刘佳
- 作品数：16 被引量：46H指数：4
- 供职机构：广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：广州市重大科技攻关项目广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 蛋白质多肽文库构建中限制性显示技术的接头设计
- 2005年
- 为了探讨限制性显示(RD)技术在构建蛋白质多肽文库中灵活的接头设计,分别根据原核表达载体pET22b以及酵母表达载体pNMT-TOPO设计了三套接头,三套接头依次增加一个碱基以保证与之连接的片段总有可能表达正确的开放阅读框.然后以HIV-1B亚型代表株U26942全基因质粒DNA为对象,利用RD技术分别建立了相应的蛋白质多肽文库.从每个库中各随机挑选12个克隆进行测序分析并进行蛋白质表达预测.结果从原核表达文库中获得了一个可以表达HIVPol多肽的克隆,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示该克隆在细菌BL21(DE3)中有较高的表达,蛋白质印迹为阳性,与理论预测相符.这些结果提示,RD技术是一种建立基因组随机多肽文库的新方法,该方法灵活的接头设计可以满足不同的表达载体需求.
- 马文丽刘佳李凌张宝师永霞郑文岭
- APC不同功能区域对结肠癌细胞株HT-29中β-连环蛋白表达的影响被引量：8
- 2010年
- 目的:探讨含有APC蛋白不同功能区域的pEGFP-N3-APC重组质粒对结肠癌细胞株HT-29中β-连环蛋白表达的影响。方法:脂质体介导重组质粒pEGFP-N3-APC1～5转染HT-29,采用绿色荧光及RT-PCR验证重组质粒在细胞中的表达。以Western免疫印迹检测转染后HT-29细胞中β-连环蛋白的表达,以SPSS13.0软件分析电泳条带的灰度值。结果:重组质粒转染HT-29细胞后,绿色荧光及RT-PCR结果显示5个APC蛋白不同功能区域多肽可在细胞中表达。Western免疫印迹结果显示,重组质粒pEGFP-N3-APC1,pEGFP-N3-APC2和pEGFP-N3-APC3对β-连环蛋白表达无影响,而pEGFP-N3-APC4和pEGFP-N3-APC5均可降低结肠癌细胞株HT-29中β-连环蛋白的表达水平,其中以pEGFP-N3-APC5的抑制程度最强。结论:含有APC蛋白中15氨基重复序列+SAMP重复序列的APC5基因片段既可有效降低β-连环蛋白的表达,同时又是相对长度较短的可用于基因治疗的最优片段。
- 吕梁霍继荣刘佳武捷王捷
- 关键词：APC重组质粒转染Β-连环蛋白
- GFP为报告基因的酵母哺乳动物细胞穿梭载体的构建及其在人血管内皮细胞中的表达被引量：6
- 2003年
- 为研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用 ,需要一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞中表达的穿梭载体 .利用通用载体质粒融合系统 (UPS)构建了一种以GFP为报告基因的新载体 ,以常规的氯化锂法对酿酒酵母进行转化 ,证明该载体能够在酵母中复制 ;以脂质体介导向人血管内皮细胞进行了转染 ,有绿色荧光 ,证明该载体能够在哺乳动物细胞中表达 .
- 王弘郑文岭杨连生杨太成刘佳冼江崔东马文丽
- 关键词：酵母穿梭载体人血管内皮细胞
- 噬菌体展示抗体文库的研究进展被引量：1
- 2004年
- 刘佳郑文岭马文丽
- 关键词：噬菌体展示
- 一种改进型唤醒头架
- 本实用新型公开了一种改进型唤醒头架，包括垂直于输液架水平设置的延长杆和设置在延长杆端头的头架，延长杆的端头还连接有彼此铰接的斜杆和发光棒，发光棒的一端设有固定于延长杆上可沿延长杆滑动的滑动连接装置。此改进型唤醒头架通过水...
- 胡玲卢昌懿栾翰林任明进杨翠风蔡佩霞刘佳
- 文献传递
- 应用Agilent 2100 Bioanalyzer分析限制性显示技术制备的HIV片段库被引量：1
- 2005年
- 使用Agilent 2 10 0Bioanalyzer分析限制性显示技术 (restrictiondisplay ,RD)制备的HIV片段库 .利用合适的限制酶从质粒上获得HIVB亚型代表株U2 6 94 2全基因cDNA ,然后将目的片段进行Sau3AⅠ消化 ,在消化得到的片段两端加接头 ,利用通用引物进行PCR扩增 ,扩增结果通过琼脂糖凝胶电泳以及Agilent 2 10 0Bioanalyzer两种方法分析 .结果显示 ,Agilent 2 10 0Bioanalyzer比琼脂糖凝胶电泳能更快速、直接和客观地反映RD技术制备的DNA片段的大小以及含量 ,并能对RD PCR过程中片段自身连接以及优势扩增的现象进行直接的监控作用 .
