范齐文
- 作品数：16 被引量：40H指数：4
- 供职机构：同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- M/XDR-TB的快速分子检测和耐药特征分析被引量：11
- 2011年
- 目的 使用分子线性探针杂交技术结合仪器法液体快速培养分析耐多药（ multidrug resistant,MDR）及广泛耐药（extensively drug resistant,XDR）结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）的耐药基因和表型特征.方法 运用GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB菌株中各耐药基因的突变位点及类型,平行用BD MGIT960系统检测所选菌株对一线及二线抗结核药物的敏感性.结果 （1）94株MDR-TB经MGIT960检测,乙胺丁醇（ethambutol,EMB）、阿米卡星（amikacin,AMK）、氧氟沙星（ofloxacin,OFX）及莫西沙星（moxifloxacin,MFX）的耐药率分别为36.2%、17.0%、54.3%和55.3%.XDR-TB检出率为13.8%.（2）以MGIT960药敏结果作为参考标准,94株MDR-TB中,GenoType MTBDRplus检测MTB对异烟肼（isoniazid,INH）、利福平（rifampin,RFP）耐药的符合率分别为86.2%和95.7%；GenoType MTBDRsl检测MTB对EMB、AMK、OFX及MFX耐药的敏感性分别为47.1%、81.3%、94.1%、94.2%；特异性分别为75.0%、98.7%、90.7%、92.9%.（3）rpoB基因突变中以S531L最多；INH耐药主要由katG基因发生突变导致,以S315T1类型居多；gyrA突变位点主要集中在第94位密码子.所测菌株中有23例为复合耐药,7例为未知突变.结论 M/XDR-TB中,INH、RFP、AMK、OFX及MFX耐药株大多分别是由katG、rpoB、rrs及gyrA突变导致,乙胺丁醇与embB之间的耐药关联性相对较低.GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB敏感性和特异性较好,可以在未获得传统细菌表型药敏结果前指导临床用药治疗.
- 范齐文郭建张慧涨吴晓渊胡香南钱雪琴邓桂林康涵吴文娟
- 关键词：结核分枝杆菌药物敏感试验
- 结核分枝杆菌动物建模试验中ABSL-3实验室内生物安全评估被引量：1
- 2012年
- 目的通过在动物生物安全三级(ABSL-3)实验室内对结核分枝杆菌(MTB)动物建模过程采样监测,为实验室生物安全评估提供依据。方法在经中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可并由卫生部批准的,可从事MTB等高致病性病原微生物实验动物研究工作的ABSL-3实验室内实施MTB动物建模,在实验过程中进行空气和物体表面采样。用快速分子诊断和常规病原学方法对样本进行特异性检测分析。结果生物安全三级(BSL-3)实验室使用后的清场工作可以大大减少实验室环境的细菌量,BSL-3实验室在日常使用中也会存在少量的环境微生物,由于负压强度和使用频率的差异,核心区的环境洁净度明显高于准备间。70%乙醇喷洒消毒及擦拭可以使准备间物体表面的细菌量检出率从59.26%下降到9.38%;核心区物体表面的环境细菌检出率从6.59%下降到1.52%,核心区MTB检出率从10.99%下降到0。在ABSL-3实验室和生物安全柜双重负压环境下,可避免空气中MTB气溶胶污染。结论 ABSL-3实验室的负压环境和正确的防护及消毒措施对实验室操作人员的生物安全有重要的防护作用。
- 朱召芹范齐文胡香南刘芳郭建宰淑蓓杨华宋志刚吴文娟
- 关键词：生物安全评价结核分枝杆菌
- 结核病实验诊断技术被引量：9
- 2012年
- 结核病诊断一直是控制结核病疫情的关键,快速准确、敏感特异、简便低廉的诊断方法是目前迫切需要的。从结核分枝杆菌快速诊断噬菌体法、AMPLICOR?MTB试验、Gen-Probe分子生物学诊断方法到T-SPOT.TB和QuantiFeron-Gold Test免疫学检测方法,结核病实验诊断方法在不断改进和完善。近年来,世界卫生组织(WHO)或美国食品药品监督管理局(FDA)认可的一些广泛应用的商业化诊断方法,如基于液体培养的BacT/Alert3D、MGIT960系统;基于分子线性探针杂交的INNO-LiPARif.TB、GenoType?MTBDRplus及GenoType?MTBDRsl技术;基于免疫色谱技术的CapiliaTB试剂盒等,都已被临床广为接受和应用。还有一些尚待推广的技术,如最新的Xpert?MTB/RIF系统,发光二极管(LED)显微镜等也有较好的发展前景。
- 范齐文吴文娟
- 关键词：结核病
- 尿路感染分离菌株中非白念珠菌的分布及耐药性研究
- 目的分析尿路感染患者非白念珠菌的分布及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法收集2013年6月-2014年7月,上海市东方医院南院住院及门诊患者临床分离的尿路感染病原菌,采用Vitek2 Compact全自动微生物鉴定/药...
