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与脐带间充质干细胞共培养促进奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成及其机制被引量：1: 2017年; 目的研究脐带间充质干细胞(UCMSC)调节奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)乳蛋白合成的可能作用机制。方法利用TranswellTM小室将UCMSC和BMEC进行双层共培养,BMEC单纯培养为对照组,胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂AG1024处理细胞,ELISA检测上清IGF-1和β酪蛋白(CSN2)、κ酪蛋白(CSN3)含量变化,实时定量PCR检测Janus激酶2/信号转导子与转录激活子5(JAK2/STAT5)信号通路相关基因的相对表达丰度;再用JAK2信号通路阻断剂AG490孵育细胞,实时定量PCR检测CSN2、CSN3 mRNA的相对表达丰度。结果与UCMSC共培养后,BMEC的CSN2、CSN3合成量和CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、E74样ETS转录因子5(ELF5)mRNA相对表达丰度均显著高于单纯培养的BMEC;AG1024处理后,显著降低BMEC的CSN2、CSN3合成量,显著降低CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、ELF5 mRNA的相对表达丰度;给予AG490阻断后,显著降低CSN2、CSN3 mRNA相对表达丰度;在AG1024基础上,加入AG490后显著降低CSN2、CSN3 mRNA相对表达丰度。结论UCMSC能够通过IGF-1介导JAK2/STAT5信号通路,上调BMEC乳蛋白合成关键基因mRNA的表达丰度,促进其乳蛋白的合成。; 赵艳坤邵伟雒诚龙武开乐余雄; 关键词：共培养乳蛋白

移植脐带间充质干细胞对荷斯坦公犊牛日增重和血清中激素水平的影响: 2015年; 为了探究移植脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对荷斯坦公犊牛日增重和血清中激素水平的影响,试验选取1月龄体重相近的荷斯坦公犊牛28头,随机分为对照组和试验组;采集健康的荷斯坦新生胎牛的脐带组织,通过胰酶消化筛选法体外分离、纯化及培养牛脐带间充质干细胞(UCMSCs),试验组公犊牛注射干细胞3×105个/kg(稀释至8 m L颈静脉注射),对照组注射等量生理盐水,试验期为155 d。结果表明:注射UC-MSCs后,4,5,6月龄时,试验组公犊牛平均体重显著高于对照组(P<0.05)。4月龄时,试验组公犊牛平均日增重显著高于对照组(P<0.05);6月龄时,试验组公犊牛平均日增重极显著高于对照组(P<0.01)。4月龄时,试验组公犊牛血清中生长抑素(SS)水平显著低于对照组(P<0.05);6月龄时,试验组公犊牛血清中甲状腺素(T4)、三碘甲腺原氨酸(T3)水平差异极显著(P<0.01)。说明移植UC-MSCs能显著增加荷斯坦公犊牛的体增重,降低血清中生长激素(GH)、SS、瘦素(LEP)的水平,提高血清中T4、T3水平,而血清中这些激素水平与公犊牛的生长发育密切相关,进而影响其生长性能。; 赵艳坤彭国亮邵伟王立文余雄; 关键词：脐带间充质干细胞荷斯坦公犊日增重血清激素

不同浓度奶牛脐带间充质干细胞对奶牛乳腺上皮细胞葡萄糖代谢的影响研究: 2015年; 为探究在不同浓度下奶牛脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)共培养对共培养体系葡萄糖代谢的影响及其作用机制。研究将P3代UC-MSCs与P3代BMECs,按照浓度为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶50、1∶100、1∶1 000和2∶1等不同比例随机混合培养,同时设立UC-MSCs与BMECs单纯培养组为对照组,并分别于0、24、48、72、96、120和144 h时提取上清液,检测己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙酮酸激酶(PK)的活性,及乳酸(LD)的分泌量。发现将UC-MSCs和BMECs按照不同浓度比例混合共培养后,1∶2浓度组HK的活性显著高于BMECs单纯培养组(P<0.05),且72 h时活性显著高于0、24、48和144 h(P<0.05);LD的分泌量在1∶2浓度组达到最高,显著高于BMECs单纯培养组(P<0.05),且72 h与0 h相比差异显著(P<0.05);PK活性在1∶2浓度组达到最高,显著高于BMECs单纯培养组(P<0.05),且72 h时达到最高,显著高于0、120和144 h(P<0.05);1∶2浓度组的LDH活性显著高于BMECs单纯培养组(P<0.05),0 h组与其他各组相比均差异显著(P<0.05)。通过研究得出以下结论:不同浓度UC-MSCs和BMECs混合共培养能够促进共培养体系的葡萄糖代谢,其中1∶2浓度组葡萄糖代谢最快,葡萄糖代谢速率最快的时间点为72 h时。其作用机制是UC-MSCs和BMECs混合共培养能够增强HK和PK活性,降低LDH活性,提高LD分泌量。; 王立文邵伟张晓雪赵艳坤李杨林静余雄; 关键词：脐带间充质干细胞乳腺上皮细胞葡萄糖代谢

