贺继刚
- 作品数：78 被引量：126H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金中国博士后科学基金更多>>
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- 过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞通过增强干细胞抗凋亡能力修复心肌梗死的初步探讨
- 通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠骨髓间充质干细胞构建过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞并加入基因开启剂DOX(强力霉素).将过表达GATA-4BMSCs+DOX,空载体-BMSCs+DOX,BMSCs...
- 贺继刚韩金秀李贝贝李宏远李洪荣撒亚莲严丹
- 关键词：心肌梗死免疫机制
- 过表达GATA-4骨髓间充质干细胞分泌的外泌体促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化被引量：5
- 2020年
- 背景:前期证明,过表达心脏基因转录因子GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞分泌的外泌体(BMSCs GATA-4-exosome)可以促进BMSCs向心肌样细胞分化,提示其可以修复心肌梗死,另外还发现BMSCs GATA-4-exosome中及心肌梗死局部心肌组织中有miRNA-673-5p明显高表达且功能涉及细胞分化,可能是BMSCs GATA-4-exosome修复心肌梗死的关键分子。目的:探讨BMSCs GATA-4-exosome促进BMSCs向心肌样细胞分化的分子调控网络。方法:在小鼠BMSCs培养体系内加入miRNA-673-5p模拟物(miR-673-5p-mimic)作为实验组(BMSCs miR-673-5p-mimic),将BMSCs GATA-4组、BMSCs GATA-4-空载体组、BMSCs组、BMSCs miR-673-5p-inhibitor组作为混杂因素对照组,提取各组分泌的外泌体与BMSCs直接共培养24 h,采用免疫荧光定性检测和RT-PCR定量检测各组BMSCs中心肌特异性分子α-actin、Desmin、cTnT、Cx43的表达。根据microRNA靶基因预测结果,采用Western blot检测miRNA-673-5p对应靶基因TSC-1、ERK1/2及Mef2c转录蛋白表达。结果与结论:BMSCs miR-673-5p-mimic-exosome+BMSCs组荧光强度最强,心肌细胞特异性分子α-actin、Desmin、cTnT、Cx43的表达最高(P<0.05),TSC-1的表达最低(P<0.05)。结果表明BMSCs GATA-4-exosome通过miRNA-673-5p抑制TSC-1蛋白表达促进BMSCs向心肌样细胞分化。
- 贺继刚王梓豪谢巧丽李洪荣严丹李永武
- 关键词：GATA-4外泌体骨髓间充质干细胞
- 三分支主动脉弓覆膜支架治疗I型主动脉夹层动脉瘤疗效观察被引量：1
- 2015年
- 目的探讨应用镍钛记忆金属三分支主动脉弓覆膜支架涤纶人工血管治疗I型主动脉夹层的临床疗效。方法60例I型主动脉夹层患者行手术治疗。术中放置三分支主动脉弓覆膜支架。结果本组患者无死亡。未出现脑损害症状，无喉返神经损伤。手术时间、体外循环时间、低体温下停循环时间、术后止血时间、术后心包、纵隔引流液比传统弓部人工血管置换术均明显减少。结论应用三分支主动脉弓覆膜支架涤纶人工血管治疗I型主动脉夹层动脉瘤效果确切，简化了术式，值得进一步推广应用。
- 贺继刚李洪荣桂龙升丁英龙沈振亚
- 关键词：外科手术
- 直视下冠脉结扎法制做小鼠心肌缺血模型初步探讨被引量：2
- 2013年
- 目的探讨如何成功建立心肌梗死小鼠模型,减少动物病死率。方法 39只C57BL/6小鼠,随机分为两组,实验组28只小鼠,对照组(即假手术组)11只小鼠。实验组采用直视下结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死,对照组小鼠除不结扎冠状动脉外,其余步骤同实验组。分析各操作过程中的细节问题对小鼠死亡率的影响。结果左前降支冠脉结扎成功率为100%。28只心肌梗死组小鼠,术中死于心室颤动和心跳呼吸骤停4只,术后7 d内死于心力衰竭2只,死于肺部感染2只,存活4周小鼠共20只,存活率为71.4%。11只假手术组小鼠全部存活。结论采用较常用的冠状动脉结扎制作心肌梗死模型的方法,并在手术过程中作了相应的改进,该方法操作简单、模型成功率高,结果可靠,为进一步研究心肌梗死,奠定了坚实的基础。
- 贺继刚沈振亚张东营藤小梅丁英龙
- 关键词：小鼠心肌梗死
- 过表达GATA-4骨髓间充质干细胞通过外泌体促进心肌细胞分化
- 贺继刚
