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大鼠坐骨神经缺损后背根神经节组织lncRNA表达变化被引量：4: 2012年; 目的:研究大鼠坐骨神经缺损后背根神经节中长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)的表达变化。方法:建立SD大鼠坐骨神经损伤0天、1天、4天和7天模型,取背根神经节组织进行lncRNA检测,进行差异基因的筛选,并应用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)对芯片结果进行验证;利用lncRNA与mRNA特异性表达的标准化信号强度,构建基因共表达网络。结果:共筛选出24个显著下调的lncRNAs,qRT-PCR检测的lncRNA AF130881和AB020616的表达变化与芯片一致。得到与lncRNA AF130881和AB020616正向或负向共表达的蛋白编码基因25个。结论:大鼠坐骨神经缺损后背根神经节组织中lncRNA的表达谱发生改变。; 钱天梅高蓉于彬丁斐顾晓松; 关键词：坐骨神经缺损背根神经节长链非编码RNA

多疣壁虎Fstl1基因表达及其在断尾损伤中的变化被引量：1: 2010年; 目的:研究多疣壁虎卵泡抑制素相似蛋白1(Fstl1)基因的表达及其在壁虎断尾损伤再生中的变化。方法:通过对多疣壁虎断尾损伤cDNA文库克隆测序获得Fstl1基因序列,并采用ClustalX软件比较GenBank同源蛋白进行系统进化分析。用Northern blot与原位杂交分析多疣壁虎Fstl1转录本大小及其在脊髓中的表达定位。通过RT-PCR方法研究Fstl1基因在壁虎主要组织中的表达分布与壁虎断尾损伤模型中变化。结果:基因系统进化分析表明,多疣壁虎Fstl1与人类Fstl1同源性较高,为96.5%;与爪蟾同源性较低,为62.9%。Northen blot分析表明,成年多疣壁虎Fstl1脊髓转录本大小约为3.7kb。原位杂交结果显示,多疣壁虎脊髓中Fstl1的阳性信号主要存在于灰质神经元细胞及室管膜细胞;而在断尾再生2～3周尾芽中,Fstl1阳性信号广泛存在于再生尾芽的新生区未分化细胞及间充质细胞,3周尾芽中,阳性信号还存在于软骨生成区。RT-PCR结果显示,多疣壁虎Fstl1基因在壁虎脑、脊髓、心、肝、肺、肾、卵巢、尾巴、肌肉中均有表达,其在脊髓中呈高表达。在断尾损伤模型中,多疣壁虎Fstl1表达呈动态变化,其在近端脊髓组织中,损伤3天时Fstl1转录表达增高,并随后开始下降恢复;在断尾再生尾芽中,3周时Fstl1转录表达低于2周表达量。结论:Fstl1基因主要分布于脊髓灰质神经元细胞中,Fstl1在壁虎断尾损伤后近端脊髓的表达呈动态变化,在再生尾芽表达3周下调。; 钱天梅陆仁飞周晓芳陈倩储钰丹顾星星; 关键词：多疣壁虎脊髓

基质金属蛋白酶7促进大鼠坐骨神经损伤后雪旺细胞的迁移和髓鞘形成: ＜正＞雪旺细胞经历去分化、增殖、迁移、再分化和髓鞘形成,参与损伤周围神经的修复和再生。我们之前的测序分析表明,大鼠坐骨神经损伤后,基质金属蛋白酶7（MMP7）这样一种雪旺细胞分泌的蛋白水解酶基因表达水平明显升高。然而,人...; 易晟钱天梅; 文献传递

microRNA与神经发育及再生。: 2011年; microRNA（miRNA）是一类内源性的非编码短小单链RNA，长度约为20~23个核苷酸。miRNA的功能极其复杂，主要是通过与靶基因mRNA的3LUTR（3’-untranslatedregion）完全或不完全配对，导致靶标mRNA降解或转录后翻译抑制，从而在基因的转录后调控中发挥重要的作用^[1]，实现对细胞增殖、凋亡、分化、新陈代谢等过程的调节^[2]。1种miRNA可调控数百个靶基因的表达，同时不同的miRNA可以协同调控同一个基因，这就使得miRNAs与其靶分子组成1个复杂的调控网络，在细胞及生物体的各种活动中发挥重要的作用^[3]。近来的研究表明miRNA与神经系统的发育和神经系统损伤修复等有着密切的关系，使miRNA成为神经系统研究又一新的焦点。; 钱天梅于彬丁斐顾晓松; 关键词：MICRORNA 神经发育 MIRNAS 基因MRNA 调控网络神经系统

