贾孟春
- 作品数：24 被引量：66H指数：5
- 供职机构：国家人口计生委科学技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠睾丸特异表达基因Ube1的分离鉴定及生物学特征(英文)被引量：3
- 2008年
- 本研究采用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)和cDNA快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术从大鼠A型精原细胞和粗线期精母细胞中成功克隆出大鼠泛素激活酶(ubiquitin-activating enzyme)基因Ube1(GenBank登录号EF690356)。该基因序列全长3433bp,其中开放阅读框有3171bp,编码一个含1057个氨基酸的蛋白质。Blast比对显示,Ube1与小鼠泛素激活酶基因Ube1y1的同源性为93%,与人泛素激活酶基因UBE1的同源性为82%。Ube1基因编码的蛋白质含泛素激活酶信号位点和泛素激活酶活化位点,这些位点也存在于人类和小鼠的泛素激活酶1中。RT-PCR分析显示,Ub e1在睾丸中大量表达,而在心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脑、卵巢中没有表达。荧光定量PCR分析不同生精细胞中Ube1的表达,显示Ube1在A型精原细胞中大量表达,在粗线期精母细胞、圆形精子细胞和支持细胞中微弱表达。以上结果提示,Ube1是大鼠睾丸特异表达基因,可能通过参与泛素/蛋白酶体途径来影响精子发生。
- 杜颖刘美玲贾孟春
- 关键词：精子发生抑制性消减杂交逆转录-聚合酶链反应
- 米索前列醇片不同给药途径的人体药动学研究被引量：14
- 2010年
- 目的比较米索前列醇不同给药途径(口服、舌下和阴道)药动学特征。方法采用平行试验设计,30名中国健康女性志愿受试者随机分为3组,分别空腹口服、舌下含服和阴道给予400μg米索前列醇片,采用液相色谱-串联质谱法测定受试者血浆中米索前列醇活性代谢物米索前列酸的浓度。结果受试者空腹口服、舌下含服和阴道给药后的主要药动学参数:tm ax分别为(0.18±0.05),(0.40±0.14)和(5.05±1.80)h,mρax分别为(1 424±380),(783±285)和(302±198)ng.L-1,t1/2分别为(0.61±0.32),(0.82±0.18)和(5.27±4.38)h,AUC0-t分别为(698±138),(824±302)和(1 313±691)ng.h.L-1,AUC0-∞分别为(709±143),(846±306)和(1 816±727)ng.h.L-1。结论米索前列醇片经不同途径给药后的药动学有较大差异。空腹口服给药后吸收迅速,米索前列酸达峰最快,舌下含服给药tm ax略有延长,阴道给药tm ax明显滞后。达峰浓度以空腹口服给药最高,舌下含服次之,阴道给药最低。与空腹口服和舌下含服相比,阴道给药AUC最高,但个体差异较大。
- 吴高蕾裴开颜陈笑艳张逸凡钟大放贾孟春
- 关键词：米索前列醇给药途径液相色谱-串联质谱法药动学
- 兔抗大鼠LM23蛋白合成肽多克隆抗体的制备与初步应用被引量：2
- 2009年
- 目的制备大鼠精子发生相关蛋白LM23的合成肽多克隆抗体,对其特性进行初步鉴定,并对LM23多克隆抗体进行初步应用。方法利用生物信息学方法分析选择LM23蛋白的多肽序列。应用Fmoc法化学合成大鼠LM23蛋白N端第1～20和第274～291个氨基酸多肽(接近C端),经C18的RP-HPLC纯化后,通过高碘酸钠法,将纯化的LM23蛋白的多肽与KLH交联,免疫新西兰大耳白兔,获得LM23蛋白的多克隆抗体。用ELISA方法鉴定多克隆抗体效价。通过Western blot方法鉴定LM23多克隆抗体的特异性并研究LM23在大鼠睾丸中的表达;通过免疫组化方法研究LM23在大鼠睾丸组织和细胞中的定位。结果化学Fmoc法分别合成大鼠LM23蛋白N端第1～20,第274～291个氨基酸多肽,纯化后两条多肽纯度都达到90%以上,符合免疫用抗原标准。