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陈兴启

作品数:8 被引量:15H指数:3
供职机构:西北农林科技大学更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划博士科研启动基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 4篇专利
  • 3篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇基因
  • 4篇通用型
  • 3篇乳腺
  • 3篇转基因
  • 3篇细胞
  • 3篇酶切
  • 3篇克隆
  • 2篇动物
  • 2篇人溶菌酶
  • 2篇乳腺细胞
  • 2篇乳腺炎
  • 2篇同源
  • 2篇重组酶
  • 2篇转基因动物
  • 2篇转基因载体
  • 2篇腺细胞
  • 2篇腺炎
  • 2篇目的蛋白
  • 2篇基因载体
  • 1篇蛋白基因

机构

  • 8篇西北农林科技...
  • 2篇河南科技大学

作者

  • 8篇陈兴启
  • 7篇刘凤军
  • 7篇张涌
  • 7篇孙达权
  • 4篇张玉玲
  • 2篇张东
  • 2篇杨自军
  • 2篇杨鹭
  • 2篇王国华
  • 1篇贾淑玲

传媒

  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇Agricu...

年份

  • 2篇2010
  • 6篇2008
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体
本发明公开了一种通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体,本发明构建的抗乳腺炎转基因载体pCMV/CSN2-hLY-hIFA,在乳腺细胞中能高水平表达绿色荧光蛋白,在泌乳期的乳腺细胞中...
孙达权陈兴启张涌刘凤军杨鹭张东
文献传递
基因打靶载体pA2TR的构建
基因打靶技术因其通过同源重组的方法整合进基因组,在转基因动物生产中可以定点的改造动物的遗传基因,克服了其它转基因方法中随机插入而引起的一系列问题。通用型基因打靶载体的构建为基因打靶技术的应用提供了便利,现已存在几种通用型...
陈兴启
关键词:基因打靶选择标记基因多克隆酶切位点转基因动物重组酶
文献传递
通用型基因打靶载体的构建及其功能鉴定被引量:4
2008年
为了构建适合大多数基因座位点打靶的通用型基因打靶载体及打靶成功后去除正选择标记基因,以克隆载体pGEM-3Z为骨架,插入了一个正选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neo)、两个相同的负选择标记基因单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV-tk1和HSV-tk2,并在neo的两侧各添加了一个方向相同的LoxP(locus of crossing-over(x)in P1)序列及两个不同的多克隆位点序列,从而构建了载体pA2T。插入的两个不同的多克隆位点序列中,neo和HSV-tk1之间的多克隆位点序列有8个稀少的酶切位点、neo和HSV-tk2之间的多克隆位点序列有5个稀少的酶切位点,neo、HSV-tk1和HSV-tk2有各自独立的转录单元。脂质体法转染山羊成纤维细胞,用遗传霉素(G418)和丙氧鸟苷(GAC)进行正负筛选,验证了正负选择标记基因的生物活性,证明通用型基因打靶载体pA2T构建成功。载体pA2T转化组成性表达Cre重组酶(Cyclization recombination protein)的大肠杆菌BM25.8,检测到LoxP序列的生物活性,结果表明pA2T中的正选基因可以被Cre重组酶去除。因此,本研究所构建的通用型基因打靶载体pA2T,根据不同的基因座设计同源臂后,插入到MCS中可直接用于不同基因座位点的打靶,并能够在打靶成功后用Cre重组酶去除基因组中插入的neo基因,为用基因打靶的方法制作转基因动物提供了便利。
陈兴启孙达权刘凤军贾淑玲张涌
关键词:转基因动物CRE重组酶
通用型基因打靶载体的构建方法
本发明公开公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法,该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1),其中,在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列,将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连...
陈兴启张涌孙达权刘凤军张玉玲
文献传递
通用型基因打靶载体的构建方法
本发明公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法,该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1),其中,在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列,将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克...
陈兴启张涌孙达权刘凤军张玉玲
文献传递
通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体
本发明公开了一种通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体,本发明构建的抗乳腺炎转基因载体pCMV/CSN2-hLY-hIFA,在乳腺细胞中能高水平表达绿色荧光蛋白,在泌乳期的乳腺细胞中...
孙达权陈兴启张涌刘凤军杨鹭张东
文献传递
体细胞核移植法获得转人乳铁蛋白基因克隆山羊妊娠的研究被引量:8
2008年
[目的]探讨供体细胞类型、移植胚胎发育阶段、数量及部位对山羊转基因克隆效率的影响。[方法]利用体细胞核移植技术将转染人乳铁蛋白基因hLF的山羊胎儿成纤维细胞(GFF)和乳腺上皮细胞(GMGE)移植到MII期去核卵母细胞内,经电融合、激活、体外培养后,2-8细胞期克隆胚被移植到同期发情山羊的输卵管内,囊胚被移植到子宫角内。[结果]GFF与GMGE的妊娠率相近(输卵管移植妊娠率分别为26.47%及20.00%);在GFF,输卵管移植的妊娠率与子宫角内移植妊娠率接近(分别为26.47%及25.00%),输卵管移植胚胎平均数为21.2组的妊娠率显著高于5.93组和9.64组(40.00%及26.67%,21.43%)。[结论]供体细胞类型、移植胚胎的发育阶段及移植部位对山羊转基因克隆效率的影响不大,但对于输卵管移植,受体羊移植胚胎数量对妊娠率有明显的影响。此外,该研究还提示了利用成年羊乳腺上皮细胞制作转基因动物的可行性。
刘凤军张玉玲杨自军陈兴启孙达权王国华张涌
关键词:体细胞核移植转基因人乳铁蛋白基因乳腺上皮细胞
Pregnancies Resulting from Transgenic Embryos with Human Lactoferrin Gene Produced by Somatic Cell Nuclear Transfer被引量:3
2008年
[Objective] The aim of this study is to understand the effects of donor cell type,embryo stage,number and transfer position on the efficiency of goat transgenic clone.[Method] Using somatic cell nuclear transfer technology,the single goat fetal fibroblasts(GFF)and mammary gland epithelial cells(GMGE)harboring human lactoferrin(hLF)gene were transferred to the enucleated oocyte.Reconstructed karyoplast-cytoplast couplets were fused,activated,and cultured in vitro.Embryos at 2-8 cell stage were transferred into oviduct of synchronized recipients,and blastocysts were transferred into uterine horn.[Result] The pregnancy rate was similar between GFF and GMGE(oviduct transfer:26.47% vs.20.00%),and between oviduct transfer and uterine horn transfer(26.47% vs.25.00%)for GFF group;pregnancy rate in the group with the mean number of embryo transferred per recipient of 21.2 was significantly higher than in those the 5.93 group and 9.64 group(40.00% vs.26.67% and 21.43%).[Conclusion] These results indicate that pregnancy rate of goat transgenic clone couldn't be affected by donor cell type,embryo stage and transfer position but be done by the number of embryo transferred per recipient.In addition,the study also suggests the feasibility of making transgenic goat using GMGE as donor cells.
刘凤军张玉玲杨自军陈兴启孙达权王国华张涌
关键词:SOMATICTRANSGENELACTOFERRINMAMMARYGLAND
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