袁松华
- 作品数：10 被引量：31H指数：4
- 供职机构：上海市公共卫生临床中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项上海市卫生局青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 炎症因子风暴对老年小鼠感染免疫应答的影响被引量：5
- 2018年
- 目的高致病性禽流感感染小鼠后,肺内检测出过量表达的炎症因子,即炎症因子风暴。老年感染者体内更加常见高水平的炎症应答。本文探讨了炎症风暴对老年宿主肺内抗感染免疫应答的影响。方法采用老年小鼠(18～24月龄)以流感病毒H9N2攻毒,建立了老年小鼠感染模型。对照组为H9N2感染的成年小鼠(6～8周)。分别定量分析了H9N2感染的老年小鼠肺原位和外周血中炎症因子的表达,并在感染的急性期内,收集的小鼠肺组织,分别制备成切片和消化为单细胞悬液。其中,肺组织切片用于免疫组化原位定量分析免疫细胞分布;从细胞悬液中分选出T细胞,进行染色计数。结果与成年小鼠相比,老年小鼠感染H9N2病毒后,体重下降显著,生存率仅为50%。但是,与成年小鼠感染后肺组织很少检出炎症因子相比,老年小鼠肺内出现炎症因子风暴,炎症因子IL-6和趋化因子MCP-1异常高表达,且在感染后第2天达到峰值(超过4000 pg/m L),是成年对照小鼠的100～1000倍。老年小鼠感染H9N2病毒后,与成年对照相比,其肺巨噬细胞应答更低,肺中性粒细胞的迁徙能力更弱,感染后第3～7天内更多地滞留在肺内。此外,老年小鼠感染H9N2后第7天,肺内CD8+T细胞数量显著下降,CD4+T细胞数量与比例则维持正常。结论老年小鼠感染H9N2病毒后肺组织出现炎症因子风暴。参与抗感染免疫应答的细胞种类虽然与成年小鼠无显著差异,但是免疫细胞的迁徙能力降低,参与应答的获得性细胞免疫强度也显著降低。
- 袁松华何涌泉徐建青张晓燕
- 关键词：老年小鼠免疫应答
- 利用小鼠炎症模型评价苯扎氯铵的黏膜毒性被引量：1
- 2012年
- 目的利用小鼠黏膜炎症因子模型,研究不同浓度苯扎氯铵(BZK)对生殖道黏膜的刺激毒性,以探究BZK作为黏膜用药物的安全性和应用前景。方法连续三天用浓度为0.02%、0.2%和2%的BZK凝胶处理小鼠阴道黏膜,每天收集小鼠阴道灌洗液,用多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测其中的6种炎症因子[白介素(Interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-17A和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α、γ干扰素(Interferonγ,IFN)-γ]的表达情况;利用苏木紫-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法对小鼠阴道黏膜的病理学损伤情况进行观察。结果 2%的BZK凝胶诱导了较为明显的小鼠阴道黏膜上皮损伤,0.02%和0.2%的BZK与安慰剂组相比无明显病理改变;但是0.2%的BZK显著上调了IL-6和TNF-α在阴道灌洗液中的表达,而0.02%和2%的BZK诱导的各炎症因子与安慰剂组相比差异无统计学意义。结论 2%和0.2%的BZK具有一定的黏膜毒性;0.02%的BZK展现了较好的安全性,该浓度下BZK的病原体感染抑制能力需要进一步研究确认。
- 袁松华贲银银李亮助
- 关键词：艾滋病苯扎氯铵病理学观察炎症因子
- 生理性衰老小鼠的感染免疫模型建立
- 2018年
- 目的生理性衰老导致机体免疫功能下调,进而使老年人群感染免疫应答能力降低,针对新发突发传染病的病原体如重症流感病毒的易感性上升,罹患感染后,临床症状也更严重,预后不佳。因此,本课题组建立一个拟合临床重症流感病毒感染的老年小鼠模型,用于评价老年宿主感染免疫应答特征。方法采用不同毒力的流感病毒H7N9(高致病性)、H9N2(低致病性)分别滴鼻感染老年C57小鼠(18～24月龄),分析其感染后体重变化和生存情况,并动态检测肺内病毒的复制,炎症因子的表达以及肺的病理损伤。结果与成年对照组小鼠(6～8周龄)相比,老年小鼠感染H9N2后7天体重下降了30%(成年对照仅下降10%),生存率降低至50%(成年对照为100%)。老年小鼠肺内H9N2病毒复制更高(P<0.01),感染后第2天达到峰值(每克肺内RNA病毒拷贝为3.2×10~4);以炎症因子IL-6、趋化因子MCP-1为代表的肺内炎症过量表达,是成年对照的100～1000倍;肺病理染色提示老年小鼠肺损伤更严重,感染后修复时间更长。结论成功建立老年小鼠感染模型,在感染生存、肺病毒复制和炎症损伤等方面可以重现临床感染免疫应答的现象。可应用于深入理解老年宿主感染相关的机制研究与抗感染药物评价。
- 袁松华傅卫辉何涌泉徐建青张晓燕
- 关键词：感染免疫流感病毒
- 中国HIV-1 CRF01_AE流行株结构基因和调节／辅助基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究被引量：5
- 2010年
- 目的构建表达gag—env融合基因和tat-rev-integrase（c-half）-vif-nef融合基因的DNA疫苗，并评价其免疫原性。方法按人源密码子使用频率对AE2f株的gag、env、tat、rev、integrase、vif和nef基因序列进行优化，构建真核表达质粒。用Westernblot法验证体外表达情况；用ELISPOT法检测小鼠的细胞免疫反应。结果限制性酶切及DNA测序结果表明两个融合基因质粒构建正确，可以表达相应的融合蛋白。ELISPOT结果显示，Gag—Env特异性的T细胞反应强度为（3010±566）SFC／10^6脾细胞；Tat-Rev—Integrase（C．half）-Vif-Nef融合蛋白特异性的T细胞反应为（948±737）SFC／10^6脾细胞，均显著高于空载体组。结论构建的表达HIV-1CRF01_AE流行株gag—env融合基因和tat—rev-integrase（c-half）-vif-nef融合基因的DNA疫苗可以正确表达所编码的融合蛋白并有效地激活机体的T细胞免疫反应。
- 袁松华万延民仇超张聪优黄杨乔勇叶芮琪邱趁丽张晓燕徐建青
- 关键词：HIV-1艾滋病疫苗结构基因调节基因
- PEG接枝PDMAEMA作为DNA疫苗载体的研究
- DNA载体主要分为两类：一种是病毒载体，另一种是非病毒载体。目前，病毒类载体依然是最有效的一类载体。但是病毒载体本身存在许多不足，主要体现在免疫原性高、靶向特异性差、制备较复杂、费用较高及安全性顾虑等方面。病毒载体在DN...
