刘江
- 作品数:6 被引量:20H指数:2
- 供职机构:山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 二十碳五烯酸合成途径中云饱和酶基因的功能鉴定及多基因辅助载体的系列化构建与应用
- 超长链多不饱和脂肪酸(very long chain polyunsaturated fatty acids,VLCPUFAs)是指含3个或3个以上双键且碳链长度大于18个碳原子的直链脂肪酸,如花生四烯酸(AA,20∶4...
- 刘江
- 关键词:二十碳五烯酸转基因植物
- 文献传递
- 球等鞭金藻中Δ5去饱和酶基因的克隆与功能鉴定被引量:1
- 2012年
- 球等鞭金藻(Isochrysis galbana)是一类单细胞海洋微藻,富含二十二碳六烯酸(DHA,22:6Δ4,7,10,13,16,19)。我们利用RACE的方法从球等鞭金藻cDNA文库中同源克隆到一个大小为1329 bp的cDNA片段,编码442个氨基酸的多肽,分子量约49.9 kD。生物信息学分析表明,其编码产物N端具有细胞色素b5结构域,以及与电子传递有关的三个富含组氨酸的结构域,与Pavlova salinaΔ5去饱和酶同源性最高,达56%,故将该基因命名为IgD5。酿酒酵母功能鉴定实验表明,其编码的蛋白质具有Δ5去饱和酶活性,能够将二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Δ8,11,14)转化成花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14),转化效率平均为34.6%,最高可达40.3%。
- 孙全喜李雪滢郑德松刘江李新征亓宝秀
- 关键词:球等鞭金藻
- 超长链多不饱和脂肪酸在棉花中的异源合成被引量:2
- 2014年
- 从球等鞭金藻、眼虫、高山被孢霉和拟南芥中分别克隆到Δ9链延长酶、Δ8去饱和酶、Δ5去饱和酶和Δ15去饱和酶基因,利用我们的多基因聚合方法,将这4个基因聚合到植物表达载体pCambia2300上,其中每个基因都含有独立的CaMV35S启动子和Tnos终止子。利用农杆菌介导法将该表达载体转入棉花,通过卡纳霉素和PCR筛选获得转基因阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20:5Δ5,8,11,14,17)含量分别达1.0%和5.0%。表明通过基因代谢工程在棉花中异源合成EPA是可行的,为进一步在棉籽中生产VLCPUFAs奠定了基础。
- 刘江马燕斌孙全喜吴霞李雪滢孙美红李燕娥李新征亓宝秀
- 关键词:去饱和酶转基因EPA棉花
- 二十碳五烯酸合成途径中去饱和酶基因的功能鉴定及多基因辅助载体的系列化构建与应用
- 超长链多不饱和脂肪酸(very long chain polyunsaturated fatty acids, VLCPUFAs)是指含3个或3个以上双键且碳链长度大于18个碳原子的直链脂肪酸,如花生四烯酸(AA,20:...
- 刘江
- 关键词:去饱和酶二十碳五烯酸密码子优化
- 文献传递
- 玉米幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的比较被引量:16
- 2011年
- 【目的】以育种上常用自交系的幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段为外植体,研究它们在愈伤诱导及植株再生之间的区别与联系,为建立以叶段为外植体的另一高效稳定的玉米组培体系提供技术参考。【方法】选用6个育种上常用自交系,以幼胚和幼嫩叶段为外植体分别进行愈伤诱导及植株再生,研究2,4-D对不同外植体初级愈伤组织诱导的影响,对不同来源的6个自交系分别统计诱导率及分化率,并观察愈伤组织的形态。【结果】不同外植体对2,4-D浓度的要求不同,且幼嫩叶段相对幼胚较难诱导愈伤且需要的2,4-D浓度更高。同一基因型的幼胚和幼嫩叶段形成的愈伤形态基本无区别,不同基因型之间愈伤形态有差异。不同来源的6个基因型的愈伤诱导率、分化率也存在差异。【结论】通过再生过程中幼胚和叶段多方面的比较,筛选到3个诱导率较高且愈伤形态优良的基因型齐319、Mo17和鲁原92。
- 陈靖董浩马海珍孙全喜刘江亓宝秀李新征董树亭
- 关键词:幼胚愈伤组织诱导
- 球等鞭金藻Δ5去饱和酶基因IgD5在拟南芥中的功能鉴定被引量:1
- 2013年
- 从球等鞭金藻中克隆到一个Δ5去饱和酶基因,命名为IgD5。系统发育树分析表明,该基因编码产物与来源于巴夫藻Pavlova salina的Δ5去饱和酶亲缘关系最近。此前通过酿酒酵母表达系统,证明IgD5对ω6脂肪酸具有Δ5去饱和酶活性,但并未鉴定IgD5对ω3脂肪酸的催化活性。我们将IgD5转化能够内源合成二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Δ8,11,14)和二十碳四烯酸(ETA,20:4Δ8,11,14,17)的已携带2个基因的拟南芥(简称TMA2),通过PCR及RT-PCR筛选阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20:5Δ5,8,11,14,17),含量分别达7.44%和2.07%,转化效率分别为68%和60%,证明IgD5在转基因植物中具有Δ5去饱和酶的活性,对ω3/ω6脂肪酸没有明显偏好性,并且催化活性远高于其在酵母中的活性。在转IgD5的TMA2中除了AA和EPA,没有检测到其他新脂肪酸,表明IgD5底物专一性很强,是一个可用于植物转基因替代生产鱼油的良好基因。
- 刘江孙全喜李新征亓宝秀
- 关键词:球等鞭金藻花生四烯酸二十碳五烯酸拟南芥