谢池楚
- 作品数:12 被引量:19H指数:3
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 缺失突变的chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用
- 一种缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法,经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子序列——chiBp△135,如序...
- 陈月华罗洋谢池楚李蓬飞蔡峻
- 文献传递
- 一株抑真菌、对甜菜夜蛾高效的苏云金芽胞杆菌菌株被引量:3
- 2008年
- 为了扩大苏云金芽胞杆菌的杀虫谱及生防范围,通过抑真菌和杀虫生物活性测定,筛选到一株抑真菌并对甜菜夜蛾高效的菌株Bt519-1。此菌株对所测试的小麦赤霉、黄瓜灰霉等8种真菌都有不同程度的抑制作用,且完全抑制这些真菌孢子的萌发。通过室内生物测定发现该菌株对甜菜夜蛾具有很高的杀虫活性,半致死浓度(LC50)仅为5.5μg/mL。经特异引物检测,证明该菌株含有6种杀虫蛋白基因:cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1I、cry2和vip3A。经SDS-PAGE分析,Bt519-1菌株分别产生分子量大约为135 kD~130 kD、95 kD、80 kD、70 kD和65 kD~60 kD的几种杀虫晶体蛋白。在有无几丁质的培养基中都能产生较高活性的几丁质酶。试验证明苏云金芽胞杆菌Bt519-1是一株既杀虫又拮抗真菌的多功能生防菌株。
- 韩苗苗肖亮蔡峻谢池楚陈月华
- 关键词:苏云金芽胞杆菌拮抗甜菜夜蛾棉铃虫
- 组成型表达chi基因的Bt工程菌株构建及其特性被引量:1
- 2014年
- 【目的】通过构建能够组成型高效表达几丁质酶的苏云金芽胞杆菌工程菌株,以提高其抑真菌活性。【方法】首先通过PCR扩增获得Bti75菌株chiB全长及系列缺失启动子片段,与本室构建的启动子探测型载体pCB连接,转化Bti75菌株,通过β-半乳糖苷酶活性检测及β-半乳糖苷酶mRNA的Real time-PCR检测,确定了一段长度为190 bp的组成型高效表达启动子。将这一启动子分别与Bti75自身几丁质酶基因chiA以及地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)的几丁质酶基因chiMY连接构建了组成型高效表达的工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)。应用几丁质酶酶活检测、SDS-PAGE及酶谱分析检测了工程菌几丁质酶的表达情况。最后,通过检测工程菌发酵粗酶液对真菌孢子萌发和菌丝生长的影响,评估了工程菌对3种植物病原真菌的抗真菌活性。【结果】在没有诱导物存在的情况下,Bti75(pBPΔ7)菌株表达的β-半乳糖苷酶酶活和β-半乳糖苷酶mRNA的转录量分别是Bti75(pBP)菌株的7倍和2.5倍左右。在没有几丁质诱导的情况下,与野生株Bti75相比,工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)的几丁质酶活性均提高了3.5倍左右。SDS-PAGE及酶谱分析证明目的几丁质酶在非诱导条件下达到组成型高效表达,抑真菌实验显示工程菌Bti75(pDA)和Bti75(pDM)抑制3种植物病原真菌的活性明显提高。【结论】发现190 bp的缺失启动子能够组成型高效表达不同来源的几丁质酶,无需诱导物的诱导,工程菌株就能展现良好的抗真菌能力。
- 李蓬飞罗洋谢池楚蔡峻边强陈月华
- 关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶组成型表达
- 细菌几丁质酶基因的表达调控被引量:6
- 2011年
- 几丁质酶可以降解几丁质,广泛存在于各类微生物中。几丁质的降解产物几丁寡糖在医药、食品及农业生防领域有很重要的应用价值及广泛的应用前景。细菌在利用几丁质时,需要先分泌几丁质酶,将几丁质降解成几丁寡糖或单体,再通过特异的转运系统送进细胞而被利用。胞内的几丁质降解产物作为特定的信号分子,可以激活或阻遏相应chi基因的转录,从而影响细菌几丁质酶的合成。在各种调节蛋白及应答元件的参与下,细菌几丁质酶的合成受到精密的控制。文章以链霉菌和大肠杆菌为代表综述了细菌在转运系统和基因表达两个层面上控制几丁质酶合成的最新研究进展。
- 谢池楚贾海云陈月华
- 关键词:细菌几丁质酶基因转运系统
- 苏云金芽胞杆菌几丁质酶的表达调控
- 苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(简称Bt)除了能够形成杀虫晶体蛋白外,也普遍产生几丁质酶.该酶不但可以增效Bt的杀虫活性,还能有效抑制真菌的生长.研究发现多数Bt菌株的几丁质酶能够组成型表达,...
- 曹张磊姜昆谢池楚李丽娜潘锦华蔡峻
- 关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶生物合成基因调控
- 一株杀虫、抑真菌的苏云金芽孢杆菌菌株及其应用
- 一株杀虫、抑真菌的苏云金芽孢杆菌菌株及其应用。本发明菌株为苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis 519-1,简称Bt 519-1,保藏号CGMCC No.2327,该菌株携带有杀虫蛋白编码基因cry1...
- 陈月华韩苗苗蔡峻谢池楚肖亮刘东
- 文献传递
- 苏云金芽胞杆菌几丁质酶基因调控元件的鉴定和功能分析
- 几丁质酶在工业、农业、医药及生物防治等方面具有重要的作用和应用价值。重要的生防细菌苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)也能产生几丁质酶。由于几丁质酶不但可以抑制真菌生长,还有明显的杀虫...
- 谢池楚
- 关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶基因启动子调控元件
- 缺失突变的chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用
- 一种缺失突变的几丁质酶编码基因<I>chiB</I>启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法,经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因<I>chiB</I>启动子序列...
- 陈月华罗洋谢池楚李蓬飞蔡峻
- 苏云金芽胞杆菌几丁质酶的基础表达及诱导合成的多态现象
- 多数微生物可以产生几丁质酶。而一般认为几丁质酶基因表达受几丁质的诱导和葡萄糖抑制。但是苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(简称Bt)几丁质酶的诱导表达方式是否与其他微生物相同,至今尚无定论。本文采...
- 谢池楚蔡峻刘传陈月华
- 关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶
- 文献传递
- 一株杀虫、抑真菌的苏云金芽孢杆菌菌株及其应用
- 一株杀虫、抑真菌的苏云金芽孢杆菌菌株及其应用。本发明菌株为苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis 519-1,简称Bt 519-1,保藏号CGMCC No.2327,该菌株携带有杀虫蛋白编码基因cry...
- 陈月华韩苗苗蔡峻谢池楚肖亮刘东
- 文献传递