刘冠达
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:广西中医学院更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 构建携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的重组反转录病毒表达载体pLXSN-Kozak-EGFP及鉴定被引量:1
- 2010年
- 背景:增强型绿色荧光蛋白作为报告基因可在活细胞中表达发光蛋白。研究表明通过促进表达增强的Kozak序列可促进基因编码的蛋白质在真核细胞中的表达。目的:构建含增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP与促进表达增强的Kozak序列的pLXSN-Kozak-EGFP重组反转录病毒表达载体,并对此重组载体进行鉴定。方法:用聚合酶链反应方法从含增强型绿色荧光蛋白基因的表达载体pEGFP-N1上高保真克隆出EGFP基因,通过分子克隆技术将目的基因重组至反转录病毒表达载体pLXSN。用菌斑快速聚合酶链法筛选阳性重组子,针对目的基因插入载体的方向设计鉴别插入方向的引物,用聚合酶链反应法、限制性酶法鉴定目的基因及连接的正向性,并对pLXSN-Kozak-EGFP重组载体进行DNA测序分析。结果与结论:从pEGFP-N1载体中克隆出上游含Kozak序列的EGFP基因,目的条带大小约750bp。构建的pLXSN-Kozak-EGFP重组子经菌落PCR鉴定,750bp处有特异性条带。插入方向经PCR鉴定,350bp处有特异性条带。限制性内切酶法鉴定,750与6000bp处有特异性条带。DNA测序比对结果表明克隆的目的基因与Kozak-EGFP一致性为100%。结果提示实验成功构建了含EGFP报告基因与促进表达增强的Kozak序列的pLXSN-Kozak-EGFP重组反转录病毒表达载体,且插入方向为正向。
- 杨天燕王乃平王劲刘冠达韦锦斌
- 关键词:增强型绿色荧光蛋白报告基因反转录病毒
- 临床药物治疗中氨茶碱与甲泼尼龙琥珀酸钠注射液配伍问题的分析被引量:4
- 2012年
- 目的对氨茶碱与甲泼尼龙琥珀酸钠是否可注射配伍使用的问题进行系统分析,为抢救与治疗必须严格限制液体用量的危重患者联合使用两药时提供合理的指导性建议。方法 SPSS15.0软件统计分析该院2006~2009年住院期间配伍使用氨茶碱与甲泼尼龙琥珀酸钠的589例患者病例。检索国外权威数据库与国内相关资料,对返回信息进行汇总分析。结果临床治疗中普遍采用氨茶碱与甲泼尼龙琥珀酸钠联合用药的治疗方案,其中在呼吸内科与危重症监护病区中,两种药物的联用更为常见。国外权威数据库的检索结果均表明,两药可配伍使用;国内相关资料则表明,两药禁止配伍注射。结论国内目前相关资料迥异于国外权威数据库,有待修订。氨茶碱与甲泼尼龙琥珀酸钠在常规临床使用条件下不存在配伍禁忌,尤其在抢救必须严格限制静脉输注液体量的危重症患者时,两药配伍使用以控制液体输注量尤为必要。
- 杨天燕刘冠达王劲王乃平
- 关键词:临床药物治疗氨茶碱甲泼尼龙琥珀酸钠药物配伍