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米糠谷蛋白提取工艺的优化及其亚基组成分析被引量：4: 2014年; 目的优化米糠谷蛋白提取工艺,并分析其亚基组成。方法以温度、NaOH浓度、时间和液料比为响应因子,以米糠谷蛋白提取率为响应值,利用Design Expert软件,采用中心组合实验Box-Behnken设计方案,制作响应曲面图,并分析米糠谷蛋白的亚基组成。结果米糠谷蛋白的最佳提取工艺为:提取温度55℃,NaOH浓度0.03 mol/L,时间46 min,液料比16∶1;模型预测米糠谷蛋白提取率为18.83%,实际得率为18.37%;米糠谷蛋白由相对分子质量约52 350、35 960、19 420和13 980的4个亚基组成,其中相对分子质量约35 960的亚基含量最高。结论实际结果与模型相符,表明拟合方程可靠,能够得到较高提取率的米糠谷蛋白。; 王长远许凤; 关键词：米糠谷蛋白响应面法

超声时间对米糠蛋白理化和功能特性的影响被引量：9: 2014年; 研究超声处理时间对米糠蛋白（RBP）理化功能特性的影响.分别探讨了不同超声时间对米糠蛋白溶解性、乳化性、起泡性、表面疏水性、游离巯基及亚基组成的影响.结果表明,经过超声处理后的RBP的溶解性由25.52％增加到79.23％～ 83.88％;超声45 min时,乳化性和起泡性比对照组分别提高了82.28％和36.12％;超声30 min时,表面疏水性达到最大;随着超声时间的延长,游离巯基的含量呈先增加后减小趋势;还原与非还原SDS-PAGE结果显示,不同超声时间对RBP的亚基组成无影响.说明适当的超声处理能够在不影响蛋白一级结构的情况下改善RBP的理化功能特性.; 王长远许凤张敏; 关键词：超声米糠蛋白理化特性功能特性

响应面优化碱性蛋白酶酶解米糠球蛋白工艺的研究被引量：1: 2014年; 以米糠为原料,参照Osborne连续提取法获得米糠球蛋白,为改善球蛋白的溶解性,用碱性蛋白酶进行酶解,并对工艺进行优化。以溶出率为评价指标,底物质量分数、酶解pH值、酶解温度和酶解时间为变量,通过Box-Behnken中心组合设计试验和响应面分析,得出最佳酶解条件为酶浓度20 000 U/g,底物质量分数4.42%,酶解pH值8.19,酶解温度52.08℃和酶解时间2.15 h;在此条件下获得米糠球蛋白水解产物的溶出率高达89.64%,比原米糠球蛋白的NSI值高出64.35%。; 王长远许凤程皓; 关键词：酶解碱性蛋白酶

乳酸乳球菌表面表达Brazzein甜味蛋白系统的建立被引量：2: 2014年; 参照甜味蛋白Brazzein基因序列,结合乳酸乳球菌的密码子偏嗜性的相关分析,对甜味蛋白Brazzein基因进行改造,将第29位天冬氨酸、31位的组氨酸和第41位的谷氨酸分别突变为赖氨酸、丙氨酸和赖氨酸,以期提高目的蛋白的甜度。采用重叠PCR的方法合成目的基因,目的片段亚克隆到pMD18-T载体上。经序列测定分析后,目的片段克隆入分泌表达载体pNZ8112,电转化乳酸乳球菌中,构建成表面展示表达甜味蛋白Brazzein的乳酸乳球菌表达系统。; 王长远许凤沈冰蕾于长青姚笛; 关键词：甜味蛋白 BRAZZEIN 乳酸乳球菌

响应面法优化物理辅助碱法提取米糠蛋白工艺被引量：31: 2014年; 比较分析碱法、胶体磨辅助碱法、超声辅助碱法、胶体磨超声辅助碱法对米糠蛋白提取率及纯度的影响。结果表明,胶体磨超声辅助碱法能够显著提高米糠蛋白的提取率,其纯度为74.27%。并以此方法中的超声功率、液料比、超声温度、超声时间为考察因素,蛋白提取率为响应值。通过Design Expert 8.0.6软件做响应面优化分析得,胶体磨超声提取米糠蛋白的最佳工艺为米糠粒径40目、pH 9、超声功率69 W、工作时间4 s、间歇时间2 s、液料比20∶1(mL/g)、超声时间40 min、超声温度46℃,此条件下模型预测蛋白提取率为92.14%。经验证,实际提取率为90.84%,与模型相符。胶体磨超声辅助碱法能够显著地提高米糠蛋白的提取率,且时间短,为米糠蛋白的进一步研究提供参考。; 许凤王长远; 关键词：米糠蛋白提取率

pH处理对米糠蛋白理化特性及结构的影响被引量：7: 2015年; 目的分析pH处理对米糠蛋白理化特性及结构的影响。方法制备米糠蛋白,经不同pH值的缓冲液处理后,分别采用福林酚法、ANS荧光探针法、DNTB法、荧光光谱法、SDS-PAGE法检测米糠蛋白的溶解性、表面疏水性、游离巯基含量、蛋白质三级结构和亚基组成。结果 pH为4、6时,米糠蛋白的溶解性最低;而pH<4和pH>6时,米糠蛋白的溶解性均有不同程度的升高,且在碱性条件下,米糠蛋白的溶解性比在酸性环境中更好。米糠蛋白的溶解性与表面疏水性、游离巯基含量呈正相关。pH处理对米糠蛋白的荧光光谱有一定影响,使其微环境发生了变化。在酸性环境中,米糠蛋白的亚基组成有明显变化,高相对分子质量的亚基解聚为低相对分子质量的亚基;而中性及碱性环境对米糠蛋白的亚基组成无影响。结论本实验分析了pH处理对米糠蛋白溶解性、表面疏水性、游离巯基、荧光光谱和亚基组成的影响,为米糠蛋白在食品工业中的应用提供了参考。; 王长远全越许凤张敏; 关键词：米糠蛋白 PH值理化特性

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许凤