多生态复合益生素对仔猪生长及其育肥性能影响的研究: 2012年; 试验旨在探讨相同日粮条件下添加多生态复合益生素对仔猪生长及其育肥性能的影响。选取体质、年龄、健康程度相似的断奶仔猪杜洛克、约克夏和长白共1 1 0头和1 36头生长育肥猪,随机分为试验组和对照组;两组基础日粮一致,仔猪的试验组在基础日粮中添加0.35%多生态复合益生素,育肥试验组添加0.32%多生态复合益生素。断奶仔猪试验结果表明:试验组与对照组在试验中期体重、体长差异极显著(P<0.01),平均日增重增长了52.1 7%;末期时体重、体长差异极显著(P<0.01),平均日增重提高了20.93%。育肥猪试验结果表明:试验组与对照组在试验中期时体重、体长差异极显著(P<0.01);末期时体重、体长差异极显著(P<0.01),平均日增重提高了1 4.7%。表明,多生态复合益生素能减少仔猪死亡率、提高生长速度,并且提高育肥猪日增重、降低料重比、较大幅度减少异臭和苍蝇数量。; 李武赵艳坤周琛官飞; 关键词：断奶仔猪生长育肥猪

移植脐带间充质干细胞对荷斯坦公犊日增重和血清中营养物质部分代谢指标的影响: 2015年; 为探究移植脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对荷斯坦公犊血清中营养物质部分代谢指标的影响,2013年7月至12月选取年龄相近、体重差异不显著荷斯坦公犊28头,随机分为对照组和试验组。将培养成功的UC-MSCs按公犊体重每公斤3×105个干细胞稀释至8 m L颈静脉注射至其体内,对照组注射等量生理盐水。空腹测体重并静脉釆血后3 500 r/min转离心15 min收集血清待检,检测项目为TP(总蛋白)、ALB(白蛋白)、BUN(尿素氮)、TG(甘油三酯)、CHO(胆固醇)、ALP(碱性磷酸酶)、LDH(乳酸脱氢酶)、CK(肌酸激酶)。注射UC-MSCs后,4、5、6月龄时,试验组平均体重显著高于对照组(P<0.05);4月龄时,试验组平均日增重显著高于对照组(P<0.05);6月龄时,试验组平均日增重极显著高于对照组(P<0.01)。4月龄时,试验组血清中ALP、LDH、CK均显著高于对照组(P<0.05),试验组血清中BUN水平显著低于对照组(P<0.05);5月龄时,试验组血清中Alb、ALP水平显著高于对照组(P<0.05);6月龄时,试验组血清中TP水平显著高于对照组(P<0.05),且两组血清中CK水平差异极显著(P<0.01)。注射UC-MSCs能够显著提高公犊血清中TP、Alb、ALP、LDH的含量,降低血清中BUN、CK水平,从而稳定机体内环境,促进公犊机体蛋白、骨骼的合成和沉积,间接影响其增重和体尺,增加荷斯坦公犊的发育速度,有效的增加其生长性能。; 赵艳坤彭国亮邵伟王立文马占芳余雄; 关键词：脐带间充质干细胞荷斯坦公犊日增重

不同浓度奶牛乳腺上皮细胞和奶牛脐带间充质干细胞共培养对细胞增殖作用的研究: 2016年; 研究在不同浓度下奶牛脐带间充质干细胞和奶牛乳腺上皮细胞共培养对共培养体系细胞增殖的影响。将P3代UC-MSCs与P3代BMECs按照浓度比例为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶50、1∶100、1∶1000、2∶1等不同比例随机混合培养,同时设立UCMSCs与BMECs单纯培养组为对照组,并分别于0h,24h,48h,72h,96h,120h和144h时观察各组细胞的形态变化,用MTT法检测细胞增殖。将UC-MSCs和BMECs按照不同浓度比混合共培养后,细胞生长状态良好,无抑制作用;MTT检测增殖发现各组OD值在72h时均达到最大,其中1∶2浓度组OD值最大,细胞增殖最快。UC-MSCs和BMECs混合共培养,两种细胞之间无抑制作用,生长状态良好,同时能够促进共培养体系的细胞增殖。; 王立文邵伟赵艳坤李杨林静余雄; 关键词：脐带间充质干细胞乳腺上皮细胞细胞共培养细胞增殖

