邹莎莎
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：成都生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技重大专项长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 不同链长6A型肺炎球菌荚膜多糖与多糖结合物的稳定性及小鼠免疫原性
- 2023年
- 目的研究不同链长的6A型肺炎球菌荚膜多糖(type 6A pneumococcal capsular poly-saccharide,Pn6A)稳定性差异及链长对结合物稳定性和免疫原性的影响.方法采用高压均质机获得不同链长的Pn6A,并在1-氰基-4-二甲胺基吡啶四氟硼酸盐作用下与破伤风类毒素-己二酰肼衍生物形成共轭结合物.通过比较原始多糖、多糖降解物及结合物的核磁共振氢谱验证结构的正确性,通过硫酸蒽酮法和速率比浊法定量比较抗原性;通过高效液相-分子尺寸排阻层析-多角度激光散射仪比较不同链长多糖的稳定性;分析结合物物理化学(理化)性质,并通过重均相对分子质量(weight-average relative molecular weight,Mw)变化及游离多糖变化比较结合物稳定性;用原始多糖和结合物分别皮下免疫NIH小鼠3次,ELISA检测抗多糖IgG水平.结果Pn6A经机械剪切3、8、20次后,Mw由14.01×10^(5)g/mol分别下降为1.55×10^(5)、0.92×10^(5)和0.58×10^(5)g/mol,其对应结合物理化数据相近;核磁共振结果表明,多糖降解物和结合物各特征质子的化学位移相比原始多糖未发生改变;硫酸蒽酮法和速率比浊法定量计算得到的不同多糖和结合物单位抗原值相近;在不同pH及温度条件下,长链多糖及其结合物的Mw和游离多糖变化均大于短链多糖.不同链长多糖结合物免疫小鼠后诱导的IgG抗体滴度均高于原始多糖(F=2.90,P=0.048),而不同结合物之间的免疫原性差异无统计学意义(F=1.39,P=0.267).结论机械剪切不会破坏Pn6A化学结构和抗原性;Pn6A链长越短,所获得的多糖及结合物越稳定;Pn6 A经机械剪切后制备的结合物在小鼠体内可诱导良好的免疫应答.
- 周觉非代洁张玉洁蓝天杜游赵嘉祯陈思邓前廖红梅邹莎莎杨溢尧葛永红
- 关键词：核磁共振氢谱破伤风类毒素结合疫苗免疫原性
- 猕猴源肺炎链球菌分离和鉴定及FQ-PCR建立和在阐明其侵染机制研究中的应用
- 1猕猴源肺炎链球菌菌株的分离和鉴定 某猕猴繁殖与饲养场发生猕猴突然死亡的疾病，经临床观察、尸检，细菌的分离与鉴定及对小鼠的致病性试验，初步诊断为肺炎链球菌感染。 2肺炎链球菌种特异性PCR和FQ-PCR方法的建立...
- 邹莎莎
- 肺炎球菌1型荚膜多糖多克隆抗体制备与夹心ELISA法建立及其在多糖浓度测定中的应用
- 2013年
- 目的：利用肺炎球菌1型全菌体制备多克隆抗体，并且利用该抗体建立肺炎1型荚膜多糖夹心酶联免疫吸附分析法（ Enzyme-linked immunosorbent assay ，ELISA），用于检测发酵和纯化过程中的多糖浓度。方法用灭活的1型肺炎链球菌免疫家兔6周，获得高滴度的抗多糖血清，经过亲和层析纯化，获得高纯度的兔抗肺炎1型多糖抗体IgG。以纯化IgG作为包被抗体，加入多糖样品，再以生物素化的抗体作为检测抗体，建立夹心ELISA法检测肺炎1型多糖浓度。确定标准曲线的最佳线性范围，并对该方法进行特异性、准确性和精密度验证。结果兔免疫血清经过双向免疫扩散检测抗体滴度可达1∶32；该方法的线性检测范围为1．56～50 ng/mL；最低检测限为3．13 ng/mL。在标准品中混入其他型别多糖或培养基，回收率分别为102％和108％；该方法批内精密度和批间精密度分别为6．08％和7．01％。结论建立的夹心ELISA方法，其特异性、准确性和精密度均良好，可以特异地检测肺炎球菌1型多糖浓度。
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- 关键词：夹心ELISA
- 5型肺炎链球菌荚膜多糖与破伤风类毒素的结合及其影响因素探讨被引量：3
- 2013年
- 目的:制备5型肺炎链球菌多糖与破伤风类毒素衍化物的结合物,探讨结合过程中多糖分子大小、多糖蛋白投入比、反应时间等因素对结合终产物的影响。方法:应用1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸酯(CDAP)活化剪切后的5型肺炎球菌荚膜多糖,在缩合剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDAC)作用下与连接了二酰乙二腈(ADH)的破伤风类毒素(TT)进行偶联反应,经分子筛层析纯化,得到5型肺炎链球菌多糖与破伤风类毒素的结合物,并检测其生化指标,免疫原性等。结果:剪切后的多糖免疫原性良好,其与TT的结合物在分子筛上可以很好分离;描述了多糖活化时CDAP的投入量,蛋白与多糖投入比,反应时间等对结合效率、结合物分子量、游离糖含量和结合物的多糖蛋白比影响。合成的结合物在免疫小鼠后,多糖特异性IgG抗体几何平均滴度(GMT)较多糖显著提高,显示免疫增强效应。结论:CDAP方法可以应用于PN5型肺炎链球菌荚膜多糖与破伤风类毒素结合疫苗的制备。
