袁皓加
- 作品数：12 被引量：26H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 甲胎蛋白胶体金检测试剂的的研制被引量：12
- 2002年
- 为建立一种快速、简易胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测血清中的甲胎蛋白 (AFP) ,将AFP单克隆抗体分别标记胶体金并包被硝酸纤维素膜 ,制成免疫检测层析试剂。血清中的AFP与金标记抗体结合 ,沿着硝酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相抗体结合可形成肉眼可见的紫红色线条。此检测试剂对本室自制AFP参比品进行了检测 ,灵敏度达 2 0ng/ml;对甘肃省肿瘤医院的 176份癌症患者血清进行了检测 ,结果与ELISA法相一致。本法检测AFP快速、简便、结果准确 。
- 张正雷张云涛缑宇虹袁皓加张甲菊曹咏梅杨宗模
- 关键词：甲胎蛋白ELISA胶体金免疫层析法肝癌
- 沙门氏菌单克隆抗体研究 Ⅰ.杂交瘤细胞系的建立被引量：3
- 1990年
- 用沙门氏菌O,H,Vi抗原免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术,获得分泌抗沙门氏茵0-2,4,7,8,9,3,10,11和H-a,b,c,d,i及Vi抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系29株。所产生的抗体17株属IgM,7株为IgG3,3株为IgG1,1株为IgG_(2a),1株未测;轻链除3株为λ链外,其余为κ链。将杂交瘤细胞所诱生的腹水,组成一套(11种)沙门氏菌诊断用单克隆抗体试剂,经用沙门氏菌属和其它肠道菌属的代表菌株作鉴定,证明具有良好的特异性和敏感性、可供初步诊断伤寒,副伤寒和鼠伤寒用。与目前常规生产的家兔诊断血清相比,具有简化生产过程,节约家兔与培养基及省时省力等优点,值得在生产上和使用上推广。
- 蔡玲民吴采菲赵红陈翠萍刘新铭高鸿瑞袁皓加张河战马越辜清吾
- 关键词：沙门氏菌杂交瘤单克隆抗体
- 职业献血员中庚型肝炎病毒感染状况的分析
- 2002年
- 为了解职业献血员中庚型肝炎病毒 (HGV)的感染状况 ,应用ELISA法和RT PCR法进行检测。在 10 0 6 9名职业献血员中有 5 16例抗 HGV阳性 ,总感染率为 5 .12 % ,其中男性感染率 5 .79%、女性感染率 4 .4 5 % ;甘肃省感染率 4 .96 %、宁夏区感染率 5 .70 %、青海感染率 5 .6 7%以及陕西感染率 4 .91% ;年龄 18～ 2 5岁的感染率 4 .4 8%、2 6～35岁感染率 4 .87% ;36～ 4 5岁感染率 6 .90 % ;将抗 HGV阳性作RT PCR、HBsAg、抗HCV检测 ,其中HGV RNA阳性36 2例、HBsAg阳性 2 5例、抗HCV阳性 37例、HBsAg和抗 HCV阳性 8例。以上说明 ,在职业献血员中 ,HGV的感染与性别、地域及年龄无关 ,与HBV。
- 席仲兴张云涛彭林峰贾晓莉张雯张正雷袁皓加
- 关键词：职业献血员庚型肝炎病毒感染状况ELISART-PCR
- 人心肌型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体的制备及定量检测试剂盒的研制
- 2013年
- 目的：利用抗心肌型脂肪酸结合蛋白单抗，研制定量检测心肌型脂肪酸结合蛋白（ H-FABP ）的ELISA试剂盒。方法使用基因重组H-FABP免疫小鼠，以杂交瘤技术制备特异性抗H-FABP单抗，用这些单抗研制定量检测H-FABP的ELISA 试剂盒。结果筛选获得2株稳定分泌抗H-FABP单抗的杂交瘤细胞株，研制了定量检测H-FABP的ELISA试剂盒，灵敏度达到0．2 ng/mL，线性范围0．4～25 ng/mL，r2＝0．9967，回收率在97．2％～104．5％，精密度的变异系数（CV）≤6．72％；应用此试剂盒检测健康人血浆H-FABP，含量为1．87～8．50 ng/mL。结论所研制的ELISA试剂盒有较好的灵敏度及特异性，可用于人血浆中H-FABP含量的检测。
- 彭林峰袁皓加席仲兴张正雷罗广潘宪云路东金红燕陈国怀
- 关键词：心肌型脂肪酸结合蛋白酶联免疫分析
- 单克隆抗体夹心反向被动血凝试验用于HBsAg亚型分析
- 1992年
- 单克隆抗体(McAb)是一种只针对某一抗原表位(或决定簇)的高度特异性的抗体,因此具有很大的实用价值。但当其针对的抗原表位在抗原分子表面重复性较低时,则与相应的McAb便不出现沉淀或凝集等可见的二级反应,因而限制了它的使用。本文通过以两种McAb分别包被和致敏血球,建立了一种McAb夹心RPHA试验,可使原来不出现凝集反应的抗HBsAg-d
- 袁皓加沈心亮蒋琳谢溱刘新铭
- 关键词：乙型肝炎表面抗原单克隆抗体
