邢淑莲
- 作品数：27 被引量：111H指数：6
- 供职机构：中国热带农业科学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理轻工技术与工程更多>>
- 割手密DREB转录因子的克隆与功能鉴定
- 姚艳丽刘洋徐磊邢淑莲胡小文
- DREB类转录因子是一类植物中特有的，在非生物逆境胁迫中起重要作用的调控因子。 该研究以割手密为材料，采用同源基因克隆的方法克隆获得DREB2类转录因子基因8个(依次命名为： SsDREB2-1～8，GenBank登录号...
- 关键词：
- 关键词：基因克隆氨基酸
- 割手密过氧化氢酶基因(SsCAT-1)的克隆与比较分析被引量：5
- 2014年
- 割手密是栽培种甘蔗最重要的近缘物种之一,具有较强的抗逆性。本研究以高粱过氧化氢酶基因(NCBI登录号为XM002437586.1)c DNA序列为探针,对甘蔗EST数据库进行同源检索、筛选和拼接,后经基因组PCR、分子克隆、序列分析验证成功分离了2个割手密过氧化氢酶基因c DNA序列(Ss CAT-1c和Ss CAT-1d,Gene Bank登录号为KF864229和KF864230)。2条序列全长均为1 532 bp,包含10 bp的5'非翻译区(UTR)和43 bp的3'UTR,以及一个1 479 bp的开放读码框,编码492个氨基酸,此蛋白序列具有过氧化氢酶保守结构域,属于CAT家族。2条序列之间相似性为99.2%,存在12个单核苷酸多态性(SNP)位点,蛋白相似性99.0%,存在5个氨基酸变异位点。将推测的Ss CAT-1c和Ss CAT-1d蛋白序列与高粱、水稻、玉米等物种进行同源进化分析,均表现出极高的保守性。研究结果能对今后深入了解甘蔗及其近缘材料CAT基因家族的信息提供帮助,从而为进一步通过生物技术改良甘蔗品种抗逆性提供理论依据。
- 刘洋姚艳丽胡小文徐磊邢淑莲张树珍
- 关键词：割手密过氧化氢酶基因克隆
- 固相萃取/高效液相色谱法对火龙果中手性苯醚甲环唑的分离测定被引量：5
- 2018年
- 建立了固相萃取/高效液相色谱测定火龙果中手性苯醚甲环唑的方法。火龙果样品经乙腈提取,石墨化炭黑/氨基固相萃取柱净化后进行测定。实验考察了不同手性色谱柱、流动相组成、流速及进样体积对分离的影响,通过优化分离成功拆分了苯醚甲环唑对映体。优化的色谱条件为:Chrialcel IF-3手性柱为色谱柱,正己烷-乙醇(92∶8,体积比)为流动相,流速为1.0 m L/min,进样量为60μL。在上述条件下,4个对映体基本完全分离,分析时间不超过35 min。单个对映体在0.10~10 mg/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.025 mg/L。分别添加0.4、2.8 mg/kg两个水平的外消旋苯醚甲环唑,测得4个对映体的平均回收率分别为83.7%~99.3%和86.4%~91.6%,相对标准偏差分别为1.3%~7.2%和1.4%~3.1%。该方法的分离时间较短,分离效果好,灵敏度高,适用于火龙果等水果中手性农药苯醚甲环唑含量的测定。
- 张利强邢淑莲林丽云林玲叶剑芝杨春亮
- 关键词：固相萃取高效液相色谱法火龙果手性农药
- 割手密铜锌超氧化物歧化酶基因(SsSOD-1a)的克隆与分析被引量：3
- 2015年
- 本文以高粱超氧化物歧化酶基因(NCBI登录号为XM 002445626.1)c DNA序列为探针,对甘蔗EST数据库进行同源检索、筛选和拼接,通过分子克隆和序列分析验证,获得了1个割手密铜锌超氧化物歧化酶基因全长c DNA序列(Ss SOD-1a,Gene Bank登录号为KJ002571)。序列全长703 bp,由624 bp的开放读码框,36 bp的5’非翻译区和43 bp的3’非翻译区组成,编码207个氨基酸。氨基酸保守结构域分析表明,该蛋白序列具有铜锌超氧化物歧化酶保守结构域,属于SOD家族。氨基酸同源性分析发现,割手密Ss SOD-1a蛋白序列与鹰嘴豆、高粱、玉米等物种同源关系较近。
- 姚艳丽胡小文邢淑莲徐磊张树珍刘洋
- 关键词：割手密超氧化物歧化酶PCR
- 割手密谷胱甘肽硫转移酶基因SsGST的克隆与生物信息学分析被引量：3
- 2015年
- 为克隆割手密谷胱甘肽硫转移酶基因,采用电子克隆和RT-PCR技术获得了1个割手密GST基因,命名为Ss GST,并对其进行生物信息学分析。序列分析表明,割手密Ss GST基因c DNA全长702 bp,编码224个氨基酸,蛋白分子式为C1119H1756N300O327S5,预测蛋白质分子量为24.8 ku,等电点为6.21。蛋白疏水性分析表明Ss GST蛋白为亲水性蛋白。保守结构域预测表明Ss GST蛋白具有GST-N和GST-C结构域。Ss GST蛋白序列与玉米、高粱、谷子和甘蔗等植物的GST蛋白序列相似性较高,系统进化树分析表明,Ss GST蛋白与玉米GST蛋白亲缘关系最近。
- 徐磊胡小文姚艳丽邢淑莲刘洋
- 关键词：割手密GST基因电子克隆RT-PCR生物信息学
- 一种弹式树皮样品采集器
- 本实用新型提供了一种弹式树皮样品采集器，属于树皮采样装置技术领域，包括外壳、刀头连接处、采样刀和推样器，还包括拉栓和弹簧，所述的拉栓通过弹簧与刀头连接处相连接，外壳的两端分别设有开口，其中上端开口设有拉栓，下端开口设有采...