奶牛脐带间充质干细胞的体外培养与鉴定被引量：5: 2014年; 【目的】在无菌环境下截取新生牛脐带20 cm,在体外进行原代奶牛脐带间充质干细胞分离培养,建立原代奶牛脐带间充质干细胞分离、培养、传代的方法,并进行形态学观察和多向分化能力检测。【方法】采用多重酶混合消化法,分离出原代奶牛脐带间充质干细胞,通过倒置显微镜下观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,向成脂、成骨诱导分化。【结果】培养出了奶牛脐带间充质干细胞。倒置显微镜下观察,细胞形态呈相对均一的梭形,平行排列生长或呈旋涡状生长。能够诱导分化为成脂、成骨细胞。细胞增殖能力强,可多次传代。【结论】胰酶消化法能够快速分离出原代奶牛脐带间充质干细胞,所获得的细胞纯度较高,具有一般间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。; 王立文邵伟赵艳坤余雄; 关键词：奶牛脐带间充质干细胞

脐带间充质干细胞对乳腺上皮细胞乳蛋白合成的调控研究: 2017年; 为探究脐带间充质干细胞(UC-MSCs)调控乳腺上皮细胞(BMECs)乳蛋白合成的可能作用机制,实验共分为8组,实验组利用Transwell小室双层共培养UC-MSCs和BMECs,BMECs单培养为对照组,每组又分为不处理组和IGF-ΙR抑制剂AG1024、PI3K抑制剂LY294002不同处理组,ELISA检测上清IGF-Ι和β-酪蛋白(CSN2)、κ-酪蛋白(CSN3)含量,实时荧光定量PCR测定CSN2、CSN3、P13K、AKT、m TOR m RNA表达。结果表明:实验组各项指标均极显著高于对照组(P<0.01);AG1024处理显著下调各基因表达(P<0.05),极显著降低CSN2、CSN3蛋白含量(P<0.01);LY294002处理极显著抑制PI3K m RNA表达(P<0.01),显著降低CSN2、CSN3 m RNA表达和蛋白含量;AG1024和LY294002共同处理极显著下调P13K、AKT、m TOR m RNA表达(P<0.01),显著下调CSN2、CSN3 m RNA表达(P<0.05),极显著降低CSN2、CSN3蛋白含量(P<0.01)。综上,UC-MSCs能够通过IGF-Ι介导PI3K/Akt/m TOR信号通路,上调BMECs主要乳蛋白基因表达,促进乳蛋白合成。; 赵艳坤邵伟余雄; 关键词：脐带间充质干细胞乳腺上皮细胞乳蛋白

PM发酵粉对新疆荷斯坦泌乳牛生产性能和血清抗氧化水平的影响被引量：1: 2016年; 为研究微生态制剂PM发酵粉对奶牛生产性能和血清抗氧化水平的影响,在新疆伊犁中州牛场将60头荷斯坦泌乳牛随机分成对照组和试验组,试验组在对照组日粮基础上每天饲喂PM发酵粉12 g。预饲期为10 d,正试期为90 d,每3 d测定日采食量,每5 d测定日产奶量,每30 d静脉采血测定血清生化指标。结果表明:与对照组相比,饲喂PM发酵粉可以提高泌乳牛产奶量、采食量,提高血清中超氧化物歧化酶活力,降低血清中丙二醛含量。说明饲喂PM发酵粉可促进饲料中营养物质的吸收,提高机体抗氧化能力,保障奶牛健康。; 邵伟赵艳坤张晓雪王立文余雄; 关键词：荷斯坦奶牛乳品质抗氧化水平

脂滴发育中代谢相关的结构蛋白研究进展被引量：4: 2017年; 一般认为脂滴是脂肪细胞中甘油三酯的贮存器,但近来研究发现细胞中脂肪的运输贮存与动员分解都是以脂滴为核心完成的,种种现象揭示了脂滴在细胞内并不仅仅是一个简单的能量贮存器,而更多地扮演着一个多功能细胞器的角色。通过对脂滴结构进行分析发现,脂滴以中性脂肪为核心,表面覆盖单层磷脂结构并镶嵌多种功能蛋白,即脂滴相关蛋白。脂滴相关蛋白以不同形式协同脂滴参与调控脂代谢、膜转运及信号转导等多个生理过程。根据蛋白承载功能的不同,可大致将其分为三大类:脂滴结构蛋白、脂滴代谢相关蛋白与脂滴转运蛋白。其中,结构蛋白如PAT家族蛋白、CIDE家族蛋白等在脂滴发育代谢的调控与信息传递介导中发挥着重要作用,此外,还有激素敏感脂肪酶、脂肪甘油三酯水解酶与Rab蛋白等代谢与转运蛋白通过不同形式参与脂滴发育。目前,脂滴相关蛋白新种类与具体作用机制仍在不断探索中。作者就细胞中脂滴与脂代谢及脂滴相关蛋白的研究进展做一综述。; 雒诚龙邵伟赵艳坤余雄; 关键词：脂滴代谢

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赵艳坤

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