傅桂莲
- 作品数：45 被引量：86H指数：6
- 供职机构：北华大学医学检验学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省教育厅科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- E6-AP对前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖和细胞周期的影响
- 2011年
- 目的:研究E6相关蛋白(E6-AP)对前列腺癌细胞增殖和细胞周期的影响,阐明E6-AP在雄激素受体通路中的作用机制及在前列腺癌发生发展中的作用。方法:采用电穿孔方法制备tTA及E6-AP稳定转染细胞株;利用强力霉素(DOX)的调节作用,通过MTT实验观察E6-AP过表达及低表达对LNCaP细胞增殖的影响;利用流式细胞仪进行PI单染色检测E6-AP过表达及低表达对LNCaP细胞周期进程的影响。结果:成功构建双质粒稳定转染细胞株,与E6-AP低表达的LNCaP细胞和DOX关闭表达后的稳定株比较,E6-AP过表达的LNCaP细胞数目明显增多(P<0.01),且处于S期的细胞比例明显增大(P<0.01)。结论:E6-AP过表达可促进LNCaP细胞增殖并促进细胞进入S期,提示E6-AP与雄激素受体信号通路有密切关联。
- 杜培革韩笑梁骥安丽萍徐广宇李贺傅桂莲
- 关键词：前列腺肿瘤细胞增殖细胞周期
- 反义人端粒酶催化亚单位基因转染对人结肠癌细胞恶性表型的逆转作用
- 2005年
- 利用基因重组技术,人端粒酶催化亚单位基因反向插入真核表达载体pcDNA3.0,获得重组体pcDRTRT,通过脂质体法导入人结肠癌细胞株SW-111C,获得稳定转染细胞系,即反义细胞.该细胞易脱落,出现明显生长抑制现象;失去叠落生长能力;流式细胞仪(FCM)证实导入反义hTRT后,G0/1期细胞增加,G2M和S期细胞减少,增殖指数(PI)降低;且不能在软琼脂中形成集落.说明反义hTRT基因体外导入结肠癌细胞株SW-111C可以明显降低端粒酶活性,抑制结肠癌细胞的增殖且能使其恶性表型发生逆转.
- 杜培革董俊红王振明安丽萍傅桂莲
- 关键词：人端粒酶催化亚单位人结肠癌细胞反义基因治疗
- 分泌型磷脂酶A_2cDNA与载体pRc/CMV定向克隆及表达被引量：1
- 1999年
- 为了构建分泌型磷脂酶Ａ２（ｓｅｃｒｅｔａｒｙ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２，ｓＰＬＡ２） ｃＤＮＡ的有效表达系统，该文从无效表达的重组体ｓＰＬＡ２ － ｐＧＥＭ７ 中制备ｓＰＬＡ２ 片段，将其插入中间载体ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＢＳＳＫＲ的ＥｃｏＲ１ 位点，利用ｓＰＬＡ２－ ＢＳＳＫ重组体转化ＤＨ１ 感受态细胞，筛选ａｎｔｉｓｅｎｓｅｓＰＬＡ２－ ＢＳＳＫ 重组体，应用Ｘｂａｌ、Ｈｉｎｄ３ 双酶消化该重组体并回收带有不同粘性末端的ｓＰＬＡ２ 片段，因Ｘｂａｌ、Ｈｉｎｄ３ 消化载体ｐＲｃ／ＣＭＶ，使之线性化并带有Ｘｂａｌ、Ｈｉｎｄ３ 的粘性末端。ｓＰＬＡ２ 定向插入ｐＲｃ／ＣＭＶ 载体，构建成具有ＣＭＶ 强启动子的表达系统。重组体转染鼠巨噬细胞，扩增培养，从细胞中提取总ＲＮＡ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交法检测ｓＰＬＡ２ ｍＲＮＡ。结果表明ｐＲｃ／ＣＭＶ 可以用于ｓＰＬＡ２ 表达及各种因素影响表达的研究。
- 傅桂莲盖晓东刘华欣
- 关键词：磷脂酶A2定向克隆NORTHERN杂交
- 鹿鞭毛细管电泳DNA指纹图谱及建立方法和应用
- 本发明涉及中药鉴定技术领域，具体为一种鹿鞭毛细管电泳DNA指纹图谱及建立方法和应用。鹿鞭毛细管电泳DNA指纹图谱的构建方法包括鹿鞭DNA的提取、鹿鞭DNA的PCR扩增、PCR扩增产物的分析、最终建立鹿鞭毛细管电泳DNA指...
