耿沁
- 作品数：20 被引量：129H指数：8
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金上海市科委纳米专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析被引量：21
- 2008年
- 目的：从人肺腺癌细胞株SPC—A1中诱导球体形成，对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法：无血清条件下培养肺癌细胞，采用表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、重组人胰岛素样生长因子-1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）和重组人成纤维细胞生长因子-10（fibroblast growth factor—10，FGF-10）等细胞生长因子诱导球体形成，球体细胞采用RT—PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达，并通过NOD—SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：SPC—A1肺腺癌细胞经培养5—10d后，即可形成悬浮生长的细胞球体（肺球体）。RT—PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221．细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C，胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1，以及肺干细咆主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达，证实80％以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性，在NOD—SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论：肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。
- 耿沁董强刚姚明郑必强胡晶莹周瑾赵仰星闫明霞甘愉
- 关键词：细胞培养技术干细胞动物实验
- 人肺腺癌干细胞对顺铂和卡铂的药物敏感度分析被引量：3
- 2010年
- 目的:分析人肺腺癌干细胞(lung adenocarcinoma stem cell,LASC)对顺铂(cisplatin,DDP)和卡铂(carboplatin,CBP)的药物敏感度。方法:人肺腺癌细胞SPC-A1、AG及CPA-Y2经DDP和CBP作用后,应用CCK-8(cell countingkit-8)比色法检测细胞存活率,应用免疫荧光检测法测定药物生存细胞(drug surviving cell,DSC)的表型特征。通过磁性细胞分选技术分离肺腺癌干细胞,应用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)示踪技术检测DSC中的肿瘤干细胞,分析DSC对DDP和CBP的药物敏感度。结果:LASC具有细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cell,BASC)表型(OCT4+CCSP+SP-C+)。将此类癌干细胞(CD221+)与肺腺癌分化细胞(CD221-)混合后检测DSC发现,后者具有OCT4+BASC表型。DSC对铂类药物具有显著抗性。结论:肺腺癌干细胞对DDP和CBP具有显著耐药性,可能是化疗后肿瘤复发的根源。
- 黄进肃亓雪莲张雪艳李焱韩宝惠耿沁周瑾徐惠莉董强刚
- 关键词：肺肿瘤肿瘤干细胞药物筛选试验抗肿瘤顺铂卡铂
- 靶向TTF-1转录因子诱导人肺腺癌干细胞表型分化被引量：2
- 2011年
- 肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)的典型特征是能够自我更新并分化形成肿瘤内各类癌细胞,但其分子调控机制还不清楚。本实验采用微纳米介导的小RNA(microRNA)基因沉默技术,探讨了选择性灭活甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)对肺腺癌CSC分化的影响。结果显示,肺腺癌CSC属于具有胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)样表型的原始未分化细胞,此类癌细胞表达ESC自我更新核心调控环(OCT4、Nanog和Sox2)以及细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cells)标志CCSP和SP-C、Ⅰ型肺泡细胞标志AQP5、纤毛细胞标志Foxj1和肺发育相关转录因子TTF-1及GATA6,而TTF-1灭活细胞仅表达SP-C和GATA6,此类细胞经培养后具有SP-C^-AQP5^+Ⅰ型肺泡细胞样表型。上述结果表明,TTF-1是维持肺腺癌CSC生物学特性的关键基因,靶向该基因将迫使其表型分化。
- 李焱薛明明亓雪莲耿沁徐慧莉董强刚
- 关键词：肿瘤干细胞肺腺癌分化
- 人结肠癌原位移植瘤裸小鼠模型的活体成像观察被引量：3
- 2016年
- 目的 建立人结肠癌原位移植瘤裸小鼠模型,探讨小动物活体成像系统在结肠癌原位移植瘤模型中的应用.方法 应用慢病毒转染的方法建立同时表达绿色荧光蛋白及荧光素酶（GFP/Luc）的人结肠癌细胞HCT-116,分别采用组织决法及培养细胞法建立裸小鼠结肠癌原位移植瘤模型,通过小动物活体成像系统动态观察肿瘤在肠原位的生长及转移情况.结果 成功建立了稳定表达GFP/Luc的人结肠癌细胞,并应用该细胞成功建立了结肠癌原位移植瘤动物模型.经连续7周动态观察表明,随着肿瘤移植时间的延长,腹部皮下触诊显示肿瘤逐渐增大,小动物活体成像显示荧光素表达面积和强度也逐渐增大.结论 小动物活体成像系统能够客观评价结肠癌的原位生长及转移情况,为体内深部肿瘤的观察和研究提供了有效的参考依据.
