骆继怀
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
- 供职机构：甘肃政法学院甘肃省证据科学技术研究与应用重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学政治法律更多>>
- 细胞核内RNA干扰途径研究进展
- 2011年
- RNA干扰(RNAi)是双链RNA分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达的过程。RNAi的分子机制及功能仍然有待深入研究与阐明,但已经在基因组结构与功能研究中得到广泛运用。我们简要综述RNAi的作用机制,及已发现的细胞核内干扰途径——RNA指导的DNA甲基化、异染色质、DNA切除和减数分裂性沉默等相关研究进展。
- 骆继怀独军政常惠芸
- 关键词：RNA干扰异染色质
- 甘肃裕固族人群21个非CODIS STR基因座遗传多态性
- 2015年
- 采用AGCU 21＋1 PCR扩增试剂盒,对180例甘肃省裕固族无关个体进行21个常染色STR基因座的遗传多态性调查,获取该人群在21个STR基因座的等位基因相关数据,为该地区的法医学应用提供基础数据。1材料与方法180例甘肃省肃南裕固族自治县境内裕固族健康无关个体抗凝血样,其中男性134例,女性46例。
- 张子龙马丽英孙红兵杨鑫骆继怀
- 关键词：法医遗传学短串联重复序列裕固族
- siRNA靶向猪源FMDV受体αv亚基慢病毒载体的构建及抗FMDVPK-15细胞模型的建立
- 口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。FMDV感染宿主细胞的...
- 骆继怀
- 关键词：FMDV慢病毒PK-15细胞
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR筛选牛源整联蛋白αv基因的siRNA片段被引量：1
- 2011年
- 设计并合成三条针对牛口蹄疫病毒(FMDV)整联蛋白受体αv亚基基因的特异性干扰小RNA(SiRNA)片段,将其转染至本身表达整联蛋白受体αv亚基基因的MDBK细胞。分别在转染后36 h和48 h收集细胞,提取细胞总RNA并反转录为cDNA。应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR的方法检测3个siRNA片段的干扰效果,筛选出对整联蛋白αv基因具有高效干扰效果的小RNA片段。为建立抗口蹄疫病毒牛新品种培育的RNA干扰转基因技术平台奠定了基础。
- 张国峰独军政常惠芸薛霜骆继怀
- 关键词：实时荧光定量PCR整联蛋白RNA干扰SYBR
- 靶向FMDV受体猪源整联蛋白α_V亚基基因抑制FMDV复制的最佳siRNA筛选
- 2011年
- 筛选靶向FMDV受体猪源整联蛋白αV亚基基因抑制FMDV复制的最佳siRNA。根据猪源αV mRNA序列,设计并合成siRNA,Lipofectamine 2000转染siRNA于PK-15细胞,利用qRT-PCR检测RNAi组(iαV-480、iαV-1719和iαV-2077)、空白组(Mock)和阴性对照组(Control)中αVmRNA表达情况;在转染siRNA12h后通过接种100TCID50,收集病毒液,测定TCID50,确定其抗病性变化。结果显示,瞬间转染PK-15后,与阴性对照组和空白组相比,3个RNAi组均不同程度抑制αV亚基基因表达,在24hiαV-480组在mRNA水平抑制90.1%,作用最明显。TCID50测定表明iαV-480组有较低的病毒滴度,说明其抗病性增加。针对猪源整联蛋白αV亚基基因的最佳siRNA的筛选成功,为深入研究干扰FMDV受体抗FMDV转基因路线奠定了基础。
- 骆继怀独军政高闪电张国锋常惠芸
- 关键词：FMDVPK-15细胞病毒滴度
- 甘肃省法庭科学实践中基于分子遗传学的集成创新研究
- 谢小冬孙红兵陶晓岚胡卫星王国建张子龙吴骅杨鑫李晓林刘贤海王涛哈飞苏刚骆继怀李炯李培强姚宏兵
- 本项目建立了甘肃省基于群体遗传学调查、法医学应用评估之上的DNA基础数据库，为DNA分析技术在法庭科学实践的应用提供了可靠的基础资料；由此建立的甘肃省DNA信息查询比对平台覆盖了全省14个地州市，86个县区的重点人群，可...
- 关键词：
- 关键词：法医学分子遗传学DNA分析
- 口蹄疫病毒非结构蛋白3D原核表达、纯化和反应原性分析被引量：3
- 2012年
- 采用RT-PCR技术扩增获得口蹄疫病毒(FMDV)细胞毒O/Akesu/58的非结构蛋白3D(NSP 3D)基因编码区,并定向克隆到pProexHTb原核表达载体上,再将重组pProex-3D转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达产物用亲和层析法纯化,经SDS-PAGE鉴定和Western-blot分析抗原性;以纯化的表达蛋白免疫豚鼠制备其多克隆抗体,ELISA测定抗体效价,间接免疫荧光法检测制备的豚鼠抗NSP 3D多克隆抗体与细胞毒天然抗原的反应原性.结果表明:表达的目的蛋白大小为53ku左右;ELISA结果表明,制备的多克隆抗体效价达1∶1 024以上;Western-blot分析表明,纯化后的蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应;间接免疫荧光检测发现,豚鼠抗3D蛋白多克隆抗体可与细胞毒天然抗原反应,与阴性对照未见反应.
- 骆继怀杨利恒高闪电独军政常惠芸薛慧文
- 关键词：口蹄疫病毒3D基因非结构蛋白
- 转基因克隆动物的发展及其应用被引量：4
- 2010年
- 转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应器方面的应用,存在的问题与安全性评价等方面做了较系统的阐述,并预测了转基因克隆动物应用的发展前景及其给社会带来的深远影响。
- 骆继怀独军政常惠芸
- 关键词：抗病育种乳腺生物反应器
- 甘肃裕固族人群21个STR基因座的遗传多态性被引量：1
- 2016年
- 短串联重复序列（STR）在人类基因组中分布广泛、多态性高、可复合扩增,已被广泛应用于亲权鉴定、个人识别以及种族识别。由于同一STR遗传标记在不同人群中的多态性分布存在差异,因此,应用于法医学鉴定前,必须通过群体调查获得该群体的基本遗传学参数[1]。本研究对甘肃省肃南裕固族自治县裕固族无关个体的血样进行21个STR基因座的复合扩增,获得该群体21个STR基因座的遗传多态信息,
- 马丽英张子龙魏铄蕴孙红兵杨鑫骆继怀
- 关键词：法医遗传学短串联重复序列裕固族
