范清堂
- 作品数：98 被引量：294H指数：8
- 供职机构：郑州大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 幽门螺杆菌黏附素HpaA蛋白在大肠杆菌中表达及其免疫保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的表达和纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)黏附素HpaA蛋白,研究其免疫活性和对小鼠的免疫保护作用。方法诱导TB1(pMAL-c2X-hpaA)表达H.pylori黏附素HpaA蛋白,Amyloss树脂预装柱进行分离、纯化,Western blot鉴定其免疫学活性;纯化蛋白免疫小鼠后,H.pylori国际标准菌株NCTC11637攻击感染,观察H.pylori定植情况及免疫保护效果。结果获得了高纯度且免疫活性良好的目的蛋白;HpaA蛋白免疫小鼠的保护率为53.33%(8/15),与对照组统计学差异显著(P=0.002)。结论纯化HpaA蛋白对小鼠有免疫保护作用,可作为H.pylori基因工程疫苗的候选组分。
- 黄学勇许汴利段广才范清堂郗园林
- 关键词：幽门螺杆菌小鼠模型免疫保护
- 幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆测序及生物信息学分析被引量：3
- 2007年
- [目的]克隆幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)外膜蛋白omp22基因,并对其进行测序及生物信息学分析,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据。[方法]利用PCR技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增出omp22基因,将其定向插入克隆载体pBluescriptbⅡ,并进行序列测定和生物信息学软件分析其生物学特性。[结果]用PCR方法扩增的omp22基因长度为540bp,编码179个氨基酸,DNAstar和Omiga软件预测其蛋白质的相对分子量(Mr)约为20kDa,并显示出良好的抗原性和疏水性。[结论]本研究获得了序列正确的幽门螺杆菌omp22基因,为其重组蛋白表达及其相关研究奠定了基础。
- 黄学勇段广才范清堂郗园林黄志刚宋春花
- 关键词：幽门螺杆菌克隆生物信息学分析
- 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测幽门螺杆菌的分子流行病学研究被引量：3
- 2003年
- 代敏段广才范清堂郗园林代丽萍李倩施侣元
- 关键词：幽门螺杆菌分子流行病学
- 幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB的表达和免疫学活性被引量：4
- 2004年
- 目的:构建表达幽门螺杆菌(H pylori)融合蛋白HspA-UreB 的重组表达质粒,并研究其免疫学活性. 方法:定向克隆方法将郑州分离Hp菌株MEL-HP27的hspA 和ureB基因融合连接入原核表达载体pET30(a),构建重组表达质粒pET-HU27.该质粒转化大肠杆菌BL21后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析融合蛋白HspA-UreB表达情况.Ni2+柱亲和层析纯化融合蛋白,与小鼠免疫血清进行Western blot分析,检测融合蛋白的免疫反应性. 结果:特异PCR法与质粒酶切鉴定证实重组表达质粒pET- HU27构建成功.SDS-PAGE分析显示在82.1 KDa处出现特异蛋白带,占菌体总蛋白的21%,亲和层析法获得纯度为91%的纯化融合蛋白,经免疫小鼠制备的血清可以识别该融合蛋白. 结论:成功构建表达H pylori HspA-UreB融合蛋白的重组表达质粒,表达的融合蛋白具有良好的免疫反应性.
- 代丽萍段广才范清堂郗园林张荣光
- 关键词：融合蛋白幽门螺杆菌免疫反应性免疫学活性SDS-PAGE分析IPTG
- 在乳酸乳球菌表面展示表达幽门螺杆菌蛋白的载体及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种具有在乳酸乳球菌表面展示表达幽门螺杆菌蛋白的载体及其构建方法和应用。该载体的构建方法：以幽门螺杆菌基因组DNA为模板，用PCR方法扩增hpaA基因；将得到的hpaA基因与表达载体pNZ8110-lysM经酶...
