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低强度脉冲超声波对大鼠失神经骨骼肌萎缩的影响被引量：9: 2015年; [目的]探讨低强度脉冲超声波(LIPUS)对失神经骨骼肌萎缩的影响。[方法]50只健康雄性SD大鼠随机分为五组:假手术组、模型组、60 m W/cm2、110 m W/cm2、170 m W/cm2LIPUS治疗组(即A、B、C、D、E组),n=10。右股后外侧纵向切口暴露并切断坐骨神经造成失神经动物模型,A组不切断神经。术后1 d,C、D、E组术侧腓肠肌分别给予相应强度LIPUS治疗(A、B组不行任何治疗)。术后4周和8周,测定术侧腓肠肌湿重比和肌纤维直径、截面积,Western Blot检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达,TUNEL法检测细胞凋亡,透射电镜观察腓肠肌超微结构。[结果]术侧腓肠肌湿重比和肌纤维直径、截面积,B组明显低于C、D、E组,差异有统计学意义(P<0.05)。Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达及细胞凋亡指数,C、D、E组明显低于B组(P<0.05)。透射电镜显示,C、D、E组肌丝溶解、Z线断裂和线粒体肿胀、空泡化均轻于B组。[结论]LIPUS可延缓失神经骨骼肌萎缩进程,其机制可能与调控凋亡相关蛋白表达、减少细胞凋亡有关。; 吴珍元黄英如李沿江肖龙邓熊; 关键词：失神经骨骼肌低强度脉冲超声波肌萎缩细胞凋亡

筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β诱导的兔软骨细胞凋亡的保护作用被引量：2: 2015年; 目的观察筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的兔软骨细胞Bcl-2、Bax表达及细胞凋亡的影响,探讨筋骨痹痛汤治疗骨性关节炎的机制。方法随机取雄性成年新西兰兔8只分成4组,分别灌服生理盐水、补肝肾中药(骨碎补、续断和淫羊霍)、独活寄生汤和筋骨痹痛汤,制得空白血清和药物血清。分离制备幼兔软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定软骨细胞。取第3代软骨细胞,随机分5组实验:空白组(A组)、模型组(B组)、补肝肾中药对照组(C组)、独活寄生汤对照组(D组)、筋骨痹痛汤组(E组)。A组用含10%空白血清的DMEM培养36h,其余各组均先采用含IL-1β的DMEM诱导培养12h,然后B、C、D、E组分别给予含10%空白血清、10%补肝肾中药药物血清、10%独活寄生汤药物血清、10%筋骨痹痛汤药物血清的DMEM培养24h。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和免疫印迹法检测兔软骨细胞Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡比例。结果经鉴定分离制备的细胞为软骨细胞。软骨细胞培养24h后,C、D、E组Bcl-2mRNA和蛋白表达高于B组,D、E组高于C组,E组高于D组,差异均有统计学意义(P<0.05);Bax mRNA和蛋白表达,以及软骨细胞凋亡率,C、D、E组低于B组,D、E组低于C组,E组低于D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论筋骨痹痛汤药物血清对IL-1β诱导的兔软骨细胞凋亡具有明显保护作用,其机制可能是通过促进Bcl-2表达和抑制Bax表达,调节Bcl-2与Bax的比例来实现。; 肖龙袁海洲钟沁黄剑冼华黄英如; 关键词：软骨细胞

