刘文彬
- 作品数:15 被引量:3H指数:1
- 供职机构:北京农学院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 融合蛋白Nt4CL7aPcSTS及其制备方法与应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL7aPcSTS及其制备方法与应用。本发明所提供的融合蛋白Nt4CL7aPcSTS,是由蛋白质Nt4CL和蛋白质PcSTS融合得到的融合蛋白:所述蛋白质Nt4CL是氨基酸序列是SEQ ID N...
- 王有年马兰青刘柳郭辉力刘欢刘文彬戴梦迪
- 融合蛋白Nt4CL3aPcSTS及其制备方法与应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL3aPcSTS及其制备方法与应用。本发明所提供的融合蛋白Nt4CL3aPcSTS,是由蛋白质Nt4CL和蛋白质PcSTS融合得到的融合蛋白:所述蛋白质Nt4CL是氨基酸序列是SEQ ID N...
- 郭辉力马兰青赵晓萌杨明峰刘欢马雅迪罗在柒杨亚东刘文彬张红冯静马腾马璇张煊宜
- 文献传递
- 来源于树莓的聚酮合酶RinPKS1及其相关生物材料与应用
- 本发明公开了一种来源于树莓的聚酮合酶RinPKS1及其相关生物材料与应用。聚酮合酶RinPKS1是如下a)或b)或c)的蛋白质:a)氨基酸序列如SEQ?ID?No.2所示的蛋白质;b)在SEQ?ID?No.2所示的蛋白质...
- 马兰青杨亚东赵晓萌郭辉力刘文彬刘欢张奋强黄丽娜
- 文献传递
- 融合蛋白Nt4CL5aPcSTS的相关生物材料及其应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL5aPcSTS的相关生物材料及其应用。本发明提供的融合蛋白Nt4CL5aPcSTS相关生物材料中包括融合蛋白Nt4CL5aPcSTS,所述融合蛋白Nt4CL5aPcSTS由蛋白质Nt4CL和...
- 郭辉力马兰青张红薛飞燕马雅迪杨亚东罗在柒刘文彬冯静刘欢姜英英
- 融合蛋白Nt4CL5aPcSTS及其制备方法与应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL5aPcSTS及其制备方法与应用。本发明所提供的融合蛋白Nt4CL5aPcSTS,是由蛋白质Nt4CL和蛋白质PcSTS融合得到的融合蛋白:所述蛋白质Nt4CL是氨基酸序列是SEQ ID N...
- 郭辉力马兰青赵晓萌柳春梅隗浩然杨亚东罗在柒刘文彬张红冯静马雅迪刘欢
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- 烟草4CL与虎杖STS融合基因的构建、表达及融合蛋白纯化被引量:2
- 2014年
- 白藜芦醇具有抗菌、抗癌、抗肿瘤、保护心血管、抗氧化等众多药理作用.4-香豆酰辅酶A连接酶(4-Coumarate-CoA ligase,4CL)和芪合酶(Stilbene synthase,STS)是其生物合成的关键酶和限速酶.本研究利用悬挂PCR (Overlap PCR)技术将白藜芦醇生物合成的最后两个关键酶4CL和STS的基因融合,构建原核表达pET30a-Nt4CL∷PcPKS5重组质粒,原核表达Nt4CL∷PcPKS5融合酶蛋白.预测其共编码945个氨基酸,含15个氨基酸的过渡氨基酸链(Linker),编码蛋白质分子量(Mr)为102.8 kDa,等电点(pI)为5.69.原核表达筛选结果表明:温度为25℃,IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导起始OD600值在0.4~0.6之间,诱导4h时目标蛋白的表达量最高.细胞破碎后,经Ni2+亲和柱纯化、PD-10柱脱盐后可纯化得到融合蛋白.本研究为通过分子生物学途径合成白藜芦醇奠定基础.
- 杨亚东郭辉力刘文彬杨明峰马兰青王有年
- 关键词:白藜芦醇融合基因双功能酶原核表达
- 融合蛋白Nt4CL3aPcSTS的相关生物材料及其应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL3aPcSTS的相关生物材料及其应用。本发明提供的融合蛋白Nt4CL3aPcSTS相关生物材料中包括融合蛋白Nt4CL3aPcSTS,所述融合蛋白Nt4CL3aPcSTS由蛋白质Nt4CL和...
- 郭辉力马兰青李相阳吕鹤书相薇马雅迪候羽罗在柒杨亚东刘文彬张红冯静刘欢贾晓堃张振宇
- 烟草Nt4CL与虎杖PcSTS基因的融合表达与功能分析被引量:1
- 2016年
- 4-香豆酰辅酶A连接酶(4-coumarate-Co A ligase,4CL)和芪合酶(stilbene synthase,STS)是白藜芦醇苯丙氨酸代谢合成的最后两个关键酶。运用悬挂PCR(overlap PCR)的方法将烟草4CL基因(Nt4CL)和虎杖STS基因(Pc PKS5)用3个中性氨基酸链连接,得到融合基因Nt4CL-Pc PKS5,将其插入原核表达载体中,构建p ET30a-Nt4CL-Pc PKS5重组质粒,表达Nt4CL-Pc PKS5融合蛋白。经Ni2+纯化和PD-10柱脱盐后,得到可溶性纯化蛋白。体外酶促反应结果表明该融合酶具有4CL和STS的双重活性,其催化产物为白藜芦醇。酶促反应最适条件为:p H 6.5,反应温度为45℃。研究结果获得了有效催化白藜芦醇生物合成的双功能融合酶,为进一步利用融合酶基因转化工程菌株实现白藜芦醇工业化生产奠定了基础。
- 刘文彬郭辉力刘欢黄丽娜张奋强马兰青
- 关键词:白藜芦醇融合基因原核表达酶促反应
- 融合蛋白Nt4CL7aPcSTS的相关生物材料及其应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL7aPcSTS的相关生物材料及其应用。本发明提供的融合蛋白Nt4CL7aPcSTS相关生物材料中包括融合蛋白Nt4CL7aPcSTS,所述融合蛋白Nt4CL7aPcSTS由蛋白质Nt4CL和...
- 马兰青郭辉力赵晓萌杨明峰杨亚东刘文彬刘欢
- 文献传递
- 融合蛋白Nt4CL7aPcSTS及其制备方法与应用
- 本发明公开了融合蛋白Nt4CL7aPcSTS及其制备方法与应用。本发明所提供的融合蛋白Nt4CL7aPcSTS,是由蛋白质Nt4CL和蛋白质PcSTS融合得到的融合蛋白:所述蛋白质Nt4CL是氨基酸序列是SEQ ID N...
- 王有年马兰青刘柳郭辉力刘欢刘文彬戴梦迪
- 文献传递