肖文伍
- 作品数：21 被引量：76H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 小鼠胚胎干细胞体外分离培养影响因素的实验研究被引量：9
- 2004年
- 目的 为了更高效地分离胚胎干细胞 (ES) ,对几种影响分离ES细胞的因素进行探讨。方法 通过胚泡Hoechst33342染色及胚泡培养 ,研究超排卵对胚泡贴壁率及ES细胞分离效率的影响。并从 3种不同培养体系中寻找较为理想的ES细胞分离体系。结果 ①超排卵获得的胚泡的细胞数与正常胚泡之间差异无显著性意义。超排卵对胚泡的 72h贴壁率及ES细胞克隆率无显著影响。②在ES细胞培养过程中 ,有饲养层体系优于无饲养层体系。结论 超排卵获得胚泡的方法在小鼠ES细胞分离培养过程中值得采用。人胚胎成纤维细胞饲养层在ES细胞分离过程中具有较好的作用。
- 刘登华肖文伍陈红张苏明
- 关键词：超排卵ES细胞胚泡饲养层体外分离
- 小鼠局灶性脑缺血再灌注模型的稳定性与可重复性(英文)被引量：1
- 2004年
- 背景:目前,转基因小鼠越来越多地在脑血管病研究中应用,小鼠的脑缺血再灌注模型是进行该项研究的一种重要模型,因此对该小鼠模型的稳定性和可重复性研究也变得非常必要。目的:建立重复性强,稳定性好的小鼠大脑中动脉脑缺血模型,为以后对转基因小鼠的研究做好技术准备。设计:采用配对两组比较的研究方法。地点和材料:实验在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所进行,选用BALB/c和昆明白两种小鼠(均购自同济医科大学动物房),5～0及6～0两种规格的尼龙丝线,在不同条件下进行试验。干预:选择BALB/c和昆明白两种小鼠进行栓塞试验,观察小鼠品系、体质量、线栓规格及术后温度对梗死结果的影响。主要观察指标:小鼠的梗死体积及神经功能评分。结果:昆明白小鼠的平均梗死体积为(12±4)mm3,BALB/c小鼠的平均梗死体积为(22±3)mm3,两者比较差异有显著性意义(t=16.425,P<0.01)。BALB/c小鼠的神经功能评分与昆明白小鼠比较差异有显著性意义(t=2.005,P<0.05)。17～22g小鼠匹配6～0的线栓组较30～35g的小鼠匹配6～0线栓组梗死体积所占百分比较大(t=14.070,P<0.01),神经功能评分也高于后者(t=3.714,P<0.05)。结论:小鼠品系、小鼠体质量与线栓规格是否匹配、术后温度是否保持恒定均影响小鼠线栓模型的稳定性?
- 王芙蓉姜永生刘庆新肖文伍张苏明
- 关键词：小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤稳定性可重复性
- 体细胞核移植的研究进展被引量：1
- 2004年
- 自从克隆羊多利问世以后 ,体细胞核移植有了较大的发展 ,陆续有新的动物克隆成功 ,但克隆的效率仍然较低。本文综述了体细胞核移植技术研究的进展情况 ,介绍了基因背景、核移植步骤。
- 肖文伍付新巧张苏明
- 关键词：核移植克隆胚胎卵母细胞
- 人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及传代的稳定性观察被引量：8
- 2002年
- 显微注射法建立转 bcl- xl基因小鼠 ,将 PCR及 Southern- blot检测阳性的小鼠与正常鼠交配并传代 ,然后检测子代中外源基因的遗传情况。结果发现 :10号小鼠传代过程中 PCR阳性率保持稳定 ,符合孟德尔遗传规律 ,外源基因能够稳定遗传。 6号小鼠 PCR阳性率呈轻微下降趋势 ,但能够保持相对稳定遗传。 13号和 5号小鼠 PCR阳性率均呈现明显的下降趋势。该二小鼠存在外源基因遗传丢失现象。结果提示
- 王芙蓉袁慧肖文伍张苏明赵浩斌郑新民魏庆信
- 关键词：BCL-XL基因DNA复制传代
- 小鼠受精卵显微注射影响因素的体外研究被引量：6
- 2005年
- 目的:利用体外培养探讨受精卵显微注射的影响因素的作用。方法:获取小鼠受精卵,在其他条件固定的情况下,分别比较不同的注射基因浓度,在CZB(加HEPES)操作液中显微操作时间以及注射前受精卵的质量对显微注射后的胚胎体外培养结果的影响。结果:基因浓度越高,受精卵发育越差,操作时间不同的卵发育无明显差异,质量好的受精卵发育较好,质量差的几乎不发育。结论:选用较低的基因浓度,良好的操作介质CZB(加HEPES),使用质量好的受精卵,会提高显微注射的效率。
- 杨华静杨勇肖文伍陈红张苏明
- 关键词：小鼠显微注射转基因胚胎培养