- 尹丹丹周觉非刘威邹莎莎杨溢尧马诚崔长法江山张雪梅葛永红
- 关键词：肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗破伤风类毒素
- 14型肺炎球菌多糖双抗体夹心ELISA检测方法的建立
- 2020年
- 目的建立并验证测定14型肺炎球菌多糖(pneumococcal capsular polysaccharide serotype 14,PS14)浓度的双抗体夹心ELISA。方法采用Protein G亲和层析纯化兔血清,得到兔抗PS14多克隆抗体(多抗)。以鼠抗PS14单克隆抗体(单抗)为捕获抗体,兔抗PS14多抗为检测抗体,碱性磷酸酶标记山羊抗兔IgG为二抗,PS14为参考品建立双抗体夹心ELISA。确定鼠抗PS14单抗和兔抗PS14多抗的工作浓度,建立标准曲线,并验证该方法的准确性、精密度和特异性,考察佐剂对该方法的影响。结果鼠抗PS14单抗的最适工作浓度为5 μg/ml,兔抗PS14多抗的最适工作浓度为1 μg/ml,标准曲线的范围为9.375 ~ 600.000 ng/ml,线性良好,相关系数为0.999。测定多糖样品的PS14回收率为110% ~ 140%,多糖蛋白结合物样品的PS14回收率为90% ~110%。平均批内和批间精密度分别是5.64%和7.14%。13价结合物混合样品的PS14回收率为85%~100%;含有佐剂的疫苗样品的PS14回收率为85% ~110%。结论成功建立了双抗体夹心ELISA,该方法准确性、精密度、特异性良好,且检测结果不受佐剂的影响,具有一定耐用性。
- 但傲欢曾华英张伟邹莎莎张玉洁陈思邓前刘威
- 关键词：链球菌疫苗酶联免疫吸附测定
- 磷酸铝佐剂对9V型肺炎球菌多糖结合物的免疫促进及琥珀酸的影响被引量：1
- 2022年
- 目的探讨不同性质的磷酸铝佐剂对9V型肺炎球菌多糖(Streptococcus pneumococcal 9V polysaccharide,9V-PS)结合物的免疫促进作用,及琥珀酸对免疫应答的影响。方法采用3种磷酸铝佐剂与9V-PS结合物制备疫苗,另外在相同配方的疫苗中加入琥珀酸,同时将无佐剂的9V-PS结合物作为对照。用所制疫苗皮下免疫小鼠,收集不同针次免疫后血清,ELISA测定免疫后小鼠血清中抗9V-PS IgG抗体浓度。结果采用不同磷酸铝佐剂的3种疫苗之间比较,小鼠血清中抗9V-PS IgG抗体浓度差异无统计学意义(t值为0.38~0.86,P值均>0.05)。磷酸铝佐剂配伍的疫苗与无佐剂组相比,小鼠血清中抗9V-PS IgG抗体浓度均显著提高,差异有统计学意义(t值为3.75~4.35,P值均<0.05);佐剂A和B组加入琥珀酸与未加入比较,小鼠血清中抗9V-PS IgG抗体浓度差异无统计学意义(t值分别为1.39、0.45,P值均>0.05)。结论磷酸铝佐剂可以显著提高9V-PS结合物的免疫应答。不同磷酸铝佐剂的免疫促进作用无明显差异。添加琥珀酸对免疫应答不产生明显影响。
- 杨溢尧刘威邹莎莎曾华英张伟赵雪琪杜游崔长法
- 关键词：佐剂免疫磷酸铝琥珀酸
- 肺炎链球菌毒力因子的研究进展被引量：3
- 2009年
- 邹莎莎程安春汪铭书
- 关键词：肺炎链球菌毒力因子条件致病菌细菌性肺炎机体抵抗力
- CWPS竞争ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2013年
- 目的：建立竞争酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定C-多糖（Cell Wall Polysaccharides，cwes）浓度的方法。方法：以C-多糖为包被抗原，待测多糖为竞争抗原，与优化的抗C-多糖抗体反应，建立标准曲线，并验证该方法的准确性和精密度。结果：优化后的C-多糖包被浓度为10μg·mL^-1，抗C-多糖血清稀释度为1：160000。检测线性范围1250～20 ng·mL^-1，最低检测限为10ng·mL^-1，回归方程为B／B0=-0.2521 lg[CWPS]＋0.9529，线性相关系数为R^2=0.99。批内和批间精密度分别为9.7％和6.9％，测定PS6A精糖中标准CWPS的回收率为100.3％。结论：本研究建立的竞争ELISA方法，准确性和精密度均较好，可以检测肺炎链球菌荚膜多糖中CWPS的浓度。
- 廖红梅刘威杨溢尧邹莎莎曾华英江山
- 关键词：肺炎球菌竞争ELISA