坐骨神经缺损1周背根神经节组织中microRNA的表达变化: 2010年; 目的:研究大鼠坐骨神经缺损后背根神经节中microRNA(miRNA)的表达变化。方法:采用miRNA芯片检测神经缺损0 d(对照组)和7 d(实验组)背根神经节组织中miRNA的表达情况,应用Real time Taqman PCR对芯片结果进行验证。结果:实验组与对照组比较发生上调1.4倍和下调>1%以上的miRNA分别有13个和5个,Real time TaqmanPCR检测的4个miRNA的表达变化与芯片一致(上调:miR-21,miR-221;下调:miR-500,miR-551b)。结论:大鼠坐骨神经缺损1周后背根神经节组织中miRNA的表达谱发生改变。; 于彬周松林钱天梅王勇军丁斐顾晓松; 关键词：MICRORNA 神经缺损背根神经节

多疣壁虎SPARCL1多克隆抗血清的制备及鉴定: 2011年; 目的:制备针对多疣壁虎SPARCL1的多克隆抗体,为深入研究SPARCL1基因功能奠定基础。方法:构建pGEX-4T1-SPARCL1质粒,在大肠杆菌BL21表达GST-SPARCL1蛋白,经亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔,获得SPARCL1抗血清,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SPARCL1抗血清的效价,Western blot和免疫组化法检测多克隆抗体特异性。结果:成功构建多疣壁虎SPARCL1基因的原核表达质粒pGEX-4T1-SPARCL1,诱导得到较高纯度的GST-SPARCL1融合蛋白,免疫兔获得SPARCL1抗血清,经Western-blot及免疫组织化学实验显示所得抗体具有较高的效价及特异性。结论:成功获得较高效价特异性强的SPARCL1抗血清,为进一步深入研究多疣壁虎SPARCL1功能提供抗体工具。; 周晓芳陈倩储钰丹王学谦钱天梅陆仁飞顾星星; 关键词：融合蛋白多疣壁虎抗血清

坐骨神经再生过程中miR-221/222调控Schwann细胞的分子机制: 目的坐骨神经损伤后修复与再生的过程受到很多分子和细胞的调控,而Schwann细胞在神经损伤后的变性和再生中有着非常重要的作用。microRNA（miRNA）是一类22nt的内源性单链RNA分子,可诱导转录后基因沉默,在多...; 于彬钱天梅王勇军丁斐顾晓松; 关键词：神经再生 SCHWANN细胞; 文献传递

兔抗多疣壁虎Hoxc10抗血清的制备及鉴定: 2011年; 目的:制备兔抗多疣壁虎Hoxc10抗血清并进行特性鉴定。方法:构建pGEX-4T1-g-Hoxc10质粒,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-g-Hoxc10蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备Hoxc10抗血清。用Western blot和免疫组化染色法检测Hoxc10抗血清的特性。结果:构建的多疣壁虎Hoxc10基因的原核表达质粒pGEX-4T1-g-Hoxc10,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的Hoxc10融合蛋白,以其免疫大白兔获得较高效价的Hoxc10抗血清。Western blot及免疫组化染色法检测显示,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:利用原核表达的多疣壁虎GST-g-Hoxc10融合蛋白制备的Hoxc10抗血清效价高,特异性良好,为进一步深入研究Hoxc10的功能提供了重要的制剂。; 周晓芳陆仁飞陈倩储钰丹王学谦钱天梅顾星星; 关键词：多疣壁虎融合蛋白抗血清

坐骨神经再生过程中miR-221/222调控Schwann细胞的分子机制: 目的坐骨神经损伤后修复与再生的过程受到很多分子和细胞的调控,而Schwann细胞在神经损伤后的变性和再生中有着非常重要的作用.microRNA (miRNA)是一类22nt的内源性单链RNA分子,可诱导转录后基因沉默,...; 于彬钱天梅王勇军丁斐顾晓松; 关键词：神经再生 SCHWANN细胞

坐骨神经损伤早期背根神经节组织microRNA的表达变化被引量：2: 2010年; 目的研究大鼠坐骨神经损伤以后短时间背根神经节组织中microRNA(miRNA)的表达变化。方法采用miRNA芯片检测神经损伤0 h(对照组)、3 h和9 h(实验组)背根神经节组织miRNA的表达情况,应用real time Taqman PCR对芯片结果进行验证。结果损伤3 h实验组与对照组比较发生上调和下调1.3倍以上的miRNA分别有4个和2个,损伤9h实验组与对照组比较发生上调和下调1.3倍以上的miRNA分别有7个和5个,real time Taqman PCR检测miR-188和miR-500的表达变化与芯片一致。结论大鼠坐骨神经损伤3h和9h后背根神经节组织中miRNA的表达谱发生改变。; 于彬周松林钱天梅姚登兵丁斐顾晓松; 关键词：微RNA 神经损伤背根神经节

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钱天梅

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