陈红雷
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
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- PCR-SSCP法检测非小细胞肺癌中FADD基因突变的研究被引量：2
- 2006年
- 目的检测Fas相关死亡结构域蛋白(Fasassociateddeathdomainprotein,FADD)基因在人非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)中的突变情况,以探讨该基因在肺癌发生发展中的作用及机制。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerasechainreactionandsinglestrandconformationpolymorphism,PCRSSCP)检测74例NSCLC原发灶癌组织及13例癌旁正常肺组织中FADD基因突变情况。结果74例NSCLC组织中检出5例发生FADD基因突变,FADD基因突变与癌的淋巴结转移呈显著正相关(rs=0.378,P=0.001),与其他临床病理特征无关。结论NSCLC中存在着FADD基因突变。FADD基因突变在NSCLC的发生发展中可能起着重要作用。
- 杨琴陈红雷刘铭球方忠
- 关键词：肺肿瘤突变PCR-SSCP
- PCR—SSCP法检测非小细胞肺癌中FADD基因突变的研究
- 2006年
- 目的：检测Fas相关死亡结构域蛋白（Fas—associated death domain protein，FADD）基因在人非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）中的突变情况，以探讨该基因在肺癌发生发展中的作用及机制。方法：采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（polymerase chain reaction and single—strand conformation polymorphism，PCR—SSCP）检测74例NSCLC原发灶癌组织及13例癌旁正常肺组织中FADD基因突变情况。结果：74例NSCLC组织中检出5例发生FADD基因突变，FADD基因突变与癌的淋巴结转移呈显著正相关（ri=0．378，P=0．001），与其它临床病理特征无关。结论：NSCLC中存在着FADD基因突变。FADD基因突变在NSCLC的发生发展中可能起着重要作用。
- 杨琴陈红雷刘铭球方忠
- 关键词：肺肿瘤突变
- 从外周血及癌组织中寻找肺癌早期诊断指标的研究
- 杨飞江曼刘绚叶波余峰刘晓翌夏东张玉霞刘铭球唐志佼胡雪峰李晓华胡淳玲李红刚陈红雷
- 该研究对肺癌外周血淋巴细胞染色体异倍体数量及非随机性染色体/染色单体的裂隙与断裂及端粒联合率的检测、血清SCC Ag的测定，方法简单实用，对临床上肺癌的筛查与早期诊断有重要的实际意义，可以在国内推广应用。该研究成果具有一...
- 关键词：
- 关键词：肺癌血清诊断细胞诊断淋巴细胞染色体检测
- 腺病毒介导人骨形态发生蛋白2基因在兔脂肪干细胞的表达与成骨分化效应被引量：1
- 2007年
- 目的:采用腺病毒介导人骨形态发生蛋白2基因转染兔脂肪干细胞,观察目的基因在脂肪干细胞中的表达效率及向成骨细胞定向分化的能力。方法:实验于2005-12/2006-09在武汉大学医学院中心实验室和三峡大学医学院病理实验室进行。①实验材料:4月龄健康新西兰大耳白兔2只。质粒pAd-BMP-2由美国哈佛医学院分子骨科中心Oliver博士惠赠;携带β-半乳糖酐酶基因的腺病毒对照载体由李康博士惠赠;大肠杆菌DH5a以及293细胞由本实验室保存。②实验方法:新西兰兔肌注麻醉后,完整取出双侧腹股沟脂肪垫,清除外包膜、明显的结缔组织和小血管,剪碎,离心,体外分离培养脂肪干细胞。表达载体pAd-hBMP-2经293细胞包装重组腺病毒后,取第3代生长良好的脂肪干细胞,按5×105接种于60mm培养皿,将Ad-hBMP-2病毒以感染复数10～20感染细胞。将成功转染骨形态发生蛋白2的脂肪干细胞作为转染组,以转染携带β-半乳糖酐酶基因腺病毒载体的脂肪干细胞作为对照组。两组均置入不含骨形态发生蛋白2的无血清成骨诱导培养基中进行诱导分化。③实验评估:定期观察细胞的形态学变化,MTT法绘制生长曲线,计算增殖时间;成骨诱导培养后测定碱性磷酸酶活性,光倒置显微镜下观察钙化结节形成情况;RT-PCR、免疫组织化学法、Westernblot法检测目的基因人骨形态发生蛋白2和成骨细胞标志性蛋白Ⅰ型胶原、骨钙素的表达。结果:①脂肪干细胞转染前后形态学变化、生长曲线及倍增时间:Ad-hBMP-2基因修饰的脂肪干细胞经诱导培养后形态规则,多角型细胞增多,转染组的细胞生长曲线倍增时间明显短于对照组。②碱性磷酸酶活性及矿化结节形成:转染组脂肪干细胞碱性磷酸酶活性呈增加趋势,成骨诱导培养7,10,14d均显著高于未转染组(P<0.01)。转染组成骨细胞四环素标记显示圆形矿化结节呈金黄色,数量多,结节
- 杨琴陈红雷陈德基张兆祥石新兰
- 关键词：基因转染脂肪干细胞骨细胞
- 降钙素基因相关肽诱导脂肪干细胞向成骨细胞的分化被引量：1
- 2008年
- 背景:已证实降钙素基因相关肽可促进成骨细胞的增殖与分化,并加速骨折的愈合、促进异位骨化的形成,但其是否具有促使脂肪干细胞向成骨细胞定向分化的作用作者未查到相关报道。目的:探讨降钙素基因相关肽在体外定向诱导脂肪干细胞向成骨细胞增殖分化的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,基因及蛋白质学检测,于2006-10/2007-08在武汉大学医学院中心实验室和三峡大学医学院病理实验室完成。材料:清洁级4月龄健康新西兰大耳白兔2只。方法:密度梯度离心+贴壁法体外分离培养兔脂肪干细胞,传至第3代分为2组:对照组加入含10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50mg/L抗坏血酸、1×10-8mol/L地塞米松、体积分数为0.15的胎牛血清的RPMI1640骨诱导培养基,实验组在此基础上加入1μg/L降钙素基因相关肽进行诱导培养。主要观察指标:细胞形态学变化,免疫组织化学染色测定细胞碱性磷酸酶活性,四环素标记法检测矿化结节的形成,RT-PCR和Westernblot法检测成骨细胞标志性蛋白I型胶原、骨钙素的表达。结果:实验组脂肪干细胞经成骨诱导培养后,形态规则、多角型细胞增多,细胞倍增时间明显短于对照组。随诱导时间的延长,实验组细胞碱性磷酸酶活性呈增加趋势,诱导7,10,14d细胞碱性磷酸酶活性均显著高于对照组(t=13.26,P<0.01)。诱导21d与对照组比较,实验组形成的金黄色圆形矿化结节数量增多,结节增大。诱导7d,14d实验组I型胶原及骨钙素mRNA、蛋白水平的表达均强于对照组。结论:在体外降钙素基因相关肽能诱导并促进兔脂肪干细胞向成骨细胞方向分化。
- 杨琴陈红雷陈德基张兆祥石新兰
- 关键词：降钙素基因相关肽脂肪干细胞成骨细胞
- KAI1基因在非小细胞肺癌中的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其与患者临床病理指标的关系。方法采用RT-PCR和Western blot法,检测48例肺癌患者手术切除的新鲜肺癌组织标本和20例同期手术切除的肺部良性病变周围正常组织中KAI1mRNA、KAI1/CD82,并结合患者的临床病理资料对其结果进行统计分析。结果肺癌组织和肺部良性病变组织中KAI1mRNA的阳性率分别为52%和90%,KAI1/CD82蛋白的阳性率分别为48%和85%,肺癌组KAI1mRNA及KAI1/CD82蛋白表达均低于肺部良性病变组(P<0.01);KAI1mRNA、KAI1/CD82表达水平与肺癌患者的临床分期、组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),其中KAI1/CD82表达与淋巴结转移状况密切相关(P<0.01),肺癌组织中KAI1mRNA与KAI1/CD82表达有相关性(P<0.01)。结论KAI1基因的低表达可能与非小细胞肺癌的发生、发展和转移有关;其下调的机制可能主要发生在转录水平;KAI1基因的表达可作为一项评估肺癌患者转移潜能的指标。
- 杨琴陈红雷陈德基张兆祥石新兰刘铭球
- 关键词：KAI1基因非小细胞肺癌逆转录-聚合酶链反应
