凌家俭
- 作品数：17 被引量：49H指数：5
- 供职机构：南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 环氧化酶-2与1型糖尿病被引量：2
- 2003年
- 1型糖尿病是以胰岛β细胞破坏为特征,细胞因子对胰岛β细胞损伤在其发病中起重要作用。细胞因子诱导环氧化酶(COX)-2表达,导致前列腺素E2水平增高,后者对胰岛β细胞发挥细胞抑制和毒性效应,造成了β细胞损害。研究还发现COX-2基因的高水平表达与糖尿病并发症的发生关系密切。对胰岛β细胞损伤过程中COX-2参与机制的研究可能为1型糖尿病的防治提供新的措施。
- 凌家俭韩晓
- 关键词：1型糖尿病环氧化酶-2前列腺素E2并发症
- 脂肪细胞在肝细胞胰岛素耐受过程中的作用被引量：6
- 2007年
- 目的研究脂肪细胞在不同分化阶段对肝细胞胰岛素抵抗的影响。方法体外诱导3T3-L1脂肪前体细胞分化,细胞内脂滴增加,逐步分化成脂肪细胞。采用不同分化阶段脂肪细胞(未分化0d、中期分化4d、接近完全分化8d)与原代肝细胞共培养。Western印迹法检测共培养后肝细胞内胰岛素信号通路的反应性;葡萄糖同位素标记方法检测肝细胞糖原合成能力。结果以未共培养的肝细胞为对照组,共培养后肝细胞内胰岛素受体底物-2酪氨酸磷酸化(Tyr612)(pIRS-2)水平及Akt磷酸化(Ser473)(pAkt)水平均显著下调;肝糖原合成能力明显降低;与较成熟脂肪细胞共培养后,肝细胞pIRS-2及pAkt水平与其他分化阶段组共培养比较下调明显,肝糖原合成能力随着脂肪细胞的成熟而明显降低。结论脂肪细胞可能诱导肝细胞发生胰岛素抵抗,肝细胞胰岛素信号通路的阻滞程度与脂肪细胞的分化程度呈正相关。
- 张日华凌家俭陈俊汪振诚韩晓王林涛
- 关键词：3T3-L1脂肪细胞肝细胞IRS-2AKT
- CDC对胰岛β细胞中COX-2表达及PGE2生成的影响
- 2007年
- 目的观察12/15脂氧合酶抑制剂CDC对大鼠胰岛β细胞中环加氧酶2(COX-2)的表达及前列腺素E2(PGE2)生成的影响,并初步探讨其机制。方法体外培养大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞,加入细胞因子IL-1β诱导COX-2蛋白的表达,然后采用Western印迹的方法观察12/15脂氧合酶抑制剂cin-naminyl-3,4-dihydroxy-α-cyanocinnamate(CDC)对COX-2蛋白表达的影响;借助萤光素酶报告基因技术检测CDC对COX-2启动子转录活性的影响,最后用放射免疫法了解CDC对胰岛β细胞中PGE2生成的抑制作用。结果细胞因子IL-1β能够在大鼠胰岛β细胞系INS-1中诱导COX-2基因的表达,而12/15脂氧合酶抑制剂CDC能够呈剂量依赖抑制IL-1β所诱导的COX-2蛋白的表达。结论12/15脂氧合酶抑制剂能够明显抑制炎性因子IL-1β所诱导的胰岛β细胞中COX-2的表达和炎性介质PGE2的生成。
- 朱云霞蔡晓萍王林涛凌家俭
- 关键词：环加氧酶2前列腺素E2胰岛B细胞
- 卫氏肺吸虫成虫cDNA文库的多抗筛选被引量：8
- 2001年
- 目的 :从卫氏肺吸虫成虫 c DNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 :采用预吸收成虫抗原免疫兔血清 ( IRS,多抗 )筛选阳性克隆 ,经 PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。选取插入片段不同的两个克隆测定其 DNA序列 ,用 BL AST软件对所得 DNA序列进行同源性比较。结果 :得到 P.w- 2 ,P.w- 4两个阳性克隆 ,长度分别为 80 1bp和 10 5 3 bp,分别与卫氏肺吸虫原组织蛋白酶 L和卫氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶基因同源 ,同源程度分别为 99%、86%。结论 :用卫氏肺吸虫成虫多抗筛选成虫 c DNA文库 ,所获 P.w- 2和 P.w-
- 凌家俭章子豪张耀娟
- 关键词：CDNA文库免疫学筛选并殖吸虫肺吸虫病
- 高活性α-淀粉酶的分离与纯化被引量：2
- 2009年
- 目的研究高活性α-淀粉酶分离与纯化的新方法。方法运用吸附树脂和离子交换的方法,分离纯化α-淀粉酶。结果吸附树脂分离纯化所得α-淀粉酶的活性约为60000U/g,DEAE-纤维层析所得α-淀粉酶的活性在吸附树脂法的基础上提高了约1倍。结论该方法分离纯化α-淀粉酶简便,成本低,便于工业化生产。
- 凌家俭王宁王林涛
- 关键词：Α-淀粉酶离子交换法发酵液吸附树脂
- 一氧化氮在胰岛β细胞内对环加氧酶2表达、前列腺素E2合成的影响及前列腺素E2引起胰岛β细胞功能紊乱作用机制的研究
- 随着人们生活水平的提高,糖尿病的发病率呈上升趋势。目前在全世界约有1.5亿患者。在所有糖尿病患者中,1型糖尿病患者约占10/%,它起病急,病情重,严重地危害着人类的生命和健康。1型糖尿病是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,...
- 凌家俭
- 关键词：环加氧酶-2前列腺素E2一氧化氮胰岛Β细胞
- 文献传递
- 维生素A治疗烧伤病人的疗效观察
- 2002年
- 凌家俭刘晓华王春明柳劲梅
- 关键词：维生素A烧伤
- 卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究被引量：4
- 2002年
- 目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Westernblotting)对表达产物进行鉴定。结果:成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中。其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异性识别。结论:成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。
- 凌家俭侯敏刘剑南章子豪张耀娟
- 关键词：卫氏并殖吸虫重组抗原亚克隆CDNA文库
- 卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库阳性克隆的筛选、序列分析及表达
- 并殖吸虫病免疫诊断与预防难的问题越来越受到重视,其难点在于始终未能从虫体中直接分离出具有高度特异性、敏感性的诊断用抗原以及具有免疫保护性质的蛋白质.为了筛选出有诊断意义或保护作用的抗原分子,我们进行了下列研究：一、卫氏并...
- 凌家俭
- 关键词：卫氏并殖吸虫CDNA文库免疫学筛选
- 文献传递
- 卡氏肺孢子虫病免疫学和分子生物学诊断的研究被引量：1
- 2001年
- 1980年代,通过基因及基因表达产物分析,发现卡氏肺孢子虫与真菌中的子菌高度同源,被认为是一种真菌[1].PC是条件致病菌,可引发卡氏.肺孢子虫肺炎(PCP).PCP是AIDS患者及其它免疫缺陷病人重要的致死原因之一,因此PCP的早期诊断是减少病死率的关键.传统的PCP的实验室诊断依赖细胞化学染色法,但染色及镜检技术要求较高,故灵敏度受到限制.近年来,随着免疫学分子生物学发展,越来越多的新技术应用于PCP的诊断.本文仅就国内外有关PCP的免疫学诊断及分子生物学诊断的研究作一综述.
- 凌家俭张耀娟章子豪
- 关键词：免疫学诊断分子生物学诊断卡氏PCP扩增技术