将多肽与KLH交联,用于免疫动物。经ELISA鉴定,两种多克隆抗体的效价分别达到1:64 000和1:128 000。应用大鼠睾丸组织切片进行LM23-18肽多克隆抗体的免疫组织化学研究,发现精母细胞有阳性颗粒反应,且LM23主要表达于细胞核。Western blot研究证实,LM23-18肽多克隆抗体可特异识别大鼠睾丸组织中相对分子量(Mr)约为36 kD的LM23蛋白。结论所制备的LM23合成肽多克隆抗体可用于ELISA、Western blot及免疫组化研究。LM23合成肽多克隆抗体的制备为进一步研究LM23的功能和作用机制提供了有力支持。
- 成毅明刘美玲石心泉王介东贾孟春
- 关键词：合成肽精子发生多克隆抗体
- Polycomb基因家族在大鼠精子发生过程中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的检测大鼠精子发生不同阶段细胞中Polycomb-group(Pc-G)家族在mRNA水平上表达是否有差异。方法提纯大鼠精子发生过程中的精原细胞、精母细胞、圆形精子细胞以及支持细胞,用荧光定量PCR方法检测Pc-G家族基因mRNA表达量。结果Pc-G基因家族中Ezh2、Eed、Bmi-1在精子发生中后期高表达;在各生精细胞中,YY1基因表达量低于支持细胞。结论Pc-G基因家族在精子发生各阶段细胞中特征性表达,与精子发生具有相关性,可能对精子发生分化和维持遗传稳定性都有重要的作用。
- 汪卓群鲁爽金孝华贾孟春石心泉马旭
- 关键词：精子发生
- Spyda基因过表达转基因小鼠品系的建立被引量：1
- 2014年
- 目的建立Spyda基因过表达转基因小鼠品系用于深入研究Spyda基因的功能。方法利用Gateway技术构建Spyda表达载体,通过DNA显微注射的方式获得Spyda基因过表达的首建鼠。首建鼠与野生型鼠杂交,所得子代中的阳性鼠同窝交配,已传3代以后的阳性小鼠经SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测外源基因的起始模板量,通过与杂合子比较来预测小鼠的基因型,再用传统育种方式验证SYBR Green实时荧光定量PCR的结果。结果获得7只首建鼠,通过与野生型鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,传至第3代,经实时荧光定量PCR方法筛选出4只纯合子的小鼠,经测交验证,其与正常小鼠交配所生的后代均为阳性,证明实时定量PCR的结果是正确的。建立了2个独立的Spyda转基因小鼠纯合子品系。结论建立了稳定遗传的纯合子Spyda基因过表达转基因小鼠品系,可作为工具鼠进一步深入研究Spyda基因的功能。
- 张瑶楠丁宁石心泉贾孟春刘美玲
- 关键词：转基因小鼠实时荧光定量PCR纯合子
- 精子发生过程中基因表达转录水平的调控被引量：8
- 2011年
- 哺乳动物精子发生于睾丸的生精小管,是一个高度复杂的细胞分裂和分化过程,涉及到错综复杂的基因表达调控过程,包括转录和转录后水平的调控,其中任何一个环节出错都可能导致雄性不育。因此,揭示精子发生过程中的分子调控机理,对发现新的男性避孕方法及治疗不育症有重要意义。文章重点综述了近年有关雄激素及其受体、雌激素及其受体、转录因子和染色质相关因子在精子发生转录水平调控的研究进展。
- 张秀军刘美玲贾孟春
- 关键词：精子发生转录调控转录因子
- 睾丸组织高表达基因PRKACG对细胞增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究睾丸组织高表达cAMP依赖蛋白激酶催化亚基γ(protein kinase,cAMP-dependent,catalytic,gamma,PRKACG)基因的功能,观察其对NF-κB信号通路的激活作用和促细胞增殖作用。方法采用双荧光素酶报告基因系统,利用体外培养的293T细胞,分析PRKACG对NF-κB信号通路的激活作用,并观察293T细胞的形态学,通过细胞计数和CCK8观察其对细胞生长和细胞增殖的影响。结果转染PRKACG的293T细胞相对于对照组转染PCMV-Sport 6的细胞体积变大、饱满、触角伸长;CCK8和细胞计数的结果显示,过表达PRKACG的293T的生长速度明显高于对照组Sport 6。结论 PRKACG能够激活293T细胞的NF-κB信号通路,并可促进细胞增殖,提示PRKACG可能是睾丸发育和精子发生过程中的一个功能基因。
