赵庆欢
- 作品数:8 被引量:22H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 轮状病毒Vp6蛋白的免疫荧光检测被引量:10
- 2008年
- 目的检测在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的重组轮状病毒(Rotavirus,RV)Vp6蛋白和RV SA11感染的MA104细胞中不同时间表达的Vp6蛋白及其分布规律。方法应用纯化的重组A组人轮状病毒TB-Chen株Vp6(rVp6)蛋白和RVSA11分别免疫豚鼠,制备抗血清,以抗rVp6豚鼠血清作为检测抗体,应用间接免疫荧光技术检测rVp6蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。分别用抗Vp6和抗RV SA11豚鼠血清检测Vp6蛋白和RV SA11株在感染的MA104细胞中的分布。结果在轮状病毒感染的MA104细胞和大肠杆菌BL21(DE3)中均能检测到轮状病毒Vp6蛋白。以抗RV SA11血清作为一抗检测感染细胞,比用抗rVp6血清检测具有更强的敏感性。结论免疫荧光试验可用于轮状病毒Vp6蛋白的检测。
- 尹兴晓文喻玲赵庆欢于洋陈元鼎
- 关键词:轮状病毒免疫荧光
- 免疫荧光检测轮状病毒Vp6在真核细胞中的合成与分布
- 本研究应用重组表达的A组轮状病毒TB-Chen株Vp6(rVp6)蛋白免疫豚鼠,制备抗rVp6血清抗体作为间接免疫荧光的捕获抗体,检测SA11病毒感染的MA104细胞中表达的病毒Vp6蛋白,观察Vp6在细胞内的复制及其分...
- 尹兴晓文喻玲赵庆欢于洋陈元鼎
- 关键词:轮状病毒免疫荧光荧光检测抗体制备
- 文献传递
- 人类A组轮状病毒Vp4的表达和抗原性研究
- 轮状病毒/(Rotavirus RV/)是呼肠病毒科/(Reoviridae/)轮状病毒属/(Rotavirus/),是引起人类、哺乳动物类及鸟类病毒性胃肠炎的重要病原体。RV外面有三层衣壳蛋白,Vp4位于衣壳结构的最外...
- 赵庆欢
- 关键词:A组轮状病毒VP4免疫反应性免疫荧光
- 文献传递
- 免疫荧光法检测原核和真核细胞中表达的轮状病毒外壳蛋白VP4被引量:3
- 2008年
- 目的:用免疫荧光法快速检测原核和真核细胞中表达的轮状病毒(RV)外壳蛋白VP4。方法:以抗VP4的抗体为一抗、FITC标记的羊抗豚鼠IgG为二抗,用免疫荧光方法检测在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达的同源RVVP4;检测SA11或Wa株RV感染MA104细胞后不同时间段病毒VP4的合成及其在感染细胞中的分布情况。结果:用免疫荧光法可直接检测到原核细胞中表达的外源蛋白,也可检测到病毒蛋白在真核细胞中的分布情况。结论:免疫荧光法可特异、方便、快速地检测RVVP4在原核和真核细胞中的表达;来源于RVTB-Chen株的VP4抗体可特异性识别同源病毒VP4,交叉识别SA11或Wa株的VP4。
- 赵庆欢文喻玲于洋陈元鼎
- 关键词:免疫荧光法外壳蛋白VP4
- B细胞稳态的信号调节被引量:2
- 2007年
- 在人类,65%的骨髓产生的B细胞是自身反应性的,它们大部分在骨髓中被克隆删除了。但有些B细胞通过免疫无力的方式逃脱了这种克隆删除到达外周,产生抗自身的抗体。研究表明,在鼠和人类中,B细胞存活时间过长是引发自身性免疫病的原因之一。B细胞的过度活化将导致自身反应性B细胞的产生和破坏自身免疫耐受,引起自身免疫性疾病或肿瘤;但B细胞的活化不足将使B细胞数量大大减少,抗原应答能力降低,从而使适应性免疫应答失衡。细胞因子和其他信号分子对B细胞稳态的调节是十分严密的,它们或调节B细胞的发育、成熟和分化,或调节B细胞向外周的迁移,或通过调节B细胞周期而使B细胞停留在特定时期,从而使B细胞避免凋亡,或通过调节抗凋亡蛋白或凋亡蛋白而决定B细胞的生存或死亡。本文就细胞因子、转录因子、蛋白激酶等信号分子对B细胞稳态的调节做一综述。
- 赵庆欢陈元鼎
- 关键词:B细胞稳态信号调节BAFF
- A组人轮状病毒NSP3基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:5
- 2007年
- 目的:获得轮状病毒NSP3基因的表达产物及其抗血清。方法:将TB-Chen株轮状病毒NSP3基因插入质粒pETL,构建重组表达质粒pET-NSP3,并转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白NSP3;用凝胶分离回收的方法纯化该蛋白,免疫豚鼠制备该蛋白的抗血清。结果:构建了重组表达质粒pET-NSP3,并在大肠杆菌中高效表达了重组蛋白NSP3,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的28.6%;有效地纯化了目的蛋白并制备了该蛋白的抗血清,Western印迹表明该抗血清能与重组蛋白NSP3发生特异性免疫反应。结论:通过质粒pETL能高效表达轮状病毒NSP3蛋白,该重组蛋白具有较好的免疫反应性,为进一步研究其结构、功能及免疫学性质奠定了基础。
- 于洋文喻玲赵庆欢曹志亮陈元鼎
- 关键词:轮状病毒克隆
- A组人轮状病毒全基因组克隆和基因型分析被引量:13
- 2008年
- 运用基因克隆和重组技术,从一急性胃肠炎患儿样品中克隆到一株轮状病毒(RV)全基因组cDNA。核苷酸序列测定结果表明,该株RV基因组11条RNA共含有18613个核苷酸(3302bp^751bp),编码5791个氨基酸。全基因组研究结果表明,该株RV(TB-Chen)为A组,II亚组,基因型为G2P[4]/NSP4[A]。这是首个A组人RV全基因组研究结果的报道,对研究和开发RV疫苗具有积极的意义。
- 陈元鼎刘晓熊新宇曹志亮文喻玲赵庆欢余洋尹兴晓李传印范耀春
- 关键词:全基因组克隆基因型分析
- 轮状病毒全基因组及蛋白表达研究
- 陈元鼎曹志亮赵庆欢于洋尹兴晓范耀春李传印文喻玲张艳
- 1、1979-1986年期间系统地开展了云南省轮状病毒流行病学调查,从幼儿临床感染样品中成功分离一株轮状病毒(RV),命名为TB-Chen株。2、TB-Chen株被鉴定为A组(Ⅱ亚组:短核酸型),经全基因组测序发现该基因...
- 关键词:
- 关键词:轮状病毒流行病学调查