- 郭建何丽华范齐文吕莉吴文娟
- 关键词：尿路感染病原菌耐药性念珠菌
- 文献传递
- 肺外结核感染的快速分子检测和菌株分型方法的应用被引量：3
- 2013年
- 目的应用结核分枝杆菌rRNA直接检测（MTD）和多位点PCR菌株分型方法，检测肺外结核标本中的结核分枝杆菌，评价其在肺外结核感染的快速检测和菌株分型中的应用价值。方法回顾性分析2010年6月至2011年12月上海市公共卫生临床中心47例儿童肺外结核、75例成人肺外结核以及48例非结核病患者的脑脊髓液、穿刺液等标本。用涂片法、L-J固体培养法、MGIT960液体培养法和MTD法进行平行检测，对培养阳性菌株应用MPT64胶体金初筛。MPT64阴性菌株采用多位点PCR菌株分型方法进行快速分型，并用化学法确认。采用SPSSl6．0进行统计分析。结果涂片法、L-J固体培养法、MGIT960液体培养法和MTD法检测肺外结核的敏感度依次为：10．7％（13／122），11．5％（14／122），16．4％（20／122）和37．7％（46／122），特异度均为100．0％。20株培养阳性的菌株，其中6例儿童患者临床分离菌株为MPT64胶体金检测阴性，经多位点PCR菌株分型方法、化学法分型鉴定为卡介苗菌株。多位点PCR菌株分型方法与传统化学法结果一致，但可在4h内完成检测。结论与传统病原学检测方法比较，MTD法检测结核分枝杆菌快速简便，结果灵敏可靠；同时应用多位点PCR菌株分型方法，可对儿童肺外结核患者进行快速的早期鉴别诊断。
- 郭建范齐文卢水华邓桂林吴文娟
- 关键词：结核核糖体细菌分型技术
- 金黄色葡萄球菌对莫匹罗星耐药的研究进
- 金黄色葡萄球菌是一种多功能病原体,能够引起广泛的的人类疾病。金黄色葡萄球菌的定植是引起感染的危险因素,莫匹罗星是常用的去定植药物。随着莫匹罗星使用的增加,现已出现了耐药现象。但是,莫匹罗星的耐药与药物的使用以及去定植之间...
- 宋燕范齐文羽晓瑜吴文娟
- 关键词：金黄色葡萄球菌MRSA莫匹罗星耐药
- 文献传递
- 结核分枝杆菌rdESAT-6抗原在耻垢分枝杆菌中的制备及其血清学诊断研究被引量：5
- 2014年
- 目的构建结核分枝杆菌(MTB)融合基因2×esat-6原核表达载体,利用耻垢分枝杆菌诱导表达、纯化早期分泌抗原ESAT-6重组二聚体(rdESAT-6),Western blot分析其抗原性,并评估其在结核病患者中的血清学诊断价值。方法以DNA疫苗HG856A2为模板扩增2×esat-6基因,构建pMF41-2×esat-6原核表达载体,电转化耻垢分枝杆菌,诱导表达rdESAT-6蛋白,Western blot分析其抗原性。收集126例确诊的结核病患者和42名健康体检者的血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和结核斑点金免疫渗滤试验(TB-DOT)检测血清结核抗体,评估rdESAT-6在结核血清学诊断中的价值。结果成功构建了pMF41-2×esat-6重组质粒,以包涵体形式表达了rdESAT-6蛋白,纯化的蛋白纯度在95%以上,可与小鼠抗ESAT-6血清发生特异性反应。126例结核病患者血清检测结果表明,rdESAT-6蛋白在MTB阳性组和阴性组患者血清学诊断的敏感性分别为79.75%(63/79)、61.70%(29/47),好于TB-DOT的62.03%(49/79)、44.68%(21/47)(P<0.05)。2种方法对42名健康体检者血清诊断特异性均为95.24%(40/42)。结论 MTB的融合蛋白rdESAT-6用于结核病血清学检测具有较好的敏感性和特异性,可作为结核病血清学诊断的优选抗原。
- 郭建范齐文范小勇马辉钱雪琴胡香南吴文娟
- 关键词：结核分枝杆菌ESAT-6融合蛋白免疫学诊断
- BCG初免-Ag85A DNA疫苗加强免疫策略的抗结核保护效果研究
- 目的：制备表达免疫优势抗原Ag85A的DNA疫苗,以其加强卡介苗初免的作用,并评价其抗结核的作用和分析疫苗接种后诱导的T细胞应答,发现BCG初免-DNA疫苗加强免疫策略可诱导出更强的Th1型细胞反应,BCG-DNA组产生...
- 康涵范齐文郭建钱雪琴邓桂林吴文娟
- 关键词：DNA疫苗BCG免疫保护
- 耐多药结核分枝杆菌混合感染的分子鉴定
- 目的:鉴别结核病由单一结核分枝杆菌菌株引起或多菌株混合感染是临床制定治疗方案和疗效分析的重要依据。本研究利用分子线性探针杂交结合分子流行病分型评估临床耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)混合感染状况。方法:收集2007年4...
- 范齐文郭建吴文娟
- 文献传递
- Rv0222/ESAT-6融合蛋白对结核病的诊断价值被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨Rv0222/ESAT-6融合蛋白对结核病的血清学诊断价值。方法:表达、纯化重组Rv0222/ESAT-6融合蛋白,以其为抗原包板、以酶标抗体为二抗、采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结核患者、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染合并结核患者、非结核患者以及正常人血清,评价该融合蛋白对结核病的诊断价值。结果:以结核分枝杆菌感染T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT,简称T-SPOT)为金标准,将Rv0222/ESAT-6融合蛋白作为抗原的ELISA诊断结核病的敏感性为86%,特异性为100%;T-SPOT与ELISA对结核病的阳性检出率差异无统计学意义。结论:以Rv0222/ESAT-6融合蛋白作为抗原的ELISA对结核病(包括HIV合并结核病)的血清学诊断有一定价值。
- 张慧涨范齐文杨华黄红梅方强
- 关键词：融合蛋白结核病酶联免疫吸附试验