- 段广才张荣光程文滨范清堂张卫东郗园林陈帅印
- 文献传递
- 公共卫生与预防医学国家级实验教学示范中心建设探索与实践
- 2024年
- 为满足当今公共卫生与预防医学研究发展的需求,公共卫生与预防医学实验教学中心进行深层次的建设探索与创新。以郑州大学公共卫生学院国家级实验教学示范中心为例,实验中心坚持以学生为主体、教师为主导,以能力培养为核心,以创新人才培养为目标,以实验教学改革为动力,以创新实验教学内容和方法为中心,以创新管理体制和运行机制为基础,以实验室建设、实验教学队伍建设、实验教学信息化建设为支撑,凸显实验教学特色,着力构建新时代背景下有利于学生自主学习和创新能力的公共卫生与预防医学国家级实验教学示范中心。
- 杨瑞英杨海燕阿有梅刘洁范清堂王佳
- 关键词：公共卫生与预防医学实验教学
- RAPD法对50株幽门螺杆菌的分子流行病学被引量：8
- 2002年
- 目的 从基因水平研究幽门螺杆菌与疾病的关系。方法 用随机扩增的多态性 DNA(RAPD)法对 5 0株来自不同病人的幽门螺杆菌进行基因分型 ,并在此基础上探讨不同基因型别的幽门螺杆菌与疾病之间的关系。结果 5 0株幽门螺杆菌均呈现不同的基因图谱 ,经聚类分析可分为 3个基因型别 ,此 3个基因型别在不同疾病中的发生率不同 ,经统计学分析 ,差异有显著性 (P=0 .0 3)。
- 代敏段广才郗园林范清堂李倩施侣元
- 关键词：随机扩增多态DNA技术幽门螺杆菌流行病学分子
- 幽门螺杆菌lpp20基因与麦芽糖结合蛋白基因的融合表达与纯化被引量：2
- 2003年
- 目的 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)lpp20基因与麦芽糖结合蛋白基因的融合表达产物的纯化方法,为幽门螺杆菌基因工程疫苗的制备建立基础。方法 采用本研究室分离的HpMEL-HP27菌株提取染色体DNA,用PCR方法从HP染色体DNA上扩增出lpp20基因片段,将目的基因插入到表达载体pMAL-c2X中,用重组质粒转化大肠杆菌(E.coli TB1)。采用IPTG进行诱导表达。用多糖树脂(amylose resin)作为填充料,制备层析柱,将可溶性菌体蛋白进行亲和层析。应用SDS-PAGE方法对纯化产物进行分析。结果 融合蛋白的分子量约为60kDa,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的34％;纯化后的融合蛋白纯度达90％以上。结论 与麦芽糖结合蛋白基因融合的lpp20基因在E.coli TB1中能够高效表达;用多糖树脂作为填充料,进行亲和层析的方法,具有良好的纯化效果。
- 张荣光段广才范清堂
- 关键词：幽门螺杆菌蛋白纯化疫苗
- 热休克蛋白70双向免疫印记鉴定及抗体制备被引量：2
- 2007年
- 目的验证肺癌组织中热休克蛋白70(HSP 70)表达量,从肺癌组织中获得HSP 70并初步制备其人源性抗体,为进一步研究其生物功能和临床应用奠定基础。方法收集肺癌组织和癌旁组织标本,应用双向电泳-免疫印记方法验证HSP 70的表达量,经过亲和层析和离子交换层析方法获得肺癌组织中HSP 70作为抗原,经过四轮亲和-吸附-洗脱,从人源性肺癌噬菌体单链抗体库中初步筛选其抗体。结果双向电泳-免疫印记结果表明,肺癌组织HSP 70表达量高于癌旁组织。凝胶电泳和免疫印记结果表明,从肺癌组织中获得了人源性HSP 70,以此HSP 70作为抗原,初步筛选出了其抗体。结论人源性HSP 70及其人源性特异结合抗体的获得,为进一步研究其抗肺癌的临床应用提供了基础依据。
- 张慧珍杨继要吴逸明范清堂
- 关键词：人源性肺癌HSP70抗体
- 蟒河污染对沿岸居民唾液溶菌酶的影响
- 1999年
- 本研究采用比浊法对蟒河污染区和对照区居民唾液溶菌酶进行了测定，结果显示污染区居民唾液菌酶明显低于对照区，说明蟒河污染已对居民非特异性免疫功能造成了影响。
- 韦俊萍范清堂张德甫张德甫丁鹏绪丘静刘华莲
- 关键词：污染唾液溶菌酶河流污染