- 赵永江朱淼鑫袁立新孙磊耿沁李静姚明闫明霞
- 关键词：人结肠癌原位移植慢病毒载体
- 检测多项肿瘤标志物诊断肺癌的研究被引量：1
- 1998年
- 陈书盘关赛芳陈复华耿沁
- 关键词：肺癌肿瘤标记物
- 中医药对乙型肝炎患者肝癌前期状态的干预研究被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨中药对乙型肝炎相关性肝癌的干预作用. 方法:在慢性乙型肝炎患者中,筛选出肝癌高危患者30 例,治疗组17例根据审因论治的原则,以中药制剂对其进行为期2 a的肝癌干预治疗;对照组13例以中西药进行常规保肝治疗．治疗过程中每月随访临床症状、体征、肿瘤标志物、肝功能、病毒载量及T细胞亚群等项目,定期进行B超和CT检查．结果:中药干预组肿瘤标志物甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体和γ-谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ的转阴率分别为86％(6／7)、 83％(5／6)和82％(9／11),对照组中所有病例肿瘤标志物持续阳性,无1例转阴．2 a期间中药干预组累计肝癌发生率为 12％(2／17),对照组为85％(11／13),两者比较差异具有极显著性(P<0．0 001)．结论:中医“养正徐图”治则能有效降低肝癌高危患者肿瘤标志物水平,并能延缓或阻止肝癌的发生．
- 屠红张菁成伟中韩镭陆敏曹宏伟陈复华耿沁
- 关键词：乙型肝炎肝细胞肝癌中医药
- 人肺腺癌干细胞的分离及鉴定被引量：48
- 2008年
- 目的:从人肺腺癌细胞株中分离及鉴定具有干细胞特征的高致瘤性癌干细胞。方法:采用磁性细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)技术将肺腺癌细胞分成多个亚群,然后应用流式细胞及RT-PCR技术检测干细胞相关标志表达,通过NOD-SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果:在A549和SPC-A肺腺癌细胞中发现一个新颖的癌细胞亚群,此类癌细胞的表型特征为CD24+IGF-1R+,具有高侵袭性和高致瘤性,在NOD-SCID小鼠中仅需移植100个细胞即可形成肿瘤,其致瘤能力是上述标志阴性细胞的1000倍。此外,这些细胞表达胚胎干细胞标志(OCT4和Bmi-1)及肺干细胞标志(CCSP,SP-C,TTF-1和Gremlin),类似小鼠肺脏细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cells,BASC),并具有自主生长特性,能够在无血清条件下长期培养。结论:人体肺腺癌中CD24+IGF-1R+细胞属于BASC样癌干细胞。
- 董强刚姚明耿沁周瑾闫明霞
- 关键词：肺肿瘤腺癌肿瘤干细胞细胞分离
- 血清循环DNA的EGFR基因突变与肺癌选择性靶向治疗研究被引量：8
- 2007年
- 目的:通过血清循环DNA的基因突变检测,筛选EGFR突变型肺癌患者并评估靶向性药物吉非替尼对其的临床疗效。方法:从肺癌患者血清中提取DNA,采用PCR扩增和基因测序检测EGFR突变。结果:116例肺癌血样中检出EGFR突变46例,突变率为39.7%,其中外显子19和21突变分别占65.2%(30/46例)和34.8%(16/46例),EGFR基因突变多见于女性患者和肺腺癌(包括腺鳞癌)患者。对20例肺癌的进一步分析证明,血清EGFR基因突变类型与患者自身肿瘤的突变类型相同。另外通过血清循环DNA基因检测法筛选了19例化疗失败的突变型晚期肺癌进行吉非替尼靶向治疗,客观有效率为52.6%,病情控制率为89.5%,中位无进展生存时间为8个月,中位生存时间为12个月,2年生存率达到33.3%。结论:证实血清循环DNA与肿瘤组织DNA的EGFR基因突变一致;以血清循环EGFR突变检测结果为依据选择分子靶向性药物吉非替尼治疗,对晚期肺癌患者疗效明显。
- 黄进肃董强刚许凯黎韩宝惠白皓耿沁周瑾
- 关键词：肺肿瘤游离DNA吉非替尼
- micro-CT法观测雌性小鼠股骨骨参数的分析被引量：4
- 2014年
- 目的 利用小动物CT（micro-CT）收集正常雌性BALB/c-nu/nu小鼠与BALB/c小鼠股骨的影像学数据.方法 BALB/c-nu/nu小鼠与BALB/c小鼠各15只,雌性,10～12周龄,取股骨后用micro-CT进行扫描,将得到的数据进行系统分析.结果 成功收集了正常雌性BALB/c-nu/nu小鼠与BALB/c小鼠股骨的CT影像学数据.通过数据分析,发现两者在皮质骨相对骨体积上具有显著差异,在骨小梁相对骨体积、骨表面积与组织体积比值和骨密度也有显著差异.结论 micro-CT可以对雌性小鼠股骨的各项参数进行定量分析.
- 耿沁朱淼鑫孙磊崔永奇孔韩卫姚明刘蕾
- 关键词：股骨小鼠雌性
- 评多项肿瘤标志物检测对肝癌的诊断价值被引量：9
- 1996年
- 本研究检测了１４８５例良恶性肝病患者血清ＡＦＰ及其变异体（ＡＦＰ－ｖ）、γ－谷氨酰转肽酶同工酶（ＧＧＴ）和α１抗胰蛋白酶（ＡＡＴ）浓度。４７４例肝癌患者的上述四项标志物水平显著高于１０１１例非癌肝病患者。估测到ＡＦＰ、ＡＦＰ－ｖ、ＧＧＴ和ＡＡＴ的诊断准确度分别为０．８７３、０．８７１、０．９４８和０．９３８。诊断的特异性分别达到０．９５６、０．９９９、０．９９９和０．９９８；同时相应的灵敏度分别为０．６９６、０．５９９、０．８４０和０．８１０。ＧＧＴ和ＡＡＴ是检测ＡＦＰ阴性（＜２０μｇ／Ｌ）肝癌最有效的标志物，其阳性检出率高达９０％；而ＡＦＰ－ｖ是鉴别ＡＦＰ低水平异常升高的（在２０～４００μｇ／Ｌ）肝癌和非癌肝病患者的最佳指标。本研究结果充分证实联合检测多项肿瘤标志物对肝癌具有重要的诊断价值。
- 薛建祥许凯黎关赛芳周瑾陈复华耿沁
- 关键词：多项肿瘤标志物肝肿瘤
