董蓉莲 作品数:15 被引量:27 H指数:3 供职机构: 江苏省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家自然科学基金 江苏检验检疫局科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 经济管理 更多>>
国产和进口冷冻原肠中奇异变形杆菌的监测与分析 被引量:1 2016年 目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同地域和宿主动物的奇异变形杆菌,以及其他重要食源性致病菌的16SrDNA序列,结合本研究测定序列共同进行比对分析。结果 40份样品中有10份样品为PM检测阳性,总的PM检测阳性率为25.00%,其中,国产冷冻猪原肠的PM检测阳性率为31.25%,澳大利亚和新西兰进口冷冻羊原肠的PM检测阳性率分别为27.27%和15.38%,另外,发现不同原肠PM分离株之间的16SrDNA同源性差异较大,且同源性的高低和PM菌株的分离地域及宿主动物均未呈现明显的关联性。结论国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况比较严重,相关管理和研究应进一步加强。 仇保丰 宋鸿雁 董蓉莲 蒋荧梅 高雪梅 刘文斌 胡顺林关键词:奇异变形杆菌 柔嫩艾美耳球虫江苏株SAG10基因的克隆及分析 2017年 根据Gen Bank中已发表的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)SAG10基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从E.tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与Gen Bank中国内外不同E.tenella分离株的SAG10基因进行比对,发现E.tenella江苏株与北京株的SAG10基因同源性最高,高达99%,其后依次为杨凌株、豪顿株。4种不同分离株SAG10基因的ORF之间有11个碱基不同,其中3个为无义突变,8个为有义突变。分析4种分离株SAG10基因推导蛋白质的亲水性、抗原指数、表面可及性发现,国内外不同E.tenella分离株SAG10蛋白的抗原性总体比较接近且很强,但国内不同分离株之间的抗原性更加接近,并优于国外的豪顿株,这可能是由于氨基酸突变引起蛋白质的空间构象和亲水性等发生变化而引起。将上述SAG10基因序列与复顶门原虫的其他相关SAGs基因序列进行遗传进化分析,发现Eimeria属球虫SAGs基因之间相对比较保守,且与犬新孢子虫(Neospora caninum)、N.hughesi、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的SAG基因之间同源性较低,与已有观点一致;但神经肉孢子虫(Sarcocystis neurona)的2条SAG1基因序列却与E.tenella的SAG1基因序列表现出更高的同源性,这与其他研究结论不符。 仇保丰 景瑾 董蓉莲 宋鸿雁 刘春 朱顺星 邵义祥 刘文斌 李建关键词:柔嫩艾美耳球虫 克隆 SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间的建立及性别差异探讨 目的建立本实验室条件下8周龄SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间,并探讨性别因素的影响,为毒理学安全性评价工作提供有益参考,便于不同实验室之间的质量评价与信息交流。方法在严格质量控制的情况下,选取2015年3月~20... 陈耿 张颖 施伟庆 董蓉莲 鹿奎奎 徐德洲 刘协 奚清丽 卞倩关键词:SD大鼠 血液学指标 文献传递 鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症的国内流行情况及防控对策 被引量:10 2015年 为了解鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症这3种新纳入《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》鼠病在国内的流行情况,对这3种鼠病的文献资料进行了收集和分析。重点分析了3种鼠病在国内清洁级及以上级别的实验大、小鼠中的流行情况,同时对如何防控提出了建议和对策。这3种鼠病在国内清洁级或以上级别的实验大、小鼠中均有检出,应进一步提高实验大、小鼠屏障设施建设和管理的标准化和规范化水平,重视微生物监测的作用,有效提高实验大、小鼠的质量。 仇保丰 宋鸿雁 董蓉莲 顾炳泉 景瑾 刘文斌 邵义祥 高逢结 李建斯氏艾美耳球虫热休克蛋白70基因的克隆及表达分析 被引量:4 2017年 为了获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)的热休克蛋白70(HSP70)的全基因序列,并诱导表达重组HSP70蛋白,试验根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种HSP70蛋白序列设计引物,通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得E.stiedai HSP70的全基因序列,将其连入原核表达载体p ET-28a(+),转化Competent Rosetta2(DE3)p Lys S,通过IPTG诱导表达重组HSP70蛋白,并进行Western-blot分析。结果表明:HSP70序列全长为2 727 bp,最大ORF为2 010 bp。HSP70在诱导后37℃培养4 h条件下有表达,但全部为不溶性表达;在诱导后20℃过夜培养条件下无表达。说明试验成功获得E.stiedai HSP70的全基因序列以及重组HSP70蛋白。 景瑾 张帅 仇保丰 董蓉莲 蒋荧梅 朱顺星 田颖超 刘春 吴刘成 宋鸿雁 邵义祥关键词:斯氏艾美耳球虫 克隆 原核表达 重组蛋白 SPF级实验动物房的环境系统升级改造初探 被引量:1 2009年 Objective Many SPF animal rooms were upgraded and reconstructed on the basis of the old ordinary rooms in our country,there are some deficiencies in the design of automatic monitoring system.In generally,the temperature,cleanliness,and the room pressure gradience are easily controlled.However,the humidity control is very hard,especially in the winter and rainy season.In addition,the monitoring system usually emphasizes on the monitoring function,but the control function is weak,and there is no electronic record reserved in the system.Based on these deficiencies,our laboratory animal room has been upgraded and the reconstructed,and performance of the new system is good. 石根勇 王民生 董蓉莲 吴亚华关键词:温湿度 压差 智能化监控系统 先天性白内障大鼠主要脏器重量与脏器系数 目的:了解先天性白内障大鼠的脏器重量和脏器系数,为该鼠的使用提供基础数据.
