董丽华
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人上皮性卵巢癌组织中肿瘤相关成纤维细胞的培养被引量：3
- 2011年
- 目的:通过分离、纯化、培养及鉴定,获得人上皮性卵巢癌组织中肿瘤相关成纤维细胞。方法:采用酶消化法获得原代细胞,再通过酶消化+反复贴壁法,传代获得第4代纯化细胞,并绘制细胞生长曲线,通过形态学观察和免疫细胞化学染色,对所得细胞进行鉴定。结果:获得典型卵巢癌相关成纤维细胞。形态学上,细胞呈长梭形,胞核不明显,细胞大小不一致。其生长潜伏期较肿瘤细胞长,生长相对缓慢。免疫细胞化学上,肿瘤相关成纤维细胞中,成纤维细胞特性蛋白-1、波形蛋白、结蛋白及α-平滑肌动蛋白均表达阳性,而血管内皮细胞、间充质细胞标志均表达阴性。细胞角蛋白在较早传代的细胞中少量表达,通过纯化后基本消失。结论:本方法可获得典型上皮性卵巢癌相关成纤维细胞,为进一步研究该细胞自身生物学特性及其与卵巢癌间的相互作用提供了必要的细胞学基础。
- 董丽华傅士龙韩素萍
- 关键词：肿瘤相关成纤维细胞卵巢上皮性癌细胞培养
- 癌相关成纤维细胞对上皮性卵巢癌细胞耐药性影响及机制初步研究被引量：1
- 2019年
- 目的:探讨癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)对卵巢癌细胞化疗耐药性影响及机制。方法:通过CAFs和卵巢癌细胞Ovcar3共培养,采用流式细胞术检测顺铂(cis-diammin-odichloroplatinum,DDP)对共培养前后卵巢癌细胞凋亡率的改变;应用实时定量PCR、Western blot其蛋白水平的变化;以及AKT体外特异性阻断剂LY294002对CAFs引起化疗耐药的逆转作用。结果:CAFs与卵巢癌细胞共培养后,DDP诱导的卵巢癌细胞凋亡显著减少(P <0.05);共培养组卵巢癌细胞中PI3K及XIAP的mRNA表达水平明显高于对照组(P <0.05);共培养后PI3K/XIAP蛋白表达显著升高(P <0.05);磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达显著升高(P <0.01)。抑制剂LY294002可显著降低XIAP蛋白表达。结论:CAFs可通过影响PI3K/AKT/XIAP信号通路,影响卵巢癌化疗耐药效应。
- 董丽华孙玮傅士龙
- 关键词：癌相关成纤维细胞卵巢癌共培养化疗耐药
- 人正常卵巢组织中成纤维细胞的培养被引量：3
- 2011年
- 目的:通过分离、纯化、培养及鉴定,获得典型人卵巢成纤维细胞。方法:采用酶消化+反复贴壁法,获得纯化成纤维细胞,通过形态学观察和免疫细胞化学染色,对所得细胞进行特征性标志及生物学特性的检测,进一步阐述细胞特征,并绘制细胞生长曲线。结果:形态学上,正常卵巢成纤维细胞形态多样,大部分为梭形、条索形,还有三角形、多角形和不规则形等,并具有伪足样外形;其生长潜伏期较长,12～14 d可传代;免疫细胞化学上,波形蛋白(vimentin)表达强阳性,结蛋白(desmin)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)表达弱阳性;在较早期传代的细胞中,CK-7及CK-P呈少量阳性,随着细胞的纯化,其阳性表达渐行减少直至完全消失;肌动蛋白α(α-SMA)部分细胞表达阳性。而卵巢黏液性细胞标志CK-20、血管内皮细胞标志CD31、间充质细胞标志CD90、雌、孕激素受体(ER、PR)以及基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-3、MMP-9)、肿瘤标志物CA125、CA19-9、癌胚抗原(CEA)、成纤维细胞激活蛋白α(FAP-α)、血小板衍生生长因子受体α(PDGFR-α)均阴性。结论:成功获得人卵巢成纤维细胞,为研究卵巢癌及其相关成纤维细胞提供了必要的细胞学工具。
- 董丽华孙玮傅士龙韩素萍
- 关键词：成纤维细胞卵巢组织