- bcl-xl基因过表达在脑梗死中的保护作用及细胞色素C与caspase-3的表达研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察大脑中动脉栓塞模型转基因小鼠中bcl-xl的过表达对脑缺血后再灌流的保护作用及其机制。方法建立bcl-xl过表达转基因小鼠模型,将该模型小鼠与同种系野生型小鼠同时行线栓永久性阻塞大脑中动脉,在缺血24 h时测其神经功能评分,观察转基因小鼠与野生型小鼠的差别。在缺血后不同时间点分别检测两种小鼠梗死体积及其动态变化、脑组织中bcl-xl的表达量的差异、再灌流时凋亡细胞的数量和分布情况以及脑中细胞色素C及caspase-3的表达量及分布情况。结果转基因小鼠的神经功能评分低于野生型小鼠。在缺血后不同时间点,转基因小鼠的梗死体积小于并且皮质缺血区内的凋亡细胞数明显少于野生型小鼠,且保护作用发生时间早,持续时间较长。梗死前后转基因小鼠的皮质细胞bcl-xl的表达量均明显高于野生型小鼠,且梗死后两种小鼠体内的bcl-xl的表达量均有所增加,但两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。缺血后再灌流后不同时间点,转基因小鼠缺血局部细胞色素C的表达及caspase-3的活化明显低于野生型小鼠。结论在规范化的标准条件下,转基因小鼠中bcl-xl基因的过表达能够降低脑梗死的体积并改善小鼠的神经功能。过表达bcl-xl基因的这种效应可能是通过抑制细胞凋亡而实现的,其机制可能是bcl-xl基因的过表达抑制了细胞色素C的释放及caspase-3的活化。
- 王芙蓉姜永生刘艳肖文伍张苏明
- 关键词：转基因小鼠脑梗死细胞色素C
- 转基因小鼠及其在脑缺血研究中的应用被引量：2
- 2000年
- 近几年来 ,应用转基因小鼠研究脑缺血取得了很大的进展。转基因小鼠的获得方法由原来单一的显微注射法发展为多种方法 ,并有很多优点。转基因小鼠在脑缺血研究中的应用也越来越广泛 ,包括用于清除自由基的酶类、凋亡基因、炎性细胞因子、兴奋性氨基酸受体和载脂蛋白E的研究等。由此可见 。
- 王芙蓉肖文伍张苏明
- 关键词：转基因小鼠脑缺血病理
- 小鼠卵母细胞电激活的实验研究
- 2005年
- 目的寻找用电激活方法作小鼠体细胞克隆的适宜卵龄的卵母细胞及电激活参数。方法在0.6kV/cm、80μs、2个电脉冲(2p)下,比较了注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)后13、16、19、22h卵母细胞的激活率、碎裂+死亡率。在上述相同电脉冲下,统计了经体外培养(IVC)和新鲜的卵龄为16、19、22h的卵母细胞的激活率,碎裂+死亡率;比较了场强分别为0.6、0.9、1.2、1.5、1.8kV/cm,电压时程分别为10、20、40、80、100、150、200μs,2p对注射HCG后16h卵母细胞的电激活效果。结果注射HCG后16、19h卵母细胞电激活率较高,分别为63.6%和76.7%,经体外培养后激活率下降,碎裂+死亡率明显增加。在0.9kV/cm、80/100μs,2p时激活率达70%～80%。在1.2kV/cm、40/80/100μs、2p时,激活率达到了80%左右,碎裂+死亡率低于16%。结论注射HCG后16h的卵母细胞为适宜的小鼠核移植的受体细胞。0.9kV/cm、80/100μs,2p及1.2kV/cm、40/80/100μs、2p为适宜的电激活参数。
- 肖文伍杨勇卫国杨华静傅新巧张苏明
- 关键词：电激活卵母细胞小鼠核移植体细胞克隆
- 显微注射法建立转bcl-x<,1>基因小鼠的研究
- 目的:建立转bcl-x<,1>基因小鼠,继而传代建系,用于缺血性脑血管疾病的研究.方法:采用显微注射法,将人bcl-x<,1>基因注入昆明小白鼠受精卵获得子代鼠,然后用PCR及Southern-blot检测以获得阳性鼠....
- 肖文伍
- 关键词：缺血性脑血管疾病转基因小鼠显微注射
- 文献传递
- 人bcl-xL基因在转基因小鼠中的整合和表达
- 2006年
- 目的研究人bcl-xL基因在显微注射所产生的子代小鼠中的整合、转录和表达情况。方法采用PCR和Southern blot方法检测人bcl-xL基因在小鼠体内的整合;RT-PCR方法检测它们的bcl-xL mRNA水平;用Western blot及免疫组化法检测目的蛋白的表达情况。结果在显微注射所产生的转基因小鼠中,有4只为Southern blot检测阳性,并且在这4只小鼠及其子代中均检测到人bcl-xL的mRNA和过表达的目的蛋白。结论由于在这些小鼠中既有外源基因的整合,又有其mRNA和蛋白质的表达,所以,它们是真正的转基因动物。
- 王芙蓉姜永生肖文伍张苏明袁慧赵浩斌郑新民魏庆信
- 关键词：转基因小鼠基因整合基因表达
