刘军华
- 作品数：4 被引量：9H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白血病相关基因zo-1参与白血病发病过程及其机制的初步研究被引量：1
- 2009年
- 本研究探讨新的白血病相关基因zo-1在白血病细胞中的作用及其初步机制。应用甲基化PCR方法验证THP-1等白血病细胞中基因zo-1甲基化与白血病的关系,用甲基化PCR及RT-PCR方法验证THP-1等白血病细胞系中基因zo-1甲基化与基因表达的关系。选择基因zo-1高表达的THP-1细胞,用脂质体Oligofectamine将针对基因zo-1的小干扰RNA转染THP-1细胞,RT-PCR方法验证抑制效率,AnnexinV和PI观察细胞凋亡率,PI检测细胞周期,CCK-8检测细胞增殖。结果表明:急性白血病人中基因zo-1呈高甲基化状态,健康人群中基因zo-1不发生甲基化。基因zo-1未甲基化的THP-1细胞系高表达基因zo-1;基因zo-1高甲基化的Molt4及HL-60细胞系中不表达基因zo-1。脂质体Oligofectamine转染针对zo-1的小干扰RNA成功地抑制了THP-1细胞基因zo-1的表达,而不影响THP-1细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡。结论:基因zo-1为白血病相关基因,急性白血病中基因zo-1高甲基化,基因zo-1的甲基化状态调控基因zo-1表达。THP-1细胞中基因zo-1表达缺失不影响细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡。
- 窦立萍刘军华王畅赵瑜王全顺刘景华刘春蕙楼方定于力
- 关键词：白血病ZO-1基因甲基化
- ZO-1基因与白血病相关性的研究及其在K562细胞中高表达意义的探讨被引量：3
- 2009年
- 目的探讨白血病细胞ZO-1基因的表达、甲基化情况及其与白血病发生的相关性。方法应用基因组限制性酶切扫描（RLGS）技术自白血病小鼠标本中钓取ZO-1基因，用甲基化PCR方法检测白血病细胞系Molt4、HL-60、K562细胞及白血病患者原代白血病细胞及正常人外周血单个核细胞ZO-1基因甲基化水平，用RT—PCR方法检测ZO-1基因表达水平，并对高表达ZO-1基因的K562细胞进行小干扰RNA（siRNA）靶向干扰，然后用Northern blot方法验证ZO-1基因抑制效率，用CCK-8检测细胞增殖情况，膜联蛋白V（Annexin V）和碘化丙锭（PI）双染色法观察细胞凋亡率及细胞周期。结果采用RLGS技术从白血病小鼠标本中成功钓取ZO-1基因。原代白血病细胞及Molt4、HL-60细胞ZO-1基因呈高甲基化状态，ZO-1基因表达水平较正常人外周血细胞明显下降或不表达。正常人外周血单个核细胞ZO-1基因不发生甲基化，ZO-1基因高表达。K562细胞高表达ZO-1基因，未见ZO-1基因甲基化；去甲基化药物可以诱导Molt4及HL-60细胞重新表达ZO-1基因。经ZO-1小干扰RNA干预的K562细胞ZO-1基因的表达明显降低，但并不影响细胞的增殖及凋亡。结论绝大多数急性白血病细胞中ZO-1基因呈高甲基化状态，表达明显降低，ZO-1基因是一个白血病相关基因。其在K562细胞中高表达的意义尚不明确。
- 窦立萍刘军华王畅赵瑜王全顺刘景华刘春蕙楼方定于力
- 关键词：白血病DNA甲基化
- 电穿孔转染K562细胞的效率研究被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨脂质体转染与电穿孔转染的效率,观察电转染对K562细胞凋亡的影响。方法:以GFP为报告基因,通过脂质体转染及电穿孔两种方式转染K562细胞,荧光显微镜下观察并计算转染效率,Annexin V和PI观察细胞凋亡率。结果:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,电穿孔转染效率10%左右,脂质体转染效率小于1%。电穿孔时K562细胞凋亡率为40%。结论:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,但细胞凋亡率也高。
- 窦立萍刘军华王畅康慧媛刘景华卢学春靖彧薄剑王全顺
- 关键词：脂质体转染电穿孔细胞凋亡
- 绿色荧光蛋白标记的报告系统优化K562细胞转染条件的研究被引量：3
- 2008年
- 本研究旨在提高基因转染人红白血病细胞株K562的转染效率,同时观察绿色荧光蛋白(GFP)作为报告系统用于转染条件优化的可行性。目的基因以GFP为报告系统,通过脂质体转染及电穿孔两种方式转染K562细胞,荧光显微镜下观察并计算转染效率。结果表明:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,电穿孔转染效率在10%左右,而脂质体转染效率小于1%。结论:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,GFP可作为报告系统优化K562细胞转染条件。
- 窦立萍刘军华王畅刘景华康慧媛靖彧赵瑜薄剑王全顺楼方定于力
- 关键词：绿色荧光蛋白脂质体转染电穿孔K562细胞
