韩济南
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 体外全骨髓法培养人骨髓间充质干细胞的生物学性状被引量：1
- 2008年
- 目的:现阶段多以动物为材料培养观察骨髓间充质干细胞的生长特性,对人骨髓间充质干细胞培养和生长特性的研究相对较少。为此实验培养人骨髓间充质干细胞,拟建立稳定的培养方法。方法:实验于2007-03/09在泸州医学院中心实验室省级重点实验室完成。①实验材料:6个月以上流产胎儿由泸州地区妇产医院提供,产妇及家属对实验知情同意,并经医院伦理委员会批准。②实验方法:应用全骨髓培养法培养人骨髓间充质干细胞,采用差速贴壁对细胞进行纯化。③实验评估:倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态及生物学特点,应用MTT法间接测定骨髓间充质干细胞活性。结果:①培养4h,见骨髓间充质干细胞已开始贴壁,胞体由圆形变为不规则形或三角型,培养第2～4天,见间充质干细胞胞体向两端伸出二三个粗短突起,此时细胞形态渐变为梭型,呈成纤维细胞样生长,并聚集成集落;随着细胞的生长,贴壁细胞逐渐表现为脊梁状、旋涡状生长,细胞突起增长、增粗,并可发出更细的分支,突起间可相互交织成网。培养7d时,见细胞铺满瓶壁面积的70%～80%,细胞排列紧密,此时骨髓间充质干细胞铺成单层。苏木精-伊红染色见细胞多为长梭型,有突起及分支,胞体较大,核一个,较大,呈椭圆,着色浅,可见多个的核仁,胞质浅红色。②骨髓间充质干细胞表面标志CD44免疫组织化学检测,可见胞膜出现棕黄色阳性反应。③MTT法分别检测结果显示,2～6代细胞于酶标仪490nm波长处吸光度值无明显差异,但均高于七八代细胞。结论:利用全骨髓培养法成功地培养出人胎儿骨髓间充质干干细胞,且第3～6代细胞纯度高、活性好。
- 韩济南徐富翠侯艳秋吴绍华
- 关键词：体外培养骨髓间充质干细胞纯度
- 精原干细胞分化及自我更新调控机制研究进展
- 2007年
- 韩济南候艳秋吴绍华
- 关键词：自我更新干细胞分化睾丸曲细精管精原干细胞定向分化精原细胞
