黄益洲
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胎盘蜕膜基层来源MSCs参与裸鼠皮肤创面修复的研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨人胎盘蜕膜基层来源MSCs（placental decidua basalis derived MSCs, PDB-MSCs）参与裸鼠全层皮肤缺损修复的效果。方法取自愿捐赠人胎盘组织，采用酶消化法结合密度梯度离心法分离培养PDB—MSCs并传代，取第4代细胞进行实验。倒置相差显微镜观察细胞形态，行成骨与成脂诱导鉴定，检测细胞表面特异性抗原表达以鉴定细胞。取42只4—5周龄雌性BALB／c裸鼠，随机分为两组（n=21）；分别将200gL浓度为5〉（106个／mL的第4代PDB—MSCs及等体积PBS经尾静脉注射入实验组及对照组裸鼠体内；注射后3d实验动物于背部制备大小为1．5cmxl．5cm全层皮肤缺损模型。术后1、2、4、7、14、18、21、25、30d大体观察创面愈合情况，待创面开始脱痂后测量创面愈合率。术后1、7、14、21、30d取材行HE染色，观察创面修复情况；7、14、30d实验组采用免疫荧光染色法行细胞定位分析。结果经鉴定胎盘蜕膜组织所分离的细胞为MSCs，具有多向分化能力和MSCs免疫组织表型。术后两组裸鼠存活至实验完成。大体观察示，实验组创面愈合较对照组快，其中实验组于术后12—14d、对照组于14—17d开始脱痂。实验组术后14、18、21d创面愈合率均显著高于对照组（t=4．001，P=0．016；t=3．380，P=0．028；t=3．888，P=0．018）；25、30d两组比较差异无统计学意义（t=1．565，P=0．193；t=1．000，P=0．423）。组织学观察示，与对照组比较，实验组皮肤创面组织炎性反应低，并且随时间延长皮肤各层组织及腺体等再生良好。免疫荧光染色示，术后各时间点实验组皮肤创面区域均可见人线粒体抗原染色阳性，提示存在人源细胞。结论通过酶消化法结合密度梯度离心法可稳定获得PDB．MSCs，预先注射人裸鼠体内后，在皮肤损伤条件下细胞可向皮肤损伤部位迁移，并促进创面修复。
- 孙宁黄益洲张忆皮晋魁Jaznie Law邓力吴诚光
- 关键词：MSCS胎盘皮肤缺损裸鼠
- 音猬因子调控BMSCs表达和分泌VEGF及bFGF的实验研究被引量：5
- 2012年
- 目的音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)介导的信号参与调控血管生成的重要环节。研究不同浓度的重组Shh-N(recombinant Shh N-termitant,rShh-N)对BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF的影响。方法取健康3日龄SD大鼠骨髓分离培养BMSCs,体外扩增至第3代,分别用含0、10、100、200 ng/mL rShh-N的L-DMEM培养BMSCs,作为A、B、C、D组。培养12、24、48、72 h后行ELISA法检测各组上清液中VEGF和bFGF的浓度,实时荧光定量PCR法检测各组VEGF和bFGF mRNA的表达水平。结果在基因表达水平上,D组各时间点的VEGF和bFGF mRNA表达量均明显高于A组(P<0.05),且在12、48 h表达量高于24、72 h(P<0.01);C组在各时间点均促进bFGF mRNA表达(P<0.05),在24～72 h促进VEGF mRNA表达(P<0.05),且在72 h时表达量均最高(P<0.01);B组在12 h抑制VEGF mRNA表达(P<0.05),48 h和72 h表现出促进作用(P<0.05),在12～48 h明显促进bFGF mRNA表达(P<0.05),且在48 h时的表达量最高(P<0.01)。在蛋白水平上,D组各时间点VEGF和bFGF分泌量均高于A组(P<0.01);C组在24～72 h VEGF和bFGF分泌量明显多于A组(P<0.05);B组在12 h和48 h抑制VEGF的分泌(P<0.05),24 h增加其分泌作用(P<0.05),而在24 h和48 h促进bFGF的分泌(P<0.05)。各组在48 h和72 h时的VEGF和bFGF分泌量明显多于12 h和24 h(P<0.05)。结论 rShh-N可促进BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF,为进一步探讨rShh-N和MSCs联合应用于治疗缺血性相关疾病以及促进骨修复重建的可行性提供了实验依据。
- 蔡加琴黄益洲陈晓禾谢红蕾黄永灿邓力
- 关键词：音猬因子BMSCS骨修复VEGFBFGF
