侯建华
- 作品数：14 被引量：28H指数：3
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一个新的葡萄糖淀粉酶基因在大肠杆菌中的分泌表达被引量：2
- 2007年
- 从天然的少根根霉的基因组中,克隆出一个新的葡萄糖淀粉酶基因。对其进行分子进化的研究,在大肠杆菌中表达,从而给实验带来很大方便。设计引物将其(Gene Bank登录号:DQ903853)克隆到pET-22b(+)载体上,转化大肠杆菌BL-21(DE3)表达。检测培养液的上清有较高的葡萄糖淀粉酶活性,在淀粉板上有明显的晕圈显现。
- 杨立泉马春晓戴晓军侯建华孙官日于晓菊丁东风李明刚
- 关键词：大肠杆菌分泌表达葡萄糖淀粉酶少根根霉
- 一种高产促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高产促胰岛素激素毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌及其构建方法。本发明运用分子生物学技术先构建毕赤酵母(P.pastoris)表达载体pPIC9GLP－1，然后将其线性化后转化进入毕赤酵母G...
- 李明刚侯建华方园园薄涛王翠艳杨少辉武志强闫瑞香
- 文献传递
- 一种高产促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高产促胰岛素激素毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌及其构建方法。本发明运用分子生物学技术先构建毕赤酵母(P.pastoris)表达载体pPIC9GLP-1，然后将其线性化后转化进入毕赤酵母G...
- 李明刚侯建华方园园薄涛王翠艳杨少辉武志强闫瑞香
- 文献传递
- 治疗糖尿病的短肽药物GLP-1在毕赤酵母中的分泌表达被引量：1
- 2006年
- 利用毕赤酵母表达治疗糖尿病的短肽药物GLP-1(胰高血糖素样肽-1)。以pUC18GLP-1 为模板进行PCR,将获得的GLP-1基因片段克隆到pMD18T-vector上,然后将SmaI和NotI双酶切获得的基因小片段插入到表达载体pPIC9上,完成表达载体pPIC9GLP-1的构建,SacI线性化重组质粒,通过醋酸锂转化法转化毕赤酵母GS115感受态细胞,成功构建了能够分泌抗二肽酶Ⅳ降解的长效促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌株。结果表明毕赤酵母6号菌株的GLP-1分泌表达产量最高可达 100．00 mg／L．实现了GLP-1在毕赤酵母中的表达,为进一步开发治疗糖尿病新型短肽药物的研究奠定了基础。
- 侯建华王翠艳方园园杨少辉薄涛杨立泉于雷李明刚
- 关键词：糖尿病胰高血糖素样肽-1毕赤酵母短肽分泌表达
- 糖尿病食疗型转基因黄瓜研究
- 李明刚杜胜利王翠艳赵磊魏爱民廖芳侯建华王瑞菊韩毅科张桂华
- 近年来，糖尿病本身及其并发症对人们的身心健康危害重大，已经成为现代流行疾病的第二杀手，仅次于癌症对人类的危害。因此，寻找更好的药物和治疗方法是人们致力攻克的一大难题。胰高血糖素样肽-1(glucagon-likepept...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病治疗
- 一个新葡萄糖淀粉酶基因的克隆与表达
- 2007年
- 根据已报道的米根霉葡萄糖淀粉酶基因序列,通过PCR方法,从天然少根根霉的总DNA中克隆到含有四个内含子的葡萄糖淀粉酶基因。通过设计引物并采取重叠PCR方法删除内含子,获得了新的少根根霉葡萄糖淀粉酶(Rhizopus arrhizu glucoamylase,RaGA)cDNA序列(Accession number:DQ903853)。该基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物具有较高的葡萄糖淀粉酶活性。
- 杨立泉戴小军罗元明马春晓侯建华武志强王翠艳李明刚
- 关键词：少根根霉葡萄糖淀粉酶克隆毕赤酵母
- 口服长效促胰岛素激素在毕赤酵母和大肠杆菌中的表达、检测及其药理学活性分析
- 本文对口服长效促胰岛素激素在毕赤酵母和大肠杆菌中的表达、检测及其药理学活性进行了分析。本研究通过点突变技术消除了天然GLP-1基因内的DPP-Ⅳ和胰蛋白酶识别位点，rolGLP-1在血液中能够免受DPP-Ⅳ的降解，而且在...
- 侯建华
- 关键词：糖尿病治疗
- 文献传递
- 利用pfu聚合酶进行高效率DNA末端补平研究
- 2005年
- 李伟东杨少辉李欣薄涛侯建华于新春李明刚
- 关键词：DNA基因工程内切酶分子克隆
- 重组巴斯德毕赤酵母发酵生产几丁质酶的条件优化研究被引量：14
- 2007年
- 研究了利用重组巴斯德毕赤酵母诱导表达重组几丁质酶的条件。在摇瓶水平上研究了诱导时间、pH、甲醇流加量、油酸等因素对重组几丁质酶表达的影响。结果发现诱导108h蛋白表达量最高;偏酸性环境不利于蛋白表达,维持在pH5.5～6.0最佳;甲醇最佳诱导浓度为1%;添加0.05%的油酸有助于提高蛋白表达量。在此基础上通过正交试验设计优化了培养基配方,在优化条件下,蛋白表达量达171.99mg/L,酶活达49.58U/mL。
- 阎瑞香吴仲侯建华李明刚
- 关键词：毕赤酵母发酵
- 重组类胰岛素研究进展被引量：6
- 2005年
- 薄涛侯建华王翠艳李明刚
- 关键词：基因工程蛋白质工程