方法:取自繁白内障大鼠、小眼白内障大鼠及正常对照雌雄大鼠每组各15只用于实验.
结果:性别间比较,白内障大鼠的心、肝、脾、肺... 董蓉莲 田小芸关键词:先天性白内障 动物模型 脏器重量 脏器系数 基于动物保护理论的db/db小鼠实验方法的建立 近几年,世界范围内连续发生虐待动物的事件,如活鲨取翅、活熊取胆、虐杀流浪小猫、强酸强碱泼熊等等已引起社会的广泛关注。随着实验动物在我国应用的不断深入,实验动物福利问题也逐渐受到普遍重视。 董蓉莲关键词:DB/DB小鼠 柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因的克隆及分析 2016年 根据Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从纯化的柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子中提取总RNA,然后应用RT-PCR技术扩增出约810 bp的产物,将其连入p MD18-T载体,经双酶切和PCR鉴定正确后,进一步进行DNA序列测定。将本研究测序结果与Gen Bank收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因进行比对,发现两序列间有6个碱基发生突变,其中3个为无义突变,其余为有义突变,同源性为97.9%;本研究扩增的S3a基因包含了一个全长795 bp的完整开放阅读框(ORF),编码264个氨基酸,蛋白分子量约为29.9 KD,ORF碱基同源性为99.0%,推导氨基酸序列同源性为98.1%。将本研究克隆的核糖体蛋白S3a基因与Gen Bank中收录的人和哺乳动物、植物、真菌、禽鸟等共15种真核生物的核糖体蛋白S3a基因进行比对发现,虽然本研究克隆和Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因之间同源性最高,但是两者却与硕大利什曼原虫和布氏锥虫这2种原虫的S3a基因同源性较低,反而与禽鸟S3a基因的同源性较高。 仇保丰 董蓉莲 宋鸿雁 顾炳泉 景瑾 刘文斌 邵义祥 高逢结 李建关键词:柔嫩艾美耳球虫 克隆 大鼠透皮电阻实验替代皮肤腐蚀性实验的验证 被引量:3 2009年 目的通过建立大鼠皮肤透皮电阻(TER)实验,研究运用体外方法替代动物试验检测化学品皮肤腐蚀性的可行性。方法参照经济合作与发展组织(OECD)体外实验方法指南430(透皮电阻分析法)建立测定系统,使用11种参考物质对该实验体系进行评估。根据本实验系统对参考物质的实测数据,可判定TER值>15 kΩ为阴性(非腐蚀性),TER<5 kΩ为阳性(腐蚀性),TER介于两者之间或3个平行样的TER测定值在界值上下波动时为可疑阳性,进一步进行染料渗透量测定,以8 mol/L盐酸测得的染料渗透量作为判断标准。结果整个实验的灵敏度为100%(5/5),特异度100%(6/6)。结论大鼠TER测定和染料渗透量分析相结合能成功判断本研究所选的11种标准化学物质的皮肤腐蚀性。此方法在实际运用中的有效性还需更多化学物质的检测来验证。 俞萍 胡启之 陆罗定 刘协 董蓉莲