陈英姿 作品数:20 被引量:111 H指数:6 供职机构: 广州市第一人民医院 更多>> 发文基金: 广州市医药卫生科技项目 广东省医学科学技术研究基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
B族链球菌皮肤软组织及创伤感染分离株的耐药基因检测 被引量:6 2010年 目的了解皮肤软组织及创伤感染的B族链球菌(GBS)的耐药性及耐药基因存在的特点。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法对分离自皮肤软组织及创伤感染的132株GBS进行红霉素及四环素等11种耐药基因的检测;药物敏感试验及克林霉素诱导型(MLSB)耐药表型采用琼脂纸片扩散(K-B)法、D-试验法检测。结果皮肤软组织及创伤感染的GBS红霉素耐药基因以ermB为主,占25.0%,ermA、ermC、ermM、ermTR、mefA、mefE基因的阳性率分别为3.8%、8.3%、1.5%、9.0%、32.6%、38.6%;同时含2种或2种以上erm基因阳性的GBS占22.5%;耐药表型以结构型耐药(红霉素耐药、克林霉素耐药,cMLSB)为主(31株,占红霉素耐药GBS的50.0%);四环素耐药基因tetM、tetO、tetK、tetL阳性率分别为64.0%、47.2%、13.2%、40.0%;未发现对青霉素、氨苄青霉素、替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺、奎诺普汀/达福普汀耐药菌株,但青霉素、氨苄青霉素的中介率分别是11.2%、6.8%;红霉素、克林霉素、四环素耐药率分别为47.0%、46.2%、86.4%。结论 ermB基因是皮肤软组织及创伤感染的GBS对红霉素耐药的重要基因,检出国内少见报道的ermC、ermM、ermTR基因。青霉素、氨苄青霉素仍可作为治疗皮肤GBS感染的首选药物;对于过敏体质的患者,红霉素和克林霉素作为预防和治疗皮肤GBS感染的药物应用价值应给予重新评价。 陈惠玲 叶惠芬 邓家德 陈英姿 龙幼敏关键词:无乳 侵入性感染B族链球菌对红霉素及四环素的耐药基因检测 被引量:10 2010年 目的了解侵入性感染B族链球菌(GBS)的耐药性及耐药基因谱特点。方法分别采用K-B法、D试验法检测204株GBS对抗菌药物的耐药性和克林霉素诱导型(MLSB)耐药表型,并同时采用聚合酶链反应(PCR)方法检测红霉素及四环素耐药基因ermA、ermB、ermC、ermM、ermTR、mefA、mefE、tetM、tetO、tetK、tetL与红霉素及四环素耐药性的关系。结果红霉素、克林霉素、四环素、氯霉素耐药率分别为44.1%、42.7%、83.7%、18.1%;青霉素、万古霉素未发现耐药菌株;红霉素耐药基因以ermB为主,占71.1%,检出国内未见报道的ermC基因11株及少报道的ermTR基因阳性13株;含≥2种erm基因阳性的GBS占27.8%,有1株GBS不含上述红霉素耐药基因的任何一种基因,但仍对红霉素耐药;四环素耐药基因以tetM和tetO为主,分别为70.5%、56.8%,含≥2种tet基因占72.7%;GBS在围生期以外的感染率不断上升。结论 GBS对红霉素、四环素具有较高的耐药率;ermB是GBS对红霉素耐药的重要基因,在GBS中检出国内未见报道的ermC,GBS对红霉素耐药还存在其他的耐药机制。 陈惠玲 邓家德 叶惠芬 龙幼敏 陈英姿 周小棉关键词:B族链球菌 红霉素 四环素 耐药 基因 两种核酸提取法对不同程度溶血标本HBV-DNA检测结果的比较 被引量:2 2011年 目的探讨一步核酸提取法和两步核酸提取法对不同程度溶血标本乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测结果影响的差异。方法收集22例临床随机患者全血标本,离心并于当天用一步和二步核酸提取法试剂检测HBV-DNA含量后,将全血标本放4℃冰箱保存,每隔2~3 d取出分别用两种试剂检测HBV-DNA的含量。结果 22例标本随着存放时间和溶血程度的增加,其HBV-DNA含量有下降趋势;一步法在标本存放3 d后结果显著低于首次检测结果(t3d=3.981,P〈0.01);二步法在标本存放19 d后结果显著低于首次检测结果(t3d=3.642,P〈0.01);标本于4℃存放3天后一步法HBV-DNA的检测结果显著低于二步法(t3d=4.91,P〈0.001)。