- 宋亚娟孟雅楠刘青贾孟春张秀军
- 关键词：睾丸发育精子发生细胞增殖
- LM23基因沉默引起大鼠睾丸生精细胞凋亡被引量：3
- 2010年
- 目的研究LM23基因敲低后生精细胞的凋亡状况及与凋亡相关基因表达改变。方法用TUNEL方法检测睾丸细胞的凋亡情况,用大鼠全基因组表达谱芯片检测LM23基因敲低后凋亡相关基因的表达改变。结果 TUNEL结果显示,LM23基因敲低侧大鼠睾丸生精小管内大量生精细胞发生凋亡。大鼠全基因组表达谱芯片分析结果显示,许多促凋亡基因如Bcl-2家族的促凋亡基因表达上调,而抗凋亡基因如Faf1和Zfp91基因的表达明显下调。结论敲低大鼠的LM23基因,启动了Bcl-2家族介导的线粒体凋亡途径,引发了生精细胞发生大量凋亡。
- 石心泉贾孟春刘美玲
- 关键词：生精细胞细胞凋亡CASPASE-3
- 米非司酮配伍不同给药途径米索前列醇用于终止5周内妊娠的临床观察被引量：7
- 2011年
- 目的通过与常规药物流产方法进行对比分析，探讨400μg米索前列醇舌下给药用于早期流产的效果。方法2008年6月至2009年9月接收就诊于全国6个研究中心停经〈37d要求药物流产的受试者，随机分为两组：A组：第1天晨空腹服米非司酮50mg，8～12h后再服25mg，第2天按照第1天同样方法服用，首次服米非司酮后36～48h口服米索前列醇600μg；B组：第1天顿服米非司酮150mg，服药后36-48h舌下含服米索前列醇400μg。观察两组的流产效果。结果根据纳入及排除标准，共接收575例受试者，其中4例失访。A组完全流产267例（93．4%），失败16例；B组完全流产262例（91．0％），失败26例，两组比较差异无统计学意义（x^2=2．3846，P〉0．05）。约〉80％妇女有恶心、呕吐、头晕、乏力、头痛和乳胀的反应，两组副反应比较无显著性差异（P均〉0．05）。服药后两组出血分别为（9．08士3．49）和（9．04±3．43）d，差异无统计学意义（t=0．15，P〉0．05）。两组受试者满意度调查的有效问卷回收率为97．3％，对研究方法的满意率分别为88．1％（245／278）和92．0％（256／278），差异无统计学意义（P〉0．05）。结论400μg米索前列醇舌下用药用于早期流产可获得较好的效果，且副反应较少。
- 裴开颜邵文祺雷贞武李奕黄紫蓉马文侠经小平贾孟春
- 关键词：药物流产米索前列醇完全流产率副反应
- 大鼠精子发生过程中热休克蛋白70-2特异表达的研究被引量：5
- 2005年
- 目的运用蛋白质组学方法,寻找大鼠精子发生相关蛋白质,找到目标蛋白质后,进一步用免疫组织化学方法做定位研究。方法用重力沉降法(STAPUT法)从9 d龄雄性大鼠睾丸中分离出A型精原细胞,从成年的雄性大鼠睾丸中分离出粗线期精母细胞、圆形精子细胞。分别提取这3种细胞的总蛋白质,进行双向电泳。对所得双向电泳凝胶扫描,分析并找出差异蛋白质。对挑选出的差异蛋白质做质谱分析,发现在这3种不同细胞的表达上有明显差异的蛋白。进一步做睾丸免疫组织化学组织定位、定量研究。结果双向电泳结果显示,HSP70-2在粗线期精母细胞、圆形精子细胞中表达量较高, 在A型精原细胞则表达量极少。HSP70—2在粗线期精母细胞中表达量最大。用HSP70—2抗体对大鼠睾丸组织切片行免疫组织化学研究,发现粗线期精母细胞、Sertoli细胞、Leydig细胞有阳性颗粒反应。HSP70—2主要表达于细胞质。结论 HSP70—2在精子发生过程中有明显的差异表达,推测其对精子发生起重要调节作用。
- 成毅明石心泉于和鸣吴燕婉贾孟春
- 关键词：双向电泳精子发生质谱分析