- 姚艳丽贺军军刘洋胡小文邢淑莲徐磊
- 文献传递
- 手性杀菌剂苯醚甲环唑在火龙果中的残留消解行为研究被引量：1
- 2018年
- 建立了火龙果中手性苯醚甲环唑分离并测定的固相萃取-高效液相色谱法,并比较分析不同处理浓度下苯醚甲环唑对映体在火龙果中的消解动态和立体选择性。研究表明:苯醚甲环唑4个对映体的消解动态均符合一级动力学方程,低、高浓度处理组半衰期分别为1.78~2.34 d和1.70~2.72 d。EFA在2个处理下均表现为前期大于0.5且逐渐升高,后期逐渐降低至0.4左右;EFB在低浓度处理时整个采样时期从0.55一直降低至0.43,而高浓度处理时,则先升高至0.6后逐渐降低至0.4左右。结果证明,苯醚甲环唑2对对映体在火龙果体内降解很快,存在立体选择性降解行为,并且处理浓度不同,选择性降解情况也不尽一致。
- 张利强邢淑莲林丽云林玲杨春亮
- 关键词：手性农药苯醚甲环唑火龙果农药残留消解动态
- 斑茅过氧化氢酶基因(EaCAT-1a)克隆与序列分析被引量：4
- 2015年
- 斑茅是栽培种甘蔗最重要的近缘物种之一,具有抗逆性强等特点。本文以高粱过氧化氢酶基因(NCBI登录号为XM002437586.1)c DNA序列为探针,对甘蔗属EST数据库进行同源检索、筛选和拼接,后经基因组PCR、分子克隆、序列分析验证成功分离了1个斑茅过氧化氢酶基因DNA序列(Ea CAT-1a,Gen Bank登录号为KF864223)。该序列全长3831 bp,包含8个外显子和7个内含子,c DNA序列长为1532 bp,包含10 bp的5’非翻译区(UTR)和43 bp的3’UTR,以及一个1479 bp的开放读码框,编码492个氨基酸,此蛋白序列具有过氧化氢酶保守结构域,属于CAT家族。将推测的Ea CAT-1a蛋白序列与高粱、水稻、玉米等物种进行同源进化分析,均表现出较高的保守性。
- 刘洋姚艳丽胡小文徐磊邢淑莲张树珍
- 关键词：斑茅过氧化氢酶
- 甜高粱WRKY转录因子基因的克隆与表达分析被引量：8
- 2017年
- 【目的】克隆甜高粱WRKY基因,分析其序列特征和表达谱,为甜高粱抗旱育种提供基因来源。【方法】以甜高粱品种M81-E幼苗总RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆甜高粱WRKY基因,通过生物信息学软件分析其序列特征,采用实时荧光定量PCR检测基因表达情况,获得2条WRKY基因,命名为SbWRKY1(Genebank登录号:KY231904)和SbWRKY2(Genebank登录号:KY231905)。【结果】SbWRKY1 cDNA序列全长1086 bp,包括1个1059 bp的开放阅读框,编码352个氨基酸。SbWRKY2 cDNA序列全长750 bp,包括1个717 bp的开放阅读框,编码238个氨基酸。2个基因编码的蛋白均具有WRKY核心序列"WRKYGQK"和"C-X4-5-C-X22-23-H-X1-H"锌指结构模型。SbWRKY1蛋白分子式为C_(1628)H_(2619)N_(509)O_(504)S_(16),预测蛋白质分子量为37.89 kDa,等电点(PI)为9.78。SbWRKY2蛋白分子式为C_(1131)H_(1752)N_(326)O_(344)S_(21),预测蛋白质分子量为26.09 kDa,等电点(PI)为8.43。系统进化树分析表明,SbWRKY1蛋白与高粱、玉米和谷子WRKY蛋白亲缘关系较近,SbWRKY2蛋白与高粱、芒草和玉米WRKY蛋白亲缘关系较近。荧光定量PCR分析表明,随着干旱胁迫时间延长,SbWRKY1和SbWRKY2呈上调表达趋势。【结论】SbWRKY1和SbWRKY2基因可能在甜高粱应对干旱胁迫中发挥一定作用。
- 徐磊胡小文姚艳丽邢淑莲刘洋
- 关键词：甜高粱转录因子WRKYRT-PCR
- 割手密鸟氨酸转氨酶(Ssδ-OAT-2)基因的克隆与表达分析被引量：1
- 2018年
- 鸟氨酸转氨酶是合成脯氨酸的关键酶之一,在植物适应逆境胁迫中起重要作用。本研究以割手密为研究材料,克隆得到了鸟氨酸转氨酶基因c DNA序列全长,将该基因命名为Ssδ-OAT-2(Gen Bank登陆号:KX714116)。该序列全长1 373 bp,包含一个1 365 bp的开放读码框(ORF),编码454个氨基酸,相对分子质量49.54 k D。同源比对分析表明,Ssδ-OAT-2基因同其近缘属甘蔗的同源性最高(99%),其次是高粱(98%),与其它禾本科植物的同源性约为92%。通过构建与GFP融合表达载体,转洋葱表皮细胞进行瞬时表达,结果表明,该蛋白质主要定位于细胞质和细胞膜上。Ssδ-OAT-2基因的获得为甘蔗抗逆基因工程提供候选基因资源。
- 姚艳丽胡小文徐磊邢淑莲高玉尧安东升刘洋
- 关键词：割手密基因克隆亚细胞定位
