谢雅晶
- 作品数：61 被引量：75H指数：4
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 利用基因工程抗体建立的新型双抗夹心ELISA法检测Cry1Ac毒素被引量：1
- 2014年
- 为明确新型双抗夹心ELISA方法检测Cry1Ac毒素的效果,分别用纯化后的抗Cry1Ac单链抗体和anti-Cry1Ac兔多克隆血清(Anti-Cry1Ac-PAbs)作为捕获抗体和检测抗体,通过方阵滴定确定其最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA法。再用优化后的双抗夹心ELISA方法对检测Cry1Ac毒素的敏感性、特异性和回收率进行鉴定。结果表明,新型双抗夹心ELISA法最低检测限为0.91 ng/ml,线性检测范围为1.04 ng/ml^3.49μg/ml。5种稻米中Cry1Ac毒素的平均回收率为69.42%~87.95%,变异系数为1.19%~6.50%。
- 张留圈张霄张霄徐重新刘媛谢雅晶徐重新寇莉萍张存政
- 关键词：基因工程抗体
- 抗Bt(Cry1B)毒素单链抗体在sf9昆虫细胞中的表达及活性测定被引量：1
- 2013年
- 通过构建pFastBacTM HT-A-scFv重组质粒,并将重组质粒化转DH10BacTM Escherichia coli感受态细胞,进行蓝白斑筛选,获得阳性克隆.PCR和基因测序检测证实挑取的白斑阳性单克隆存在完整、正确的单链抗体基因.提取阳性克隆中的重组杆状病毒穿梭载体（Bacmid-scFv）侵染sf9昆虫细胞,细胞发生明显病变特征.通过SDS-PAGE、Western blotting和间接竞争性ELISA等方法检测,发现单链抗体在sf9昆虫细胞中表达成功,测得纯化后蛋白浓度为103.000 0 μg/ml,Cry1B毒素对单链抗体的抑制中浓度（IC50）为1.010 0 μg/ml,最低检测线IC10为0.011 3μg/ml,线性检测范围为0.500 0～10.000 0 μg/ml.可溶性scFv对抗原类似物无交叉反应.
- 徐重新张霄张存政刘媛谢雅晶黄鹰刘贤金
- 关键词：单链抗体真核表达系统酶联免疫分析
- 一种广谱识别小菜蛾中肠受体的抗Cry2Aa独特型单域抗体及其应用
- 本发明涉及一种广谱识别小菜蛾中肠受体的抗Cry2Aa独特型单域抗体及其应用，该单域抗体是以胃蛋白酶酶切Bt Cry2Aa毒素兔多克隆抗体获得的抗原结合片段F(ab’)<Sub>2</Sub>和小菜蛾中肠受体蛋白作为包被原...
- 林曼曼刘媛张霄徐重新谢雅晶仲建锋胡晓丹陈蔚刘贤金
- 一种模拟Bt Cry毒素共性结构和功能的多肽及其编码基因与应用
- 本发明提供一种具备模拟Bt Cry毒素抗虫蛋白共性结构的多肽及其编码基因与应用，该多肽核苷酸序列、氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；该多肽能与Bt Cry毒素靶标害虫棉铃虫钙黏蛋白受体特...
- 徐重新刘媛金嘉凤沈成陈蔚胡晓丹谢雅晶张霄朱庆
- 一种改进的人源模拟Bt Cry毒素蛋白功能效应物(GGCC)及其设计方法与应用
- 本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白、编码基因及其设计方法和应用，属于基因工程和生物防治领域。本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白GGCC_scFv，所述人源分子改造杀虫蛋白GGCC_scFv的氨基酸序列如SEQ ID ...
- 刘贤金谢雅晶张霄徐重新何鑫高美静刘媛张存政
- 文献传递
- 一种具有杀虫活性的猪源化改型抗体及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种具有杀虫活性的猪源化改型抗体及其制备方法与应用，通过生物信息学预测猪源化抗体重、轻链可变区的8个FR，并植入抗独特型单链抗体A12的6个CDR来确定猪源化改型抗体的序列，进行人工合成，从而构建A12的猪源化...
- 刘贤金仲建锋张霄刘媛何鑫胡晓丹武爱华徐重新谢雅晶梁晓林曼曼
- 文献传递
- 一种人源抗虫基因B1F6及其编码的蛋白质B1F6和应用
- 本发明提供了一种人源抗虫基因B1F6及其编码的蛋白质和应用，属于基因工程和生物防治领域，所述人源抗虫基因B1F6的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述抗虫蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；本发明提供...
- 刘贤金胡晓丹张霄刘媛仲建锋谢雅晶徐重新林曼曼高美静卢莉娜朱庆陈蔚
- 文献传递
- 一种人源分子改造杀虫蛋白、编码基因及其设计方法与应用
- 本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白及其制备方法与应用，属于基因工程和生物防治领域。本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白，所述杀虫蛋白CCL‑CCL_scFv的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述杀虫蛋白CCL‑...
- 刘贤金谢雅晶徐重新张霄高美静何鑫刘媛张存政
- 文献传递
- 抗Cry1F毒素单链抗体的筛选及初步应用被引量：1
- 2015年
- 对扩增的Tomlinson I噬菌体抗体库进行3轮特异性富集,挑取单菌落,采用ELISA、PCR及测序比对分析鉴定阳性噬菌体单链抗体(sc Fv);以宿主替换的方式将阳性噬菌体sc Fv基因导入Escherichia coli HB2151中进行可溶性表达,sc Fv过柱纯化后,建立针对Cry1 F毒素的IC-ELISA检测方法。以Cry1 B、Cry1 C、Cry1 Ab、Cry1 Ac作为竞争抑制物,分析sc Fv的特异性,以Cry1 F毒素在玉米中的添加回收试验评价检测方法的实用性。结果显示,从第3轮富集库中筛选到了11株具有Cry1F毒素结合活性的噬菌体sc Fv菌株,经PCR鉴定都含有目的条带,对其中2株(H1、G9)进行测序,证实为人源化的sc Fv。选取G9号阳性噬菌体sc Fv进行可溶性表达,纯化后收集到的sc Fv浓度为256μg/ml。建立的IC-ELISA检测方法检测灵敏度(IC10)为5.99 ng/ml,抑制中浓度(IC50)为0.410μg/ml,线性检测范围(IC20~IC80)为0.107~0.713μg/ml。sc Fv(G9)对Cry1B、Cry1C具有一定结合活性,交叉反应率分别达到了20.92%和15.59%,但不识别Cry1Ab和Cry1Ac,交叉反应率均低于0.1%。添加回收试验结果表明,基于sc Fv(G9)建立的IC-ELISA检测方法稳定性和重复性都比较好。
- 徐重新张存政何鑫张留娟张霄仲建锋刘媛谢雅晶刘贤金
- 关键词：苏云金芽孢杆菌单链抗体酶联免疫分析
- 食品中金黄色葡萄球菌检测及防控技术研究被引量：14
- 2019年
- 金黄色葡萄球菌是威胁食品质量安全的重要生物污染物。本文在分析金黄色葡萄球菌主要生物危害风险的基础上,重点梳理了食品领域针对其检测和防控的研究现状,并结合最新研究成果,深入探讨了食品领域金黄色葡萄球菌检测和防控技术可能的创新思路。
- 徐重新陈蔚谢雅晶林曼曼胡晓丹刘贤金
- 关键词：金黄色葡萄球菌食品防控技术