- 职业献血员中人类T淋巴细胞白血病病毒感染状况的分析被引量：2
- 2002年
- 了解陕西、甘肃、青海、宁夏四省区职业献血员中人类T淋巴细胞白血病病毒 (HTLV)的感染状况 ,以便为在职业献血员中开展HTLV普检提供一定的参考依据。采用双抗原夹心ELISA法检测了四省区 10个单采浆站的 74 16份血浆样本。结果HTLV(1+2 )抗体阳性 7例 ,总阳性率 0 0 9% ;其中男性 4例 ,感染率 0 0 9% ,女性 3例 ,感染率 0 10 % ;18～ 2 5年龄组 2例 ,感染率 0 0 9% ,2 5～ 35年龄组 4例 ,感染率 0 10 % ,35～ 4 5年龄组 1例 ,感染率 0 0 8%。经过分析比较发现 ,HTLV感染率在职业献血员中与所报道的正常人群的感染率无显著差异 ,同时发现 ,在职业献血员中 ,HTLV感染的阳性率无性别差异 ,无年龄差异。
- 袁皓加张云涛席仲兴张正雷贾晓莉张雯杨宗模
- 关键词：职业献血员
- ELISA竞争抑制法检测实验动物的多杀性巴氏杆菌被引量：1
- 1995年
- 设计了一种灵敏的ＥＭＩＳＡ竟争抑制法，用以检测实验动物多杀性巴氏杆菌。在该系统中，从多杀性巴氏杆菌Ｐ－１０５９、Ｘ－７３和Ａ－８９８中抽提可溶性物质作为包板抗原。用３株全菌体免疫兔，提纯兔抗多杀性巴氏杆菌ＩｇＧ，用辣根过氧化物酶标记兔抗多杀性巴氏杆菌ＩｇＧ，将酶结合物与待检动物血清做ＥＬＩＳＡ竞争抑制试验。同时用常规ＥＬＩＳＡ间接法做验证实验。结果表明此法准确可靠，可用于各种实验动物的多杀性巴氏杆菌的检测。对小鼠、仓鼠、兔的检测表明，兔的Ｐ－１０５９阳性率达３０％，小鼠、仓鼠未见阳性。
- 魏天文宁磊沈心亮袁皓加蒋仲芳
- 关键词：多杀性巴氏杆菌ELISA实验动物
- 心肌型脂肪酸结合蛋白胶体金检测试纸条的制备和初步应用被引量：2
- 2013年
- 目的应用胶体金免疫层析法制备检测全血或血清样本中心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的检测试纸条,用于急性心肌梗塞(AMI)的早期辅助诊断。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记鼠抗心肌型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体,喷于玻璃纤维膜上制成胶体金结合物垫,将另一株鼠抗心肌型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体和抗鼠二抗分别包被检测线和质控线,组装成试纸条进行灵敏性、特异性、精密性、稳定性及临床样品检测。结果该试纸条的检测灵敏度为10 ng/mL,15 min内可判定结果;与肌钙蛋白I、C反应蛋白、肌酸激酶、人心肌肌红蛋白无交叉反应。检测240份临床标本,与临床诊断结果进行配对分析,阳性符合率95.83%、阴性符合率100%、总符合率97.92%。结论制备的H-FABP检测试纸条有良好的灵敏性、特异性,可用于早期AMI的辅助诊断。
- 彭林峰罗广席仲兴袁皓加张正雷潘宪云路东金红燕陈国怀
- 关键词：胶体金免疫层析
- 兔巴氏杆菌病的ELISA诊断方法被引量：3
- 1993年
- 设计了一种灵敏的ELISA间接法检测兔抗多杀性巴氏杆菌抗体。在该系统中,从多杀性巴氏杆菌P-1059、x-73或A-898中抽提的可溶性物质作为包被抗原,过氧化物酶标记的绵羊抗兔IgG作为指示物。用本方法和被动血凝试验CPHA)同时检测了78份外观正常兔血清标本,以阻断-抑制试验作为确证试验。结果表明,多杀性巴氏杆菌感染率约为10％左右,以3:A型为主。与PHA法相比,ELISA法有相当高的灵敏度和准确性,且实验步骤简单、快速,既可用于大批量检测兔血清标本,又可用于多杀性巴氏杆菌疫苗的免疫效果评价。
- 魏天文袁皓加沈心亮宁磊付林峰
- 关键词：酶联免疫吸附试验抗体多杀性巴氏杆菌
- 抗人IgGFc和Fab单克隆抗体的鉴定及应用被引量：3
- 1994年
- 本文将采用木瓜蛋白酶水解和ＳＰＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和层析等手段获得的人ＩｇＧＦｃ和Ｆａｂ，以抗人ＩｇＧＦｃ和抗人ＩｇＧＦａｂ单抗为参比品（Ｓｉｇｍａ）．鉴定了细胞库中抗人ＩｇＧ系列的部分细胞林，得到分泌特异性抗人ＩｇＧＦｅ和抗人ＩｇＧＦａｂ单抗的细胞各一株。在此基础上。应用抗人ＩｇＧＦｃ及抗人ＩｇＧＦａｂ单抗分别制备了Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱，纯化了酶解的人ＩｇＧＦｃ和Ｆａｂ。经ＥＬＩＳＡ法鉴定，相互间无交叉反应。同时用此方法还制备了人抗ＨＢｅＦａｂ，并将此Ｆａｂ标记过氧化物酶。配制ＨＢｅＥＬＩＳＡ诊断盒，证明其生物学活性未受影响，而且消除了类风湿因子引起的ＨＢｅＡｇ假阳性现象。
- 沈心亮陈红魏庆兰袁皓加辛芳刘新铭
- 关键词：单克隆抗体免疫球蛋白G
