刘广臣
- 作品数:7 被引量:4H指数:1
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金吉林省重大科技攻关项目更多>>
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- 表达NDV HN基因抗肿瘤重组腺病毒对骨肉瘤细胞的体内、外抑制作用研究
- 本文旨在探讨抗肿瘤重组腺病毒Ad-HT对骨肉瘤细胞的体内、外抑制作用和作用方式。应用噻唑兰染色法评估Ad-HT对OS-732细胞的抗肿瘤作用。应用AO/EB染色法、DAPI染色法、Annexin V检测和Caspase酶...
- 刘广臣
- 关键词:重组腺病毒新城疫病毒骨肉瘤抗肿瘤
- 文献传递
- 双特异性抗肿瘤重组腺病毒对前列腺癌细胞的抑制作用
- 2012年
- 目的探讨结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒Ad—hTERTp—Ela—Apoptin(Ad—VT)对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法于96孔板内制备前列腺癌PC一3单层细胞(5×10^3个/孔),分别用100个感染复数(multiplicityofinfection,MOI)、10MOI和1MOI的重组腺病毒Ad—VT、Ad—CMV—Apoptin(Ad—VP3)、Ad—hTERTp—E1a—EGFP(Ad.GT)和Ad—CMV.EGFP(Ad—EGFP)进行感染,以未感染孔为对照,每个剂量设3个复孔。采用96h噻唑盐(MTT)法,检测重组腺病毒埘PC-3细胞的抑制作用。于6孔板制备PC-3单层细胞(1×10^6个/孔),分别用100MOI的Ad—VT、Ad—VP3、Ad-GT和Ad—EGFP感染PC-3细胞,培养48h后,分别应用AO/EB染色法、DAPI染色法、AnnexinV检测法对PC-3细胞进行染色,在显微镜下观察细胞形态,分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式;应用Caspase榆测法对PC-3细胞提取总蛋白,检测Caspase酶活性,分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式。结果MTT法结果显示除Ad.EGFP外,Ad—VT、Ad—VP3和Ad—GT均不同程度地表现出对PC-3细胞的抑制作用,其中Ad—VT、Ad—GT的抑制作用强于Ad—VP3,差异有统计学意义(P〈0.05);培养48、72、96h,随着MOI的增高,Ad—VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定剂量效应关系趋势,感染剂量为100MOI时,Ad.VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定时间效应关系趋势。通过AO/EB、DAPI、AnnexinV检测法和Caspase酶活性检测结果显示,Ad—VT可通过诱导PC-3细胞的捌亡抑制PC-3细胞的增殖。其中AO/EB染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞呈现橘红色;DAPI染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞细胞核呈现亮蓝色,且存在核内物质碎裂;AnnexinV检测法可观测到经Ad—VT感染的PC.3细胞出现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加等凋亡特征;Caspase检测结果显示Ad—VT可明显上调Caspase2、3、6、8�
- 王金辉张慕淳李霄齐延新刘广臣孙丹丹金宁一
- 关键词:前列腺癌凋亡素重组腺病毒凋亡
- 周围神经损伤后局部应用鹿茸多肽对骨折早期愈合的影响
- 目的:探讨周围神经损伤后局部应用鹿茸多肽对骨折早期愈合的影响,并观察其对血管内皮生长因子( VEGF) 、一氧化氮合酶( NOS) 及其异构体酶活性和碱性磷酸酶( ALP) 活性的影响,从而探究其促进骨折早期愈合的机制。
- 刘广臣郑鹏王林祥吴迪张海鹏赵天昊谭磊秦大明孙大辉
- 关键词:周围神经损伤鹿茸多肽骨折愈合NOSALP
- 鹿茸多肽对成骨细胞及骨质疏松大鼠骨折愈合过程中BMP-4 mRNA表达的影响
- 目的:研究鹿茸多肽对成骨细胞增殖、分化以及骨形成蛋-4(BMP-4)mRNA表达的影响,同时观察其对骨合成代谢的作用。方法:以酶序列消化法从新生大鼠颅骨分离、培养成骨细胞,体外培养培养成骨细胞,采用碱性磷酸酶染色和钙结节...
- 刘广臣郑鹏王林祥吴迪张海鹏赵天昊谭磊秦大明孙大辉
- 关键词:鹿茸多肽成骨细胞骨质疏松BMP-4
- 趋化因子CXCL6与其受体CXCR2调控β-catenin促进骨肉瘤转移机制的研究
- 背景及目的:骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是一种高度恶性肿瘤,10%-20%患者确诊时病灶已发生转移。由于骨肉瘤转移是一个复杂的病理过程,涉及到多种信号转导途径,因此,骨肉瘤高转移、高侵袭特性相关机制是人们长期...
- 刘广臣
- 文献传递
- 桡骨远端不稳定型骨折LCP内固定与石膏外固定的疗效比较
- 目的:比较切开复位LCP内固定与手法复位石膏外固定治疗桡骨远端不稳定型骨折的临床疗效。方法:将我院自2012年5月-2014年5月收治的46例桡骨远端不稳定型骨折的患者,分别纳入手术治疗组和保守治疗组,手术治疗组均采用掌...
- 王林祥李雪飞刘广臣赵滨张海鹏谭磊秦大明孙大辉
- 关键词:骨折桡骨远端切开复位内固定石膏外固定
- 双特异性重组腺病毒Ad-HT对肝癌细胞的体内、外抑制效应被引量:1
- 2012年
- 目的:探讨双特异性抗肿瘤重组腺病毒Ad-HT对肝癌细胞的体内、外抑制作用和作用方式。方法:运用噻唑兰法检测重组腺病毒Ad-HT对BEL-7402细胞的抑制作用;应用AO/EB染色法、DAPI染色法、Annexin V检测、Caspase检测、线粒体膜电位检测和活性氧检测等多种方法分析Ad-HT对BEL-7402细胞抑制作用的方式和途径;构建C57BL/6小鼠荷H22肿瘤模型,瘤内注射重组腺病毒,通过非放射性乳酸脱氢酶细胞毒性检测方法,检测NK活性、CTL活性,利用酶联免疫吸附方法检测IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ等细胞因子水平,探讨Ad-HT对体内实体肿瘤的抑制作用和对免疫系统的影响。结果:Ad-HT能够抑制BEL-7402细胞生长,且其作用具有一定时效和剂效关系趋势;Ad-HT感染导致BEL-7402细胞磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加、Caspase酶活性增强、线粒体膜电位下降和活性氧水平升高;Ad-HT实验组模型动物平均期在30天以上,显著高于对照组;另外,Ad-HT具有增强NK和CTL活性,上调IL-2和IFN-γ等细胞因子水平的功能。结论:Ad-HT能够通过诱导细胞凋亡,抑制BEL-7402肿瘤细胞增殖,而这种抑制作用可能通过线粒体途径实现。另外,Ad-HT能够有效延长模型动物平均生存期,活化免疫功能细胞,并使免疫趋向Th1优势。
- 刘广臣孙大辉齐延新王金辉王卓越吴娜朴秉国金宁一李霄
- 关键词:NDVHN重组腺病毒BEL-7402