二甲基亚砜和乙二醇对玻璃化保存大鼠坐骨神经的协同保护作用被引量：3: 2015年; 目的探讨冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)单独及联合应用对周围神经玻璃化保存的影响。方法取30只3月龄雄性SD大鼠双侧坐骨神经,制成长约15 mm神经段,在含不同冷冻保护剂的玻璃化溶液中-80℃保存4周:空白组(不含冷冻保护剂)、10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组(每组n=15)。透射电镜观察神经组织超微结构,Calcein-AM和PI双染色激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测神经组织生物活性,Western blotting检测神经组织Caspase-3、Caspase-8表达。取玻璃化保存4周后的各组坐骨神经,于37℃、5%CO2DMEM(含l0%胎牛血清)中培养7 d,RT-PCR、Western blotting检测培养神经表达的神经生长因子(NGF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)。结果坐骨神经玻璃化保存4周,透射电镜显示:空白组神经纤维脱髓鞘变和轴质萎缩严重,而10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组神经纤维脱髓鞘变和轴质萎缩均较轻(以10%DMSO+20%EG组最轻)。LSCM检测显示:空白组神经纤维绿色荧光较弱,而红色荧光较强、分布较广;10%DMSO组、20%EG组神经纤维绿色荧光较强、红色荧光较弱;而10%DMSO+20%EG组神经纤维绿色荧光最强、红色荧光最弱。Western blotting检测显示:玻璃化保存后坐骨神经Caspase-3、Caspase-8的表达,空白组与10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组比较,10%DMSO+20%EG组与10%DMSO组、20%EG组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);但10%DMSO组与20%EG组间差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR、Western blotting检测显示:培养神经NGF、GDNF的表达,空白组与10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组比较,10%DMSO+20%EG组与10%DMSO组、20%EG组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);但10%DMSO组与20%EG组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 10%DMSO、20%EG对-80℃玻璃化保存的坐骨神经具有保护作用,能提高玻璃化保存后神经组织的生物活性,且二者联合应用具有协同作用。; 肖龙黄英如李沿江吴珍元邓熊; 关键词：坐骨神经冷冻保护剂

电针对兔膝骨关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响被引量：6: 2014年; 目的观察电针对兔膝骨关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响。方法 40只新西兰大白兔随机分成空白对照组、模型组、电针组和西药组。除空白对照组外,各组动物采用左后肢膝关节伸直位石膏固定7周建立膝骨关节炎动物模型。造模成功后,电针组取左后肢梁丘、血海、阳陵泉、足三里和内外膝眼6个穴位,用毫针斜刺或直刺得气后,进行电针操作,连续治疗3周;西药组灌服氨基葡萄糖胶囊,治疗3周。处理前后,对各组家兔膝关节滑膜和软骨标本,进行HE染色、免疫组化法染色观察膝关节滑膜和软骨的病理变化;采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡并计算凋亡指数(AI)。结果经治疗后,电针组和西药组关节软骨细胞凋亡、凋亡指数与模型组比较明显降低(P<0.05)。结论电针能改善膝骨关节炎家兔模型软骨细胞的过度凋亡,降低膝骨关节炎软骨细胞的凋亡率。; 彭支莲黄剑韦桂勇肖龙袁海洲; 关键词：电针膝骨关节炎软骨细胞凋亡

电针对膝骨性关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响被引量：3: 2014年; 目的观察电针对膝骨性关节炎(KOA)家兔模型软骨细胞凋亡的影响。方法将36只新西兰大白兔随机分成正常组(A组)、模型组(B组)、电针组(C组)和氨基葡萄糖胶囊组(D组),每组9只。除A组外,其余三组新西兰大白兔采用左后肢膝关节伸直位石膏固定6 w,建立KOA动物模型。造模成功后,解除石膏制动,A组和B组给予正常饲养;C组取左后肢'足三里、犊鼻、血海、阳陵泉、膝眼、梁丘'六个穴位,用毫针进行针刺,直刺或斜刺15~30 mm,得气后,针柄接电针治疗仪,疏密波型,频率2~100 Hz,强度以局部皮肤肌肉轻微颤动为度。每次电针两组,每次留针20 min,每日1次,连续治疗3 w;D组按90 mg·kg-1·d-1灌服3 w。处理后,分别取各组家兔膝关节软骨标本,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡并计算凋亡指数(AI)。结果经治疗后,C组与B组比较有显著性差异(P=0.001)。结论电针能改善KOA家兔模型软骨细胞的过度凋亡,以发挥对KOA的防治作用。; 韦桂勇黄剑彭支莲丁盼肖龙郑玲玲冉娅; 关键词：膝骨性关节炎电针细胞凋亡

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肖龙

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