贾龙
- 作品数：8 被引量：23H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- MiR-199a-3p在C2C12成肌细胞分化过程中的作用及机制研究
- microRNA(miRNA)可以参与肌肉许多功能的调控。有些miRNA可以调节肌细胞的增殖和分化，如miR-1、miR-133、miR-26a、miR-27b、miR-29、miR-125b、miR-155、miR-1...
- 贾龙
- 关键词：成肌细胞靶基因肌管
- 文献传递
- 猪骨骼肌中FoxO1与MyHCs的相关性研究
- 为了阐明FoxO1与肌纤维类型的关系,本实验采用组织免疫化学、real-time RT-PCR和Western blotting等方法检测了猪比目鱼肌和趾长伸肌中Fox01和MyHCs的表达情况,并对其之间的相关性进行了...
- 史新娥吴国芳路宏朝朱嘉宇贾龙宋成创杨公社
- 关键词：骨骼肌
- 干扰Sema7A抑制C2C12成肌细胞的增殖和分化被引量：1
- 2014年
- 为研究脑信号蛋白家族(Semaphorins)成员Sema7A对成肌细胞增殖和分化的影响,本文设计并合成了Sema7A基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用此siRNA转染C2C12成肌细胞.通过Hoechst核染和流式细胞术检测细胞增殖情况,免疫荧光检测肌管的形成情况,realtime qPCR和Western印迹技术检测成肌标记基因的变化.结果显示,干扰Sema7A后,C2C12成肌细胞增殖减慢,处在G2和S期的细胞所占的比例明显下降,而G1期细胞的比例升高.免疫荧光检测结果显示,干扰Sema7A后,肌管的直径及MyHC+细胞所占比例均显著降低.Real-time qPCR和Western印迹结果也显示,肌肉分化标志基因MyoD、MyoG、MyHC的mRNA及蛋白质表达均下降.进一步检测Sema7A受体下游信号通路发现,干扰Sema7A后,其下游信号分子PI3K和AKT的磷酸化水平被下调.以上结果表明,Sema7A可以调节C2C12成肌细胞的增殖和分化,可能是通过其受体作用于PI3K/AKT信号通路实现的,这为进一步研究Sema7A在骨骼肌发育中的作用提供实验基础.
- 贾龙李岳峰吴国芳路宏朝杨公社史新娥
- 关键词：C2C12成肌分化
- 干扰Sirt2促进C2C12成肌细胞分化被引量：4
- 2014年
- Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并用细胞免疫荧光化学、real-time PCR和Western印迹方法,检测其对成肌分化标志基因及相关信号通路因子的影响.结果显示,干扰质粒shRNA-663处理C2C12细胞后,Sirt2 mRNA及蛋白质表达水平与对照相比显著下调(P<0.01);C2C12细胞分化第4 d,MyoD,MyoG,MyHC mRNA及蛋白质表达均显著增加(P<0.01);PI3K,AKT,FoxO1磷酸化水平明显升高.结果表明,Sirt2可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路来促进成肌细胞分化,是肌生成的一个潜在调节因子.
- 吴国芳路宏朝贾龙宋成创史新娥杨公社孙世铎
- 关键词：成肌分化C2C12
- 阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化被引量：17
- 2014年
- 【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1—3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。待细胞汇合至70%—80%时,将培养基换成含50 nmol·L-1渥曼青霉素(wortmannin,WM)的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化(P>0.05),非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降(P<0.05)。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。
- 史新娥吴国芳宋子仪路宏朝贾龙朱嘉宇杨公社
- 关键词：PI3KAKT通路FOXO1骨骼肌卫星细胞成肌分化FOXO1
- Sirt2通过ERK1/2通路影响C2C12成肌细胞增殖
- 吴国芳宋成创路宏朝贾龙杨公社史新娥孙世铎
- 关键词：细胞增殖细胞周期ERK1/2信号通路
- FoxO1通过抑制CaN/NFAT信号通路抑制氧化型肌纤维的形成
- 史新娥吴国芳路宏朝朱嘉宇贾龙宋成创杨公社
- 关键词：FOXO1肌纤维类型
- 干扰Semaphorin7A抑制C2C12成肌细胞的增殖及分化
- 贾龙李岳峰史新娥杨公社
- 关键词：C2C12成肌分化
