金晓航
- 作品数:52 被引量:168H指数:8
- 供职机构:第四军医大学基础医学部人体解剖学教研室暨梁銶琚脑研究中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金创新研究群体项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- Af116609基因对胃癌细胞系SGC7901/VCR耐药性的影响被引量:1
- 2005年
- 目的研究Af116609基因转染胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR后,对胃癌细胞耐药性的影响。方法采用RT-PCR法克隆Af116609基因,用Northernblot检测其差异表达,以基因转染技术调节其表达,通过体外药敏实验观察其对胃癌耐药表型的影响。结果从胃癌耐药细胞SGC7901/VCR中克隆到Af116609基因的CDS序列327bp,该序列与GenBank登录的一致。Northernblot结果显示,该基因在耐药细胞高表达。体外药敏实验发现,转染正义真核表达载体的药敏细胞中该基因上调,对长春新碱、5-氟脲嘧啶和阿糖胞苷的耐药性增加,而对阿霉素的抗性有损害,对氨甲喋呤的抗性无明显影响;转染反义真核表达载体的耐药细胞中该基因下调,对上述5种药物的抗性均减弱。结论Af116609基因与胃癌MDR表型相关,可作为逆转胃癌MDR的候选靶分子。
- 金晓航杜静平尹芳张宇梅胡文华曹云新时永全赵燕秋乔泰东樊代明
- 关键词:SGC7901/VCR基因转染技术胃癌细胞系细胞耐药性NORTHERN体外药敏实验
- DAD1在小鼠精子的表达与意义
- Defender against apoptotic cell death(DAD1)是哺乳动物细胞内质网膜上寡糖基转移酶复合物的一个重要亚基,也是糖基转移酶维持细胞内正常水平的糖基化所必不可少的组份。DAD1基因功能异...
- 金晓航马斌芳程胖赵洁
- 朊蛋白在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中的过表达及其意义被引量:6
- 2003年
- 目的 探讨朊蛋白(PrP)在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中过表达及其与胃癌多药耐药性的相关性。方法(1)利用Northern印迹和Western印迹分别从RNA 水平和蛋白质水平检测朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR及其亲本细胞SGC7901中的表达;(2)借助DNA重组技术构建朊蛋白基因的正反义真核表达载体;(3)通过电穿孔方法将正反义真核表达载体分别转入SGC7901和SGC7901/ADR细胞;(4)以流式细胞仪检测瞬时转染细胞中的阿霉素蓄积和潴留。结果(1)Northern印迹和Western印迹结果提示朊蛋白在SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达显著高于其在SGC7901中的表达;(2)将正反义真核表达载体转入SGC7901(命名为PS)和SGC7901/ADR(命名为PA)中,PCDNA3.1空载体转入SGC7901(命名为BS)和SGC7901/ADR(命名为BA);转染48h后检测转染细胞的平均阿霉素荧光强度,阿霉素蓄积BS为8.9±0.7,PS为6.6±0.3,BA为5.5±0.7,PA7.5±0.6,阿霉素潴留BS为8.0±0.7,PS为5.9±0.5,BA5.1±0.7,PA为7.1±0.5,PS与BS相比两组均为P<0.01,BA与BA相比均为P<0.01表达,并对胃癌细胞,具有统计学意义。结论 朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中高表达并对胃癌细胞的药物蓄积有影响。
- 杜静平金晓航时永全赵艳秋刘长江曹云新乔泰东陈宝军樊代明
- 关键词:多药抗药性胃肿瘤
- TRPC6和TRPC7在下丘脑视上核和室旁核的形态学
- 视上核和室旁核是下丘脑内与两种垂体后叶激素,即精氨酸-加压素(AVP)和催产素(OXT)分泌密切相关的核团。通过这两种生物活性物质,视上核和室旁核广泛参与对体液、血压、学习记忆、疼痛、社会认知等的调控。钙离子是递质和活性...
- 史娟金晓航崔龙彪李博为赵琳李云庆
- 溶藻弧菌抗独特型抗体单链抗体基因真核表达载体的构建被引量:2
- 2007年
- 目的:构建溶藻弧菌抗独特型抗体的单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母分泌型表达载体。方法:从分泌溶藻弧菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中克隆该抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因(GenBank acces-sion No:DQ011530和DQ011531),并通过基因重组为scFv基因。然后将其克隆入毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K中,经序列测定后,电转化入毕赤酵母菌SMD1168中,将经表型筛选和G418抗性筛选的重组酵母菌株进行PCR鉴定。结果:获得毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K-scFv,经G418浓度梯度筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母菌株。结论:成功地构建溶藻弧菌抗独特型抗体的scFv基因的真核表达载体,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
- 付建芳黄威权秦红金晓航杨安钢
- 关键词:溶藻弧菌单链抗体真核表达毕赤酵母菌
- 豚鼠气单胞菌抗独特型单克隆抗体的制备和初步鉴定被引量:6
- 2006年
- 目的:制备豚鼠气单胞菌(Aeromonascaviae)抗独特型单克隆抗体(AIdmAb)并进行鉴定。方法:以具有中和作用的抗豚鼠气单胞菌mAb1F1免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备豚鼠气单胞菌AIdmAb。用ELISA法对mAb的效价及其模拟豚鼠气单胞菌的特性进行鉴定。结果:获得4株能稳定分泌豚鼠气单胞菌AIdmAb的杂交瘤细胞株,分别命名为1E12、4F6、6G6、7C1。经测定杂交瘤细胞腹水mAb效价为10-3~10-4。竞争抑制实验结果表明4株AIdmAb均能不同程度地抑制豚鼠气单胞菌与兔抗豚鼠气单胞菌多克隆抗体的结合。制备杂交瘤细胞腹水的BALB/c小鼠血清均能与豚鼠气单胞菌反应,其效价为1∶50~1∶800。结论:成功地制备了豚鼠气单胞菌抗独特型mAb的杂交瘤细胞株,为该菌的抗独特型疫苗制备研究奠定了基础。
- 唐旭陈瑞于辉金晓航师建国黄威权
- 关键词:疫苗豚鼠气单胞菌杂交瘤
- 抗迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及序列分析
- 2007年
- 秦红金晓航杨向民温伟红杨安钢黄威权
- 关键词:迟缓爱德华菌基因克隆
- 对北京印染厂专项审计的体会
- 2003年
- 张宇梅时永全金晓航赵燕秋樊代明
- 关键词:审计工作审计机关
- 迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因的构建、表达及鉴定被引量:2
- 2009年
- 目的构建、表达及鉴定迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因。方法采用RT-PCR方法从分泌迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1E11)中克隆出VH和VL可变区基因,再通过重叠延伸拼接PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建单链抗体基因;将其克隆至表达载体pET-28a并在大肠杆菌中表达,表达产物纯化后,用SDS-PAGE、Western blot及ELASA进行鉴定。结果迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv在BL21(DE3)菌中获得表达,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经过溶解包涵体、纯化和体外复性,获得了高纯度的单链抗体片段,重组蛋白的分子质量为27 ku。ELASA分析结果证实迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv与原代抗体一样,具有较高的抗原亲和力。结论成功构建了迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv,为进一步制备迟缓爱德华菌抗独特型抗体基因工程疫苗奠定基础。
- 秦红金晓航黄威权刘玉林
- 关键词:迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体
- DAD1在小鼠精子细胞的表达
- DAD1(defender against apoptotic cell death,DAD1)是细胞内质网膜上寡糖基转移酶复合物的一个重要亚基,是糖基转移酶维持细胞内正常水平的糖基化所必不可少的组份。DAD1基因功能异...
- 金晓航赵洁马斌芳李筠