- 乔勇董岸杰岳鑫业邢金峰徐建青黄杨仇超万延民张聪优袁松华邓联东
- 关键词：DNA疫苗
- 文献传递网络资源链接
- 实时相对定量反转录PCR检测小鼠阴道黏膜炎症因子的表达
- 2011年
- 目的建立实时相对定量反转录聚合酶链反应(real-time RQ RT-PCR)方法,能快速准确地检测各种炎症因子在阴道黏膜的转录表达情况,从而评价包括杀微生物剂在内的生殖道或直肠黏膜用候选药物的刺激毒性。方法以Eppendorf Mastercycler ep realplex实时荧光定量PCR仪为检测平台,选择小鼠β-actin基因为内参,建立基于SYBR GreenⅠ荧光染料的real-time PCR检测方法,对白介素2(Interleukin 2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)等炎症因子在生殖道黏膜的mRNA转录水平,同时进行检测,并用2-⊿⊿Ct方法计算实验组小鼠目的基因相对于空白组小鼠的表达差异情况。用微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)对结果进行验证。结果使用real-time RQRT-PCR能对小鼠阴道黏膜炎症因子的表达情况进行快速检测,结果与CBA检测结果相吻合。结论该方法快速、灵敏、特异性强、价格低廉、高通量。可用于杀微生物剂等生殖道或直肠黏膜用候选药物的临床前安全性评价工作。
- 李亮助杨瑜袁松华贲银银徐建青张晓燕
- 关键词：阴道黏膜炎症因子安全性评价
- 复方鳖甲软肝片治疗免疫性肝纤维化大鼠肝细胞质膜蛋白质组分的变化被引量：12
- 2009年
- 目的研究复方鳖甲软肝片治疗肝纤维化大鼠肝细胞质膜蛋白质组分的变化,以寻找与肝纤维化逆转相关的质膜蛋白质。方法以猪血清腹腔注射大鼠8周制备肝纤维化模型,再以复方鳖甲软肝片灌胃治疗8周。采用蔗糖密度梯度离心获得肝组织匀浆和质膜组分,采用免疫印迹法检测质膜的纯度,分析差异蛋白质组学变化。结果病理学检查发现实验8周后,大鼠肝脏发生中度肝纤维化;经鳖甲软肝片治疗8周后肝纤维化程度减轻,基本恢复到正常水平;免疫印迹检测显示质膜组分得到了较好的富集,其中线粒体等其他细胞器蛋白减少;通过差异蛋白质组学分析发现,治疗组中有22个3倍以上差异蛋白质点,准确鉴定了9个蛋白质,通过免疫印迹验证发现了II型细胞支架蛋白8和膜联蛋白A2的差异表达。结论鳖甲软肝片治疗后,大鼠肝纤维化发生了逆转,并伴随一些质膜蛋白质的表达变化。
- 彭霞袁松华冯艳玲贾小芳杨华张丽军
- 关键词：肝纤维化复方鳖甲软肝片
- 白细胞介素37与干扰素联用在治疗病毒感染中的应用
- 本文提供了白细胞介素37与干扰素联用在治疗病毒感染中的应用。具体而言，本文提供用于治疗病毒感染性疾病或症状的产品，其包含：(a)白介素37(IL‑37)活性物质；(b)一种或多种干扰素(IFN)活性物质；以及(c)可任选...
- 徐建青张晓燕李昂袁松华
- 文献传递
- 广谱流感疫苗的研究进展被引量：6
- 2016年
- 流行性感冒(简称流感)的频频暴发严重危害人类健康和公共卫生,已引起全球范围内的高度关注。预防流感最有效和经济的措施是接种疫苗,但流感病毒的持续变异可逃逸人群已有的免疫应答,目前使用的季节性流感疫苗仅对亚型内抗原匹配较好的毒株产生免疫保护作用,难以有效应对因抗原漂移或抗原转换而产生的无法预料的流感大流行。因此,研发对流感病毒不同亚型均具有交叉免疫保护作用的广谱流感疫苗具有重要意义。近年来,流感病毒广谱中和抗体的发现、对流感病毒抗原保守区域及细胞免疫机制的深入研究、疫苗免疫策略的优化等都为广谱流感疫苗的研发提供了新思路。本文简述了近几年基于血凝素、基质蛋白、核蛋白等多种流感靶抗原的广谱流感疫苗的研究进展。
- 谢辛慈刘璐袁松华张晓燕徐建青
- 关键词：A型流感病毒血凝素