- 过表达GATA-4骨髓间充质干细胞通过外排体修复心肌损伤的机制被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过分泌外排体(exosome)修复心肌损伤的机制。方法:构建过表达GATA-4的小鼠BMSCs并提取其分泌的exosome。而后将GATA-4-BMSCs-exosome与BMSCs共同培养,空载体-BMSCs-exosome与BMSCs共同培养,BMSCs-exosome与BMSCs共同培养、BMSCs单独培养及小鼠心肌细胞单独培养48h,采用Q-PCR定量检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)、α肌动蛋白(α-actin)、连接蛋白43(connexin 43)、结蛋白(Desmin)心肌特异性抗原表达量。再将过表达GATA-4BMSCs分泌的exosome与心肌细胞共培养,空载体-BMSCs分泌的exosome与心肌细胞共培养,BMSCs分泌的exosome与心肌细胞共培养及心肌细胞单独用于低氧培养无血清培养诱导细胞凋亡作为阳性对照培养48h诱导细胞凋亡。采用流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率。进一步采用TMT标记定量蛋白质组学分析过表达GATA-4小鼠BMSCs分泌exosome内有关细胞分化及抗凋亡的蛋白。结果:Q-PCR显示:过表达GATA-4-BMSCs分泌的exosome可以有效促进BMSCs向心肌细胞转化并具有极强的抗凋亡能力。蛋白质谱提示有8个蛋白有关细胞分化。有6个蛋白有关细胞调亡。其中Slit homolog 2protein及Connective tissue growth factor蛋白既涉及细胞凋亡又涉及细胞分化。结论:过表达GATA-4-BMSCs分泌的exosome可以促进BMSCs向心肌细胞分化并具有抗凋亡能力。Slit homolog 2protein及Connective tissue growth factor蛋白既涉及细胞凋亡又涉及细胞分化。
- 贺继刚韩金秀李贝贝李宏远李洪荣撒亚莲严丹
- 关键词：GATA-4EXOSOME小鼠骨髓间充质干细胞
- 过表达IDO间充质干细胞的分泌外泌体在心脏移植存活中作用
- 贺继刚撒亚莲李洪
- 器官移植已成为临床治疗终末器官功能衰竭有效手段。但移植后的免疫抑制药物严重副作用使患者生活质量无法改善。该实验正是基于上述社会背景下，试图寻找到一种有效的生物免疫抑制方法。
一、主要研究内容、科学发现点：
1.体外实...
- 关键词：
- 关键词：心脏移植器官移植
- 过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞通过分泌外泌体增强其抗凋亡能力的研究被引量：3
- 2018年
- 目的探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)是否通过分泌外泌体(Exosome)增强其细胞抗凋亡能力,进而提高心肌梗死后心功能。方法 2017年1—12月选取健康4周龄SPF级C57BL/6小鼠45只,通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs构建过表达GATA-4小鼠BMSCs并加入基因开启剂强力霉素(DOX),而后采用Exo Quick-TC提取BMSCs分泌的Exosome,并检测Exosome纯度、电镜下观察其形态。体外实验:与过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome共同培养的心肌细胞为A组(体外),与空载体BMSCs分泌的Exosome共同培养的心肌细胞为B组(体外),与BMSCs分泌的Exosome共同培养的心肌细胞为C组(体外),低氧(1%)无血清条件下培养的心肌细胞为D组(体外),正常条件下单独培养的心肌细胞为E组(体外),各组均培养48 h,后采用流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡率,采用Western blotting法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、细胞色素C表达水平。体内实验:选取12只小鼠建立心机梗死模型,造模成功48 h后经尾静脉注射80 000μg的Exosome,其中A组(体内)注射过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome,B组(体内)注射空载体BMSCs分泌的Exosome,C组(体内)注射BMSCs分泌的Exosome,另取3只心肌梗死未处理小鼠作为D组(体内),3只正常小鼠作为E组(体内)。于注射Exosome后48 h采用心脏超声仪(PHILIPS EPIQ 7C)评估各组小鼠心功能。完成心脏彩超后采用原位免疫组化法评估心肌梗死小鼠心脏凋亡细胞数量。结果 Exosome表达量为0.272 5,Exosome纯度为5.25×108个,电镜可见Exosome大小40~100 nm。A组(体外)细胞凋亡率低于B组(体外)、C组(体外)、D组(体外),但高于E组(体外)(P<0.05)。A组(体外)Caspase 8、细胞色素C表达水平低于B组(体外)、C组(体外)、D组(体外)及E组(体外)(P<0.05)。A组(体内)小鼠射血分数(EF)、环比收缩(FS)前后差值高于B组(体内)、C组(体内)、D组(体内)及E组(体内)(P<0.05)。A组(体内)小鼠心肌细
- 贺继刚李贝贝韩金秀李洪荣撒亚莲严丹杨晓华
- 关键词：干细胞外泌体
- 罕见官颈型主动脉弓(Cervica1 aortic arch)两例报道
- 贺继刚李洪荣桂龙升李永武严丹王平
- 小鼠骨髓间充质干细胞亚群向心肌样细胞分化实验研究
- 贺继刚李洪荣桂龙升李永武
- 主要研究内容：该项目利用小鼠心肌干细胞表面分化抗原对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行筛选，得到4个亚群细胞，发现SCA-1+/CD31+/CD45+亚群细胞更易向心肌细胞分化，具有更强的抗凋亡、归巢及动员心肌干细胞...
- 关键词：
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌损伤
