基突变的检测方法，属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪<I>TLR4</I>基因序列设计特异引物，对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增；分离、纯化扩增产物，...
- 方晓敏刘筱任守文孟翠李碧侠王学敏
- 文献传递
- 苏钟猪TLR4基因多态性及编码区C1027A功能分析
- Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)作为一种重要的模式识别受体(pattern-recognition receptors, PRRs),能够特异性识别病原体相关分子模式(pathogen...
- 刘筱
- 关键词：苏钟猪PCR-SSCPLPS促炎症因子
- 文献传递
- 一种猪TLR4基因单核苷酸多态性的检测方法
- 本发明涉及一种猪<I>TLR4</I>基因单核苷酸多态性的检测方法，属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪<I>TLR4</I>基因序列设计特异引物，对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增；分离、纯化扩增产物，获得...
- 方晓敏刘筱任守文孟翠李碧侠王学敏
- 文献传递
- 单质粒Tet-on基因表达系统调控猪GH在猪胎儿成纤维细胞中表达
- 引言Tet-OnAdvanced诱导表达系统是一种高效、安全、具有严密开关功能的诱导表达系统。生长激素(growth hormone,GH)具有促进物质代谢与生长发育的作用,对机体各器官和组织均有影响,其主要作用是刺激骨...
- 姜保春徐世永邹晓龙刘筱翟乐秦岭张秀娟刘红林
- 文献传递
- 猪Toll样受体4基因(TLR4)外显子SNP检测及生物信息学分析被引量：3
- 2011年
- Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体,其多态性与动物对相关病原的免疫力有着明显的相关性。为了对猪TLR4基因进行多态性分析,试验采用PCR-SSCP结合核苷酸测序法研究了梅山猪、二花脸猪、苏钟猪、姜曲海猪、淮猪、金华猪、大约克猪、皮特兰猪及金华与皮特兰杂交F2代猪(JPF2)9个群体共90个样本TLR4基因外显子序列的单核苷酸多态性,并对猪TLR4基因进行了生物信息学分析。结果检测到4个突变:G400A、G962A、C1027A、G960A,其中前3个为有义突变,且C1027A突变引起编码氨基酸性质的改变;生物信息学分析表明猪TLR4基因含有一个2 526 bp的开放阅读框,编码841个氨基酸;序列比较发现猪与牛、绵羊、人和小鼠TLR4基因cDNA序列相似性分别为87%、86%、79%、73%,编码的氨基酸序列相似性分别为81%、80%、73%、64%。TLR4基因多态性检测结果表明猪TLR4基因的单核苷酸多态性在中外猪种中存在明显差异,结合生物信息学分析推测该基因编码蛋白质LRR(富含亮氨酸重复序列)功能域上的突变可能与猪种对疾病的易感性不同有关。
- 刘筱方晓敏任守文李碧侠王学敏
- 关键词：TOLL样受体4SNP生物信息学
- 一种猪TLR4基因T611A碱基突变的检测方法
- 本发明涉及一种猪<I>TLR4</I>基因T611A碱基突变的检测方法，属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪<I>TLR4</I>基因序列设计特异引物，对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增；分离、纯化扩增产物，...
- 方晓敏刘筱任守文孟翠李碧侠王学敏