结论溶血标本对二步核酸提取法试剂检测HBV-DNA含量的影响作用远低于一步法,对于临床由于特殊原因无法及时获得合格血标本时,可考虑使用二步核酸提取法试剂检测HBV-DNA的含量。 龙幼敏 雷秀霞 明凯华 陈英姿关键词:乙型肝炎病毒 荧光定量PCR 溶血 标本 三种方法检测HBV-M结果分析 被引量:5 2004年 目的 比较MEIA、TRFIA、ELISA三种方法在测定HBV -M时结果的符合程度、灵敏度、特异性 ,了解TRFIA法测定HBV -M的准确性和可行性。方法 用三种不同方法对 5 6份临界值或强阳性血清作HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb四项指标测定 ;170份随机标本同时用TRFIA及ELISA法作乙肝两对半测定。结果 HBsAg、HBsAb、HBeAg阴阳结果经配对资料的 χ2 检验 ,无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;而HBeAb有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 TRFIA法测定HBV -M特异性、灵敏度及结果符合率较ELISA法高 ,TRFIA作为定量的方法 ,可为临床疗效的观察及乙肝疫苗的接种提供依据。 雷秀霞 陈小辉 徐邦牢 陈英姿关键词:HBV-M 时间分辨荧光免疫分析法 乙肝病毒标志物 微粒子酶免疫分析法 酶联免疫吸附试验 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药表型和碳青霉烯酶基因型分析 被引量:20 2011年 目的检测广州市第一人民医院20株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药性,研究并分型其碳青霉烯酶基因。方法用法国生物梅里埃公司VITEK2全自动细菌鉴定仪进行菌株鉴定和药敏试验,用6种碳青霉烯酶特异性基因引物进行PCR扩增和基因型的测序分析,并通过网上GenBank进行比对以确定编码酶基因的类型。结果 20株鲍曼不动杆菌对哌拉西林-他唑巴坦、左氧氟沙星和阿米卡星的耐药率分别为85%、50%和25%。对其他所测抗菌药的耐药率均在90%以上。扩增结果显示17株(85%)细菌携带碳青霉烯酶OXA-23基因,16株(80%)携带OXA-51基因,1株(5%)携带OXA 58基因。OXA-24、VIM、IMP基因引物PCR扩增均为阴性,随机抽取OXA-23基因阳性株进行双向测序后在网上GenBank比对与OXA-23标准株99%同源,OXA-51基因阳性株与OXA-66标准株99%同源,OXA-58基因阳性株与OXA-58标准株99%同源。结论我院耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌呈现出多重耐药现象,对阿米卡星的耐药率最低,OXA-23型碳青霉烯酶基因检出率最高,OXA-23/OXA-51类基因占60%,应引起临床高度重视,防止在医院内广泛传播。 张伟红 叶惠芬 杨银梅 陈惠玲 陈英姿 李焕庭关键词:鲍曼不动杆菌 多重耐药 碳青霉烯酶 基因 耐药率 围产期生殖道感染B族溶血性链球菌的耐药性及耐药基因检测 被引量:27 2010年 B族溶血性链球菌(group B streptococci,GBS)是围产期严重感染性疾病的主要致病菌之一,可引发胎膜早破、晚期流产、早产、胎儿生长受限等一系列母婴不良结局,因而被欧美国家列为围产期感染的首要病原菌之一。为探讨围产期感染的GBS菌株的耐药性及耐药基因携带情况,本研究对围产期感染GBS菌株进行耐药性分析并检测多种耐药基因,现将结果报道如下。 陈惠玲 邓家德 叶惠芬 康佳丽 陈英姿 张伟红 李焕庭 杨银梅关键词:B族溶血性链球菌 围产期感染 生殖道感染 严重感染性疾病 胎儿生长受限 耐药基因 SYSMEX XE-5000血液分析仪血小板准确计数的相关分析 被引量:11 2014年 目的探讨红细胞碎片(FRC)、红细胞体积(MCV)、血小板参数[血小板分布宽度(PDW)、大血小板比率(P-LCR)、血小板压积(PCT)]、幼稚血小板(IPF)对SYSMEX XE-5000血液分析仪(简称XE-5000)计数血小板(PLT)准确性的影响。