付员根
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金军队“十五”医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- BRCA1基因相关乳腺癌及其临床病理特征被引量：1
- 2001年
- BRCA1为近期发现的乳腺癌 卵巢癌易感基因 ,与遗传性乳腺癌 /卵巢癌的发生密切相关。BRCA1相关乳腺癌发病早、双侧比例高、复发率高、可伴有其它肿瘤 ,表现为乳腺癌综合征。预后存在争议。其组织学分级较高、细胞分裂增殖活跃 ,侵袭性较强 ,组织学类型以髓样癌和 /或非典型髓样癌多见 ,P5 3突变较常见。BRCA1突变筛查已经开始应用于临床 ,但其大规模应用尚存在一定的局限性。
- 付员根梁英锐
- 关键词：BRCA1基因乳腺癌基因表达病理基因突变
- 腺病毒携带GFP在豚鼠耳蜗基因转导的形态结构与功能改变被引量：3
- 2002年
- 目的 带有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的腺病毒注入豚鼠耳蜗后 ,观察不同时间段GFP基因的表达和分布情况及手术操作对听力的影响 ,为内耳基因治疗提供理论依据。方法 1 5只杂色豚鼠术前及术后行听性脑干反应 (ABR)和畸变耳声发射 (DPOAE)检查 ,空白对照组经圆窗或底回钻孔注入人工外淋巴液。实验组注入带有GFP基因的腺病毒。分别于 3、5、7和 1 0d后取材 ,耳蜗标本经硝酸银染色后铺片。结果 腺病毒注入耳蜗后对听阈影响不大。术前术后的DP值有差异。荧光显微镜下可见 3d组表达产物最高。 7d后逐渐减弱 ,1 0d后更弱 ,表达产物主要分布于支持细胞、螺旋神经节细胞和基底膜下的间皮细胞。对照组均无绿色荧光。结论 通过圆窗或底回注入腺病毒对听阈没有影响。单一位点的接种就能使神经营养因子通过耳蜗液扩散到整个耳蜗。有效的基因转移在耳蜗是可行的 ,但表达相对短暂。
- 王晓侠李胜利刘晖黄沂传姚小宝刘志国付员根朱宏亮
- 关键词：GFP耳蜗基因转导腺病毒
- Ⅴ型腺病毒纤维蛋白基因真核表达质粒的构建及表达
- 2002年
- 目的 :构建腺病毒纤维蛋白基因的真核表达质粒 ,并检测其在真核细胞中的表达 ,为腺病毒靶向性载体构建创造条件。方法 :采用限制性内切酶技术 ,酶切腺病毒骨架质粒pAdEasy 1,经多次亚克隆 ,最后完成克隆纤维蛋白基因并构建其真核表达质粒。用脂质体法将构建好的真核表达质粒瞬时转染COS 7细胞 ,于转染后 72h ,用Westernblot法检测所表达的蛋白。结果 :克隆成功纤维蛋白基因 ,并构建纤维蛋白基因真核表达质粒pcDNA/Fiber,经限制性内切酶酶切鉴定及测序证实了其正确性。Westernblot结果显示 ,新表达蛋白在变性条件下大小为 6 2kD ,而在非变性条件下为 186kD。结论 :纤维蛋白基因真核表达质粒能在真核细胞中表达 ,产物具有三聚体结构 ,可用于腺病毒靶向性载体的构建。
- 付员根刘志国温博贵王晓侠吴开春樊代明
- 关键词：基因转染纤维蛋白真核表达质粒
- 肝细胞癌细胞外基质的分布形式及其临床意义被引量：5
- 1997年
- 目的：了解细胞外基质在肝细胞癌的分布形式，探讨其与肝细胞癌恶性程度的关系。方法：用５种细胞外基质抗体对４０例肝细胞癌作免疫组化染色。结果：显示４种分布形式：连续梁周腺泡周型、断续梁周腺泡周型、血管间质型、胞膜胞浆型。前３型与肿瘤生长方式、细胞分化和增殖程度密切相关。结论：提示细胞外基质在评价肝细胞癌的恶性程度是有用的标志物。
- 付员根黄致治梁英锐郑少燕申延琴
- 关键词：细胞外基质肝肿瘤细胞癌免疫组织化学
- BRCA1在散发性乳腺癌中的表达及意义被引量：3
- 2001年
- 目的 探讨BRCA1在散发性乳腺癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术对5例正常乳腺组织、10例良性病变乳腺组织及55例乳腺癌组织进行BRCA1免疫染色,比较BRCA1在良恶性乳腺组织中表达差异以及与乳腺癌临床病理特征之间的关系。结果 BRCA1在全部良性乳腺组织中均呈阳性显色,BRCA1染色深度分级中3+细胞占100％,阳性细胞数分级中4+细胞占100％,其全部定位于细胞核。然而只有80％(44/45)的乳腺癌组织BRCA1呈阳性反应,BRCA1染色深度分级中3+细胞只占22％,阳性细胞数分级中4+细胞只占22％,其亚细胞定位除细胞核外,也见于胞浆甚至胞核和胞浆同时存在。Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌其阳性细胞数分级中3+～4+细胞分别占70％、50％、10％;染色深度分组中2+～3+细胞分别占77％、66％、20％;细胞核定位率分别为77％、75％及40％。上述差异均有统计学意义(P<0.05)。BRCA1与乳腺癌组织学分型、肿块大小及发病年龄无相关关系。结论 BRCA1在乳腺癌组织中表达下降,亚细胞定位异常,可能参与散发性乳腺癌的发生发展。
- 曲耀君付员根张洪德黄兴国
- 关键词：BRCA1基因散发性乳腺癌免疫组织化学
- 肿瘤血管靶向性腺病毒载体的构建及功能检测
- 背景：虽然目前疾病治疗仍然以手术，化疗及放疗为主，但基因治疗作为一种治疗疾病的新手段愈来愈受到人们的重视，随着基因治疗相关技术的成熟，该技术必将成为继手术、化疗及放疗之后另一种重要的疾病治疗手段。现阶段制约基因治疗应用的...
