贺番
- 作品数:26 被引量:64H指数:5
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- β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制
- 猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道。为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作...
- 贺番凌理军廖亚金李素韩文赵碧波孙元仇华吉
- 关键词:猪瘟病毒酵母双杂交E2蛋白Β-ACTIN
- 文献传递
- 奶牛乳房炎克雷伯氏菌的分离鉴定被引量:3
- 2015年
- 奶牛乳房炎又名奶牛乳腺炎,是由病原微生物感染而引起乳房组织及乳头发炎的一种疾病,也是奶牛场最常见、防治最困难、花费成本最高的一种疾病,该病不仅影响产奶量和牛奶的品质,而且危及人的饮用安全,给我区的奶业造成巨大的经济损失。克雷伯氏杆菌是乳房炎的主要病原菌之一。本试验对乌兰察布市周边某小区奶牛养殖场中患乳房炎病牛的乳汁中进行了病原菌的分离,得到4株菌,分别编号为K1、K2、K3、K4。通过对它们的培养特性、形态以及染色特征的观察和对其进行生化特性的检测,以及进一步经动物实验鉴定表明这4株菌中有3株为克雷伯氏杆菌,通过上述微生物学诊断方法,表明该奶牛养殖场本次奶牛的乳房炎是与克雷伯氏杆菌感染有关,进一步的药敏试验表明该分离菌对庆大霉素最敏感,应将庆大霉素定为首选药物,其次是链霉素、头孢唑啉,该菌对青霉素耐药。
- 贺番贺瑜孟宁生陈宇浩
- 关键词:克雷伯氏菌
- 禽流感病毒非结构蛋白NS1的分子生物学特性与功能被引量:6
- 2007年
- 禽流感严重威胁着世界养禽业及人类健康。随着对流感病毒研究的逐渐深入,人们己经从对流感病毒结构蛋白的研究转移到对非结构蛋白即NS1蛋白的研究上来。研究发现流感病毒的NS1蛋白与流感病毒所诱导的细胞凋亡之间存在一定的联系,其对凋亡的调节作用与流感病毒感染的细胞是否产生干扰素及其所感染的细胞系直接相关。NS1蛋白能够抑制病毒感染细胞干扰素的产生,在流感病毒颉颃干扰素的抗病毒效应中发挥了重要的作用。随着疫苗的广泛使用,无法区分野毒感染和疫苗免疫的禽群,干扰了禽流感的诊断,掩盖了禽流感的流行,增加了禽流感的预防难度。NS1蛋白作为流感病毒的非结构蛋白,具有高度的保守性,在临床应用中作为鉴别诊断免疫禽和自然感染禽的检测抗原具有广阔前景。
- 贺番曹瑞兵郝永清
- 关键词:禽流感病毒
- A型禽流感病毒非结构蛋白基因NS1的原核表达及间接ELISA方法的建立
- 禽流感严重威胁着世界的养禽业及人类的健康。许多国家采用多种疫苗来控制和消灭禽流感。随着疫苗的广泛使用,无法区分野毒感染和疫苗免疫的禽群,干扰了禽流感的检疫及其流行病学调查,掩盖了禽流感的流行,增加了禽流感的预防难度。研究...
