秦洁
- 作品数：33 被引量：112H指数：7
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 中国猕猴CD4^+CD25^+调节性T细胞对Vγ2Vδ2T细胞体外增殖的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:观察中国猕猴的CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)对Vγ2Vδ2T细胞体外增殖的影响。方法:取3只正常的无潜伏感染的中国猕猴和6只3个月内人工感染过卡介苗的中国猕猴,分离9只动物外周血单个核细胞(PBMCs),免疫磁珠法分选纯化出Tregs。将去除Tregs的PBMCs标记CFSE后,再与Tregs混合,给予CD3/CD28抗体、HMBPP和(或)IL-2刺激,培养7d,流式细胞术检测Vγ2Vδ2T细胞的增殖情况。从3只正常中国猕猴分离PBMCs,经过IL-2联合HMBPP体外刺激5d后,标记上CFSE,再与当天新鲜分离的相同动物的Tregs混合,在IL-2刺激下继续培养4d后,流式细胞术检测Vγ2Vδ2T细胞的增殖情况。结果:Tregs不仅抑制Vγ2Vδ2T细胞的HMBPP抗原特异性扩增以及CD3/CD28抗体诱导的抗原非特异性扩增(t=2.571,10.430,P<0.05),而且以剂量依赖关系抑制IL-2联合HMBPP体外激活的Vγ2Vδ2T细胞(F=9.880,P<0.001)。IL-2联合HMBPP体外预激活的Vγ2Vδ2T细胞的扩增仍然能够受到Treg的显著抑制(FTregs=29.800,FIL-2=59.290,F交互=30.410,P均<0.001)。结论:中国猕猴的Tregs对Vγ2Vδ2T有直接的体外负调节作用。
- 龚光明秦洁轩小燕杜英朱沙孙石磊许予明
- 关键词：中国猕猴CD4+CD25+调节性T细胞
- 河南汉族人群脑梗死患者内皮细胞性一氧化氮合酶基因VN-TR多态性检测被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨河南汉族人群脑梗死患者(CI)内皮细胞性一氧化氮合酶(ecNOS)基因内含子4可变数目串联重复序列(VNTR)的多态性。方法:应用PCR技术,检测217例脑梗死患者的ecNOS基因内含子4VNTR,并与256例正常对照(对照组)比较。观察组中腔隙性脑梗死45例。结果:CI组VNTR基因型的频率为bb82.95%,ab15.67%,aa0.46%,bc0.92%;对照组中基因型的频率为bb82.81%,ab16.02%,aa0.39%,bc0.78%。2组各基因型频率间差异无统计学意义(P>0.05)。a等位基因的频率在患者组和对照组分别为8.29%,8.39%,差异无统计学意义(P>0.05)。腔隙性脑梗死组和对照组比较,基因型频率和a等位基因的频率差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:ecNOS基因VNTR的多态性与脑梗死可能无相关性。
- 徐翠萍郑红许予明连建华齐华李艾帆贺颖宋波秦洁
- 关键词：一氧化氮合酶基因多态性脑梗死
- 神经节苷脂对骨髓间充质干细胞体外分化的神经元样细胞的影响被引量：8
- 2004年
- 许予明秦洁张化彪龚光明宋波张苏明邢莹
- 关键词：神经节苷脂骨髓间充质干细胞体外分化神经元样细胞
- 建立体外星形胶质细胞活化模型的优化方法
- 2022年
- 目的使用脂多糖(LPS)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),在不同的培养液类型、反应时间、反应浓度、反应条件下作用于星形胶质细胞系(C8-D1A),建立一种稳定的可用于体外实验的星形胶质细胞活化模型。方法将C8-D1A细胞系进行细胞传代、培养,接种于培养瓶。分别在无血清基础培养液与完全培养液中培养细胞,加入不同浓度的LPS、IL-1β和TNF-α,培养不同时间后通过Western blot或荧光定量PCR检测胶质纤维酸性蛋白因子(GFAP)的表达水平,以确定活化星形胶质细胞的最佳培养条件。结果完全培养液中,不同浓度的LPS干预C8-D1A细胞系48 h后,各组GFAP表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。基础培养液中,1 mg·L^(-1) LPS干预下,随时间延长GFAP表达水平逐渐升高,且48 h组、72 h组与空白组GFAP表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。基础培养液中,1 mg·L^(-1) LPS组及5 mg·L^(-1) LPS组GFAP表达水平高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。基础培养液中,1 mg·L^(-1) LPS组、10μg·L^(-1) IL-1β联合10μg·L^(-1) TNF-α组GFAP表达水平高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1 mg·L^(-1) LPS或10μg·L^(-1) IL-1β联合10μg·L^(-1) TNF-α在无血清的基础培养液中干预星形胶质细胞系48 h,可获得星形胶质细胞体外活化模型。
- 秦洁邱星辰龚光明郑怀信轩小燕王鹏郭艺楠雷蕾
- 关键词：星形胶质细胞炎症因子脂多糖
- 一个线粒体脑肌病家系临床表型及遗传学分析
- 2020年
- 目的:探讨一个线粒体脑肌病家系临床表型的异质性并进行遗传学分析,为临床诊断提供依据。方法:对一例以阵发性胸闷、心慌伴呼吸困难起病的线粒体脑肌病的先证者及其家系,结合病史、实验室检查、影像学检查、病理检查及基因学检查及已有的文献报道,分析其家系临床表型的异质性并进行遗传学分析。结果:测序结果表明先证者及其女儿、外孙女线粒体基因组均存在chrM:3243A>G突变;该家系内临床症状差别较大,且与突变负荷无明显相关性。结论:线粒体脑肌病患者临床表型异质性大,对于临床表型复杂,以阵发性胸闷、心慌伴呼吸困难起病的患者,应排除线粒体脑肌病、询问家族史,建议行肌肉活检及基因突变筛查,以提高疾病临床诊断的准确率。