- 付员根
- 关键词：肿瘤血管腺病毒载体CD13
- 文献传递
- BRCA1基因的功能及其上游调控序列结构功能特征被引量：8
- 2002年
- 乳腺癌易感基因 1(BRCA1)是一种与家族性乳腺癌、家族性卵巢癌密切相关的抑癌基因。但其在散发性乳腺癌中尚未见突变的报道 ,而在散发性乳腺癌中其表达下降 ,说明其转录调控异常可能参与散发性乳腺癌的发生。本文拟对BRCA1功能及上游调控区结构功能特征作一综述。
- 付员根
- 关键词：抑癌基因转录调控乳腺癌BRCA1基因
- 反义HSP70真核表达载体的构建和在人喉癌细胞的表达被引量：1
- 2002年
- 目的 进行促凋亡治疗喉癌实验 ,构建和鉴定携带反义HSP70 (heatshockprotein 70 )基因的真核表达载体。方法 将HSP70cDNA反向克隆入 pcDNA 3.1,构建CMV启动子控制的真核表达载体 pcDNA AHSP70 ,用酶切鉴定结果 ;应用该载体转染人喉表皮样癌细胞Hep 2 ,G4 18筛选阳性克隆 ;westernblot和免疫组化检测转染前后瘤细胞的HSP70的表达。检测转染前后瘤细胞的生物学性状。结果 获得 pcDNA AHSP70真核表达载体 ,HSP70反义RNA阻断了Hep 2细胞的HSP70的表达 ,经westernblotting和免疫组化证实 ,实验组瘤细胞不能表达或低表达HSP70 ,而对照和空载体组高表达HSP70。转染反义HSP70的真核表达载体的Hep 2细胞比空载体组和对照组的细胞生长缓慢 ,细胞周期可见实验组出现亚二倍凋亡峰 ,而空载体组没有。结论 本研究成功构建了反义HSP70真核表达载体并在人喉癌细胞得以表达。
- 王晓侠李胜利付员根姚小宝刘晖宁小萱刘志国朱宏亮樊代明
- 关键词：热休克蛋白70真核表达载体喉癌
- Ⅴ型腺病毒纤毛基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2001年
- 目的克隆腺病毒纤毛基因,为构建腺病毒靶向性载体创造条件。方法应用限制性内切酶酶切技术酶切腺病毒骨架质粒pAdEasy1,经多次亚克隆最后完成克隆纤毛基因并构建纤毛基因原核表达载体。用IPTG诱导纤毛蛋白的表达,再用SDS-PAGE和Westernblot对其进行分析。结果成功地克隆纤毛基因。质粒pBS/Fiber经限制性内切酶酶切鉴定及测序证实了其正确性。经质粒pQE/Fiber转化的细菌,在IPTG诱导下可表达一种新的蛋白,并于5h表达量最高。经Westernblot证实,在变性条件下表达蛋白的Mr为62000,在非变性条件下为186000。结论已克隆的纤毛基因能在大肠杆菌中表达,并具有三聚体结构,可用于腺病毒载体靶向性构建。
- 付员根刘志国温博贵王晓侠吴开春樊代明
- 关键词：腺病毒克隆大肠杆菌
- 膨胀型肝癌病理组织学和PCNA的免疫组化研究
- 1995年
- 对３０例膨胀型肝癌（ＥＨＣＣ）进行病理组织学和ＰＣＮＡ免疫组化研究。证实ＥＨＣＣ具有独特的生物学特性，它呈膨胀性生长，往往有包膜形成，分化较好，侵袭性较小，增殖速度较低。但它只是一定时期呈膨胀性生长，具有向浸润性肝癌转化的趋势。
- 付员根黄致治郑少燕沈健
- 关键词：PCNA免疫组化病理组织学生物学特性
