陈松彪
- 作品数：71 被引量：72H指数：6
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- 五株鼠伤寒沙门菌基因缺失株的生物学特性的比较研究
- 引言 研究开发遗传背景清晰、毒力弱、免疫原性好且产生的抗体可与野毒感染相区分的鼠伤寒沙门菌标记性活疫苗,是未来疫苗发展的方向.本试验将本实验室构建的鼠伤寒沙门菌crp、cya、sipB、crp/cya、crp/spB基因...
- 陈松彪张春杰程相朝李静余祖华何雷郁川颜云飞金修哲
- 鼠伤寒沙门菌SL1344Δcya平衡致死系统的构建及其雏鸡免疫保护试验
- 构建鼠伤寒沙门菌环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统，并对其生物学特性进行检测。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344Δcya为亲本株，利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的同源重组技术，经两步法缺失并筛选asd基因缺失株(...
- 李静陈松彪张春杰程相朝龙塔李银聚赵战勤廖成水
- 关键词：雏鸡鼠伤寒沙门菌基因重组疫苗载体免疫保护
- 文献传递
- 鸡白痢沙门菌C79-13△crp△asd平衡致死系统的构建及其生物学特性的初步研究
- 为了研制更加安全的鸡白痢沙门氏菌弱毒株,并使其开发为活疫苗载体,本研究构建了鸡白痢沙门菌C79-13△ctp△asd缺失株,并以此建成宿主平衡致死系统。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pRE△asd的大肠杆菌x7...
- 陈松彪李静尚珂郁川张春杰程相朝李银聚赵战勤
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌SL1344△crp△sipB缺失株的构建及生物学特性的初步研究
- 为研究更加安全有效且遗传背景清晰的减毒鼠伤寒沙门菌活疫苗候选株。本试验在单缺失株SL1344△crp的基础上,运用自杀性质粒介导的细菌同源重组技术敲除sepB基因,构建了SL1344△crp△sipB双缺失株。PCR及测...
- 陈松彪李静颜云飞张春杰程相朝郁川何雷余祖华丁轲赵战勤
- 关键词：同源重组毒力减毒活疫苗
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株CAMP合成酶缺失株平衡致死系统的构建及其生物学特性
- 构建能稳定携带外源基因的减毒鼠伤寒沙门菌SL1344△cya△asd,并对其生物学特性进行检测。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344△cya株为亲本株,利用重组自杀性质粒(pRE△asd)介导的同源重组技术,两步法缺失并筛选...
- 李静陈松彪余祖华何雷李小康贾艳艳郁川张春杰程相朝李银聚吴庭才赵战勤
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株的构建及免疫学特性
- 为构建缺失侵袭性蛋白B(SipB)基因(585 bp)的鼠伤寒沙门菌。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1 344株为亲本株,利用重组自杀性质粒(pRE△sipB)介导的同源重组技术,两步法缺失并筛选sipB基因缺失株(SL134...
- 陈松彪李静郁川余祖华颜云飞金修哲陈桂华赵战勤丁轲程相朝
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株sipB和crp基因缺失对其侵袭力影响的比较被引量：3
- 2015年
- 目的:为探讨sip B和crp基因对侵袭能力的影响。方法:以鼠伤寒沙门菌SL1344株sip B和crp缺失株为研究对象,进行生物学特性以及体内外侵袭力的研究。结果:生物学特性结果表明,sip B缺失株生化特性和亲本菌株相比没有发生明显的变化,而crp缺失株失去了利用麦芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力,并且生长速度较亲本菌株相比发生了显著的降低。体内侵袭力结果表明两个实验组小鼠肝脏和脾脏分离到的细菌数目均低于对照组,体外感染He La细胞结果显示sip B缺失菌株组的黏附率和侵入率较crp组和对照组均发生了显著的降低。结论:以上结果表明sip B基因在细菌侵染机体过程中扮演着重要的角色。
- 陈松彪张春杰程相朝李银聚李静何雷郁川张明亮余祖华贾艳艳赵战勤
- 关键词：鼠伤寒沙门菌侵袭力
- 表达猫瘟病毒VP2蛋白重组减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)构建及特性研究
- 2023年
- 为构建稳定表达猫瘟病毒(FPV)免疫原性蛋白VP2减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株,以洛阳分离株基因组为模板扩增VP2基因,并克隆至原核表达载体pYA3493,然后电转化至减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd,构建重组菌株SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2),并对其表型及生长特性、遗传稳定性、生物被膜、运动性以及毒力等进行分析。结果显示,携带FPVVP2基因重组减毒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)重组菌构建成功并表达出外源蛋白;SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)的生化、生长特性与空载体互补菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493)相似,较亲本菌株SL1344失去了利用麦芽糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇等碳源能力,生长速度、运动性、生物膜形成能力相较亲本株SL1344均发生了显著降低,但小鼠LD50较亲本株提高126倍。结果表明,成功构建了稳定携带FPV VP2蛋白新型减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2),该重组菌能够有效递呈所携带外源基因并稳定表达,为进一步预防FPV感染和新型疫苗研发提供理论依据。
- 王文婕杜付熙郁川尚珂尚珂李静余祖华廖成水李静张春杰贾艳艳陈松彪
- 关键词：VP2减毒鼠伤寒沙门菌
- 稳定表达PRRSV ORF5-ORF6融合基因重组减毒猪霍乱沙门菌的构建及其生物学特性被引量：1
- 2017年
- 为构建能稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5-ORF6融合基因的重组减毒猪霍乱沙门菌,以p MD19-T-ORF5-7为模板,PCR分别扩增出ORF5和ORF6,将2个基因先后插入表达载体PYA3493,构建了重组质粒PYA3493-ORF5-ORF6。PCR、双酶切及测序结果表明,成功构建了重组质粒p YA3493-ORF5-ORF6。将该重组质粒电转至减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1基因缺失株,获得PRRSVORF5-ORF6融合基因重组减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493-ORF5-ORF6),并对该重组减毒猪霍乱沙门菌的生长特性、遗传稳定性和表达特性进行了测定。进一步对重组减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493-ORF5-ORF6)研究发现,其生长速度比强毒株C78-1明显减慢,与ΔcrpΔcyaΔasd C78-1缺失株及ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)互补菌株基本一致。在体外连续传代能够稳定遗传ORF5-ORF6融合基因。重组菌培养上清经SDS-PAGE能检测到ORF5-ORF6蛋白条带,且经Western-blot分析证实,重组菌共表达的GP5和M蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合。以上结果表明,能稳定携带ORF5-ORF6融合基因的重组减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493-ORF5-ORF6)构建成功,为开发猪繁殖与呼吸综合征和仔猪副伤寒基因工程二联疫苗奠定了良好基础。
- 杨亚东张俊峰张春杰陈松彪程相朝廖成水刘莎莎王二鑫张晓洁尚珂汪洋
- 关键词：PRRSV生物学特性
- 鼠伤寒沙门菌sipB基因对HeLa细胞糖酵解的影响
- 李静陈松彪程相朝张春杰龙塔刘志军赵战勤