- 刘佳马文丽李凌郑文岭
- 关键词：限制性显示技术AGILENT
- GnRH类似物对化疗大鼠卵泡凋亡的影响被引量：4
- 2010年
- 目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)、拮抗剂(GnRH-ant)对环磷酰胺(CTX)诱导的大鼠卵泡凋亡的干预作用。方法36只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为6组,即实验对照组、CTX组、GnRH-a+生理盐水(NS)组、GnRH-a+CTX组、GnRH-ant+NS组及GnRH-ant+CTX组,每组6只,于结束用药的第1～2周内的动情间期处死,采用末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)结合透射电镜检测卵泡的凋亡情况。结果(1)TUNEL检测晚期生长卵泡的颗粒细胞凋亡率高于早期卵泡,使用CTX组别的卵母细胞、颗粒细胞的凋亡率高于相应对照组,其差异均有显著性意义(P<0.05)。其中GnRH-a两组[(33.40±4.59)～(73.25±5.35)]的颗粒细胞凋亡率较GnRH-ant两组[(27.46±4.52)～(49.38±5.02)]明显升高,其差异有显著性意义(P<0.05);但早期卵泡卵母细胞的凋亡率在GnRH-a两组[(23.48±4.25)～(36.15±4.23)]与GnRH-ant两组[(21.47±3.81)～(34.04±5.54)]的相应组间差异无显著性意义(P>0.05)。(2)电镜下在早期卵泡的卵母细胞、颗粒细胞、晚期生长卵泡的颗粒细胞可见凋亡的特征性改变。其中颗粒细胞核表现典型,可见典型的半月形凋亡小体形成,而卵母细胞核仅见染色质浓缩、边集、凝聚。结论GnRH-a、GnRH-ant对化疗大鼠的卵泡凋亡产生不同的调控作用,前者促进卵泡凋亡,而后者抑制卵泡凋亡。GnRH类似物主要调控卵泡颗粒细胞的凋亡,而对卵母细胞的凋亡调控作用不明显。
- 彭萍莫亚勤杨传红张伟张艳玲刘佳叶长烂杨冬梓
- 关键词：促性腺激素释放激素类似物卵泡细胞凋亡
- 术中唤醒术的临床应用与护理要点
- 胡玲刘佳黄娟杨翠凤
- 人肾上腺皮质癌SW-13细胞株的培养和生物学特性
- 2007年
- 目的探讨人肾上腺皮质癌SW-13细胞株的培养方法及生物学特性。方法将SW-13细胞株进行体外培养，MTT法检测其生长曲线，电镜下、光镜下进行细胞形态学观察。结果细胞需在37℃，无CO2，偏碱性环境下培养，6—8h完全贴壁，2d左右进入对数生长期。细胞生物学性状稳定。结论SW-13细胞株是一种生物学特性稳定、实用的细胞株，相信随着研究的进一步深入，其必将发挥更大的作用价值，有着更广的研究领域。
- 沈文冼江胡卫列刘佳赖晃文
- 关键词：肾上腺皮质肿瘤
- 胰岛素样生长因子及其I型受体抗体对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株体外生长的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨胰岛素样生长因子及其I型受体抗体对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株体外生长的影响。方法采用MTT法描绘不同浓度胰岛素样生长因子及其I型受体抗体作用后SW-13细胞株体外培养生长的促进及抑制曲线,并比较不同浓度胰岛素样生长因子和其I型受体抗体组及单一胰岛素样生长因子或其I型受体抗体组与阴性对照组之间的差异。结果胰岛素样生长因子能明显促进SW-13细胞增殖,其作用效果与作用浓度在一定浓度范围内呈正相关(P<0.05);而胰岛素样生长因子I型受体抗体能抑制胰岛素样生长因子对SW-13细胞的刺激作用,并且对SW-13细胞的增殖亦有直接抑制的作用(P<0.05)。结论胰岛素样生长因子可促进SW-13细胞株的生长,而这种作用亦是通过胰岛素样生长因子I型受体传导;胰岛素样生长因子I型受体抗体可明显抑制这种生物学作用,可能在肾上腺皮质癌的治疗中发挥重要作用。
- 沈文冼江胡卫列刘俊刘佳
- 关键词：肾上腺肿瘤胰岛素样生长因子细胞培养