方法选取采用XE-5000电阻抗法检测无FRC的标本200例,按MCV(〈60、60~〈70、70~〈80、≥80 fL)分为4组(A1组、B1组、C1组、D1组,每组各50例);选取MCV≥70 fL且FRC分别为0.1%~0.99%(A2组)、≥1.0%(B2组)的标本各40例;选取MCV≥70 fL且无FRC、PLT参数(PDW、PCT、PLCR)显示"—"(表示检测不出结果)的标本50例(C2组),分别采用电阻抗法、光学法和手工法计数以上330例标本的PLT并推片镜检;分别采用电阻抗法、光学法和手工法连续5 d测定1例幼稚PLT增高患者的PLT并进行镜检。结果 A1组、A2组、B1组、B2组、C2组电阻抗法和手工法计数PLT差异有统计学意义(P〈0.05),C1组和D1组两种方法之间差异无统计学意义(P〉0.05)。A1组、B1组、C1组、D1组、A2组、B2组、C2组光学法与手工法计数PLT差异均无统计学意义(P均〉0.05)。电阻抗法测定幼稚PLT增高患者的PLT连续5 d均低于手工法和光学法;手工法计数PLT结果相对稳定,而电阻抗法、光学法结果随着幼稚PLT的不断成熟而增高,镜检有大量巨大PLT。结论采用XE-5000测定MCV〈70 fL、含有FRC或PLT参数结果显示"—"的标本时应选择光学法通道进行PLT复查,并进行涂片镜检。IPF增高且镜检有较多巨大PLT的标本应进行手工计数。 张伟红 陈斌 蔡梦珊 李结秋 陈英姿 黄乐升关键词:红细胞体积 血小板参数 血小板计数 B族链球菌的耐药性及红霉素与四环素耐药基因检测 被引量:7 2010年 目的:了解多种红霉素、四环素耐药基因在B族链球菌(GBS)中出现规律及其与耐药的关系。方法:药物敏感试验用VITEK2全自动分析仪检测203株GBS的最低抑菌浓度,用D试验法方法检测克林霉素诱导型(MLSB)耐药表型,红霉素及四环素耐药基因用聚合酶链反应方法检测。结果:未发现对青霉素、氨苄青霉素、万古霉素、利奈唑胺、奎诺普汀/达福普汀耐药菌株,但青霉素、氨苄青霉素的中介率分别是9.3%、4.9%;红霉素、克林霉素、四环素耐药率分别为45.3%、45.0%、87.1%、红霉素耐药基因以ermB为主,两种或两种以上erm基因阳性的GBS占12.3%,四环素耐药基因以tetM和tetO为主。结论:青霉素、氨苄青霉素仍可作为治疗GBS感染的首选药物;GBS菌株对红霉素和克林霉素的耐药性具有较高的一致性,红霉素和克林霉素作为预防和治疗GBS感染的药物应用应给予重新评价。ermB是GBS对红霉素耐药的重要基因,在GBS中检出国内少报道的ermC及ermTR基因;应关注非孕妇女,老年人及糖尿病患者感染的监测和防治。 陈惠玲 邓家德 叶惠芬 陈英姿 张伟红 李焕庭 杨银梅关键词:红霉素 四环素 耐药 基因 临床实验室HBV DNA检测室内质量控制的评价 被引量:5 2010年 HBV DNA定量测定主要是用于乙型肝炎患者治疗的动态观察及疗效判断.目前,临床实验室多采用荧光定量PCR方法检测,该法敏感度高,特异性强,但影响因素也较多,其结果易受模板浓度及扩增反应体系批间差异和标本处理过程等多方面因素的影响[1-2],为了解PCR实验室本年度HBV DNA结果的精密度和准确度及试剂批间差异对结果的影响情况,现对五个批号试剂的相关实验数据进行分析,结果报道如下. 雷秀霞 陈斌 龙幼敏 陈英姿 明凯华关键词:DNA 病毒 芯片电泳在免核酸提取PCR产物分析中的应用 被引量:1 2014年 目的探讨两种免核酸提取试剂联合应用DNA芯片电泳是否能快速、准确地用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的鉴定,了解该联合检测方法在流行病病原体快速鉴定中的应用价值,为流行性病原体的快速鉴定提供便捷手段。方法取1个(或0.1个)麦氏单位NDM-1(+)菌液加入免核酸提取试剂后直接进行PCR扩增,扩增产物用自制的芯片电泳进行产物分析,通过样品迁移时间与标准品比较精确计算出目的基因片段长度并大致推算产物的含量。结果两种免核酸提取试剂联合芯片电泳分析技术能快速、准确、高效地扩增出新德里金属酰胺酶NDM-1(+)细菌的目的基因片段,尤其湖南某厂家的试剂灵敏度更高。结论该联合检测方法在流行病尤其是突发性病原体的快速鉴定、监测中具有潜在的临床应用价值。 雷秀霞 李卓然 梁广铁 龙幼敏 陈英姿 张小精 王秋平