- 贺番
- 关键词:禽流感病毒非结构蛋白原核表达
- 文献传递
- 一种制备复制缺陷型重组水疱性口炎病毒新方法的建立被引量:1
- 2010年
- 为了提高复制缺陷型重组水疱性口炎病毒(VSV△G*G)的制备效率,对传统制备方法进行了改良,在制备过程中先用VSV△G*G转导细胞1h后,再对其进行转染,24h后收集细胞上清并进行毒价测定。并与用传统方法制备的重组病毒的毒价进行比较,结果表明,用改良方法与传统方法制备的重组病毒具有相同的毒价,但改良方法比传统方法节省了20~48h,同时减少了表达的G蛋白诱导细胞融合所造成的细胞损伤。表明改良方法能够代替传统方法制备出高毒价的复制缺陷型重组病毒。
- 贺番葛金英郝永清仇华吉
- 关键词:转染转导
- 稳定表达T7RNA聚合酶PK-15细胞系的建立被引量:2
- 2011年
- 为构建稳定表达T7RNA聚合酶(RNAP)的猪肾细胞系(PK-15),本研究采用PCR方法,以E.coliBL21(DE3)细菌基因组为模板扩增T7RNAP基因,将其克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-T7。采用脂质体将pLXSN-T7转染至PT67细胞中,经G418筛选培养获得重组逆转录病毒rMLV-T7,将其接种于PK-15细胞进行G418加压筛选和纯化;应用PCR、间接免疫荧光试验及T7启动子控制下的红色荧光蛋白的重组表达质粒(pET-RED)进行瞬时表达,检测T7RNAP的表达及活性,结果表明筛选所得的细胞系PK/T7的不同代次均具有转录活性。本研究建立稳定表达T7RNAP的细胞系PK/T7,为实现细胞内T7启动的转录和猪源RNA病毒等的反向遗传操作提供了有效的方法。
- 黄俊华贺番孙元张鑫常天明李宏宇仇华吉
- 关键词:逆转录病毒载体稳定细胞系
- 猪瘟病毒E2蛋白与猪RACK1相互作用的鉴定被引量:3
- 2012年
- 为筛选和鉴定与猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白相互作用的猪宿主蛋白,我们采用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞表达文库得到与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞RACK1蛋白,经共转化试验和GST pull-down试验进一步证实两者可以特异性结合,并且共聚焦试验表明两者共定位于细胞的细胞浆。本研究显示E2蛋白与宿主细胞RACK1蛋白存在相互作用,RACK1在CSFV感染过程中所发挥的功能有待进一步研究。
- 凌理军李素董泓贺番冯烁廖亚金申梁孙元翁长江仇华吉
- 关键词:猪瘟病毒酵母双杂交E2蛋白RACK1相互作用
- 猪瘟病毒囊膜蛋白E2的锚定序列部分缺失对其在细胞内表达的影响被引量:1
- 2010年
- 为了将猪瘟病毒(CFSV)的囊膜蛋白表达在细胞表面,本研究根据与CSFV同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的囊膜蛋白E2锚定序列,推测出CSFV的E2锚定序列。利用生物信息学软件对CSFV的E2锚定序列进行分析、建模与部分缺失,构建成4种不同的表达CSFV囊膜蛋白EmsE1E2的片段。将以上4种片段分别连接到真核表达载体pCAGGS中,转染幼仓鼠肾(BHK21)细胞,利用抗E2蛋白的单克隆抗体对表达蛋白进行westernblot检测与间接免疫荧光(IFA)检测,研究结果表明:跨膜区中锚定序列的部分缺失会降低E2在细胞内的表达,为猪瘟伪型病毒的研制提供了实验依据。
- 贺番王靖飞郝永清仇华吉
- 关键词:猪瘟病毒分子模拟技术
- 基于高通量测序技术分析家兔感染猪瘟兔化弱毒株后脾脏的转录组学变化被引量:9
- 2016年
- 本研究基于高通量测序技术对感染猪瘟兔化弱毒株(C株)后0h,12h,24h,30h,36h,48h的家兔脾脏组织进行测序,以家兔基因组作为参考,筛选感染后各时间点和对照组(0h)之间的差异基因。利用Uniprot和NCBI数据库查找各组中变化水平显著的前10个差异基因的生物学功能。结果发现,感染后12h,24h,30h的前10个差异基因只有少数与炎症、免疫、凋亡等相关;感染后36h,48h的前10个差异基因完全相同,其中B2M、RLA-DR-ALPHA、CD74和IGJ参与抗病毒过程。GO功能注释结果显示:感染后各时间点的差异基因都和免疫、代谢、调控途径紧密相关。KEGG通路富集分析发现,感染后24h的差异基因富集到RIG-I样受体信号通路,感染后30h的差异基因富集到黏着斑和细胞外基质-受体相互作用通路,感染后36h和48h的差异基因共同富集到的通路有20个,其中蛋白酶体,溶酶体,核糖体,趋化因子信号通路,B细胞受体信号通路,抗原加工提呈通路和FcγR介导的吞噬通路与抗病毒相关。本研究建立的家兔感染C株后脾脏组织的差异表达基因数据库,将为进一步阐述家兔适应C株的分子机制奠定基础。
- 侯玉臻赵丹彤刘国英贺番刘斌付绍印郝永清张文广
- MEK2与猪瘟病毒E2蛋白的相互作用及其对猪瘟病毒复制的调控作用
- 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fevervirus)引起的一种烈性传染病。E2为CSFV主要结构蛋白,在介导CSFV感染宿主细胞方面发挥重要作用。...
- 廖亚金李素贺番李丹孙元罗玉子仇华吉
- 关键词:猪瘟病毒E2蛋白Β干扰素
- 文献传递