- 苑广信李明成刘桐辉王淼张丽华李洪宇傅桂莲王冰梅
- 文献传递
- 血管紧张素转换酶基因多态性及其酶活性与冠心病关系的研究
- 2002年
- 目的 研究血管紧张素转换酶 (ACE)基因多态性、血管紧张素转换酶活性与冠心病的相关关系。方法 应用聚合酶链式反应 (PCR)检测ACE基因第 16内含子I/D多态性 ,并计算基因型和等位基因频率。应用酶偶联速率法检测血清血管紧张素转换酶活性。结果 在 5 1例冠心组中ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 35 %和 6 1% ,ACE平均活性为 35 0 3± 91 1,在 83例正常对照组中的ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 16 %和 4 5 % ,ACE平均活性为 2 86 7± 79 6 ,两者相比具有显著性差异。结论 ACED等位基因可能是冠心病潜在的危险因素之一 。
- 刘华欣曹丽春廖淑梅王吉伟傅桂莲
- 关键词：血管紧张素转换酶基因多态性冠心病酶活性聚合酶链式反应
- 抗多巴胺抗体的制备
- 1995年
- 多巴胺是人体内重要神经递质,由于其分子量小,结构主体儿茶部分在碱性溶液中和有氧存在时极不稳定,所以制备多巴胺—蛋白质结合物非常困难,而且抗多巴胺抗体特异性不高。本文以Mannich反应并加以改良将多巴胺与载体牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)相连成多巴胺结合物,以此结合物免疫家兔制备抗多巴胺抗体,现报告如下。
- 尹学念曾常茜杨蜜傅桂莲王琰李旭
- 关键词：多巴胺MANNICH反应独特型抗体马来酐抗体特异性福氏完全佐剂
- 癫痫发病的免疫炎症机制研究被引量：5
- 2001年
- 目的 :建立大鼠的实验性癫痫模型 ,探讨癫痫发病的免疫炎症机制。方法 :用皮下注射海仁酸方法建立实验性癫痫大鼠模型 ;采用结晶紫染色方法观察实验性癫痫大鼠海马神经元的变性 ;采用免疫组织化学染色方法观察实验性癫痫大鼠MHC分子和补体C3b受体的表达。结果 :给大鼠皮下注射海仁酸可成功地建立实验性癫痫大鼠模型 ,其大脑海马锥状细胞层可见到神经元的变性 ,并可见MHC -Ⅰ、MHC -Ⅱ类分子和补体C3b受体的明显表达。结论 :实验性癫痫大鼠大脑海马硬化过程中 ,存在着补体系统参与的免疫反应发生 ,并引起炎症反应。
- 曾常茜王金岩傅桂莲
- 关键词：癫痫发病机制免疫炎症免疫组织学
- Ca^(2+)依赖性磷脂酶A_2有效表达系统的构建
- 2000年
- 为了构建Ca2 +依赖性磷脂酶A2 (CalciumdependentphospholipaseA2 ,cPLA2 )的有效表达系统 ,本实验应用SalⅠ消化cPLA2 -PMT2 重组体 ,电洗脱法回收cPLA2 片段并使其平末端化。应用NotⅠ消化PRC/CMV载体使其线性化 ,之后脱磷酸以防止自身环化。cPLA2 与线性化且脱磷酸载体PRC/CMV进行平末端连接 ,转染鼠巨噬细胞 ,扩增培养 ,收集细胞 ,提取RNA ,Northernblot检测cPLAmRNA。结果表明 :PRC/CMV可以做为cPLA2 cDNA的有效表达载体 ,cPLA2 -PRC/CMV表达系统的成功构建为研究各种因素对cPLA2
- 曾常茜傅桂莲王琰
- 关键词：CPLA2
- 鹿茸DNA鉴定试剂盒及鉴定方法
- 本发明涉及中药鉴定技术领域，具体为一种鹿茸DNA检测试剂盒及鉴定方法。它包括：鹿茸线粒体DNA提取体系、PCR反应体系和结果观察体系三部分。鹿茸DNA鉴定方法包括线粒体DNA提取、PCR引物设计与合成、建立PCR反应程序...
- 高丽君夏薇李明成傅桂莲张丽华王冰梅李梓僮
- 文献传递
- α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶基因启动子的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨α-突触核蛋白对多巴胺代谢的调节机制。方法以人基因组DNA为模板,PCR法扩增酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase, TH)基因区的部分DNA片段(-495^+25),将其插入质粒pGL3-Basic,构建荧光素酶报告基因重组质粒pGL3-THprom,转染多巴胺能神经元细胞系MES23.5和MES23.5/hα-Syn+。结果双荧光素酶活性分析表明,pGL3-Basic、pGL3-THprom和pGL3-Control在MES23.5细胞中表达的荧光素酶活性分别为5.60±0.67, 26.80±4.11和32.90±4.75,而pGL3-THprom在MES23.5和MES23.5/hα-Syn+中表达的荧光素酶活性分别为26.80±4.11和14.40±0.61,差异极显著(P<0.01)。结论这些结果提示扩增的DNA片段具有启动子活性,而α-Syn作为反式作用因子通过影响TH基因启动子的功能发挥对多巴胺代谢的负性调控作用。
- 高楠李尧华李昕于顺傅桂莲陈彪
- 关键词：酪氨酸羟化酶基因表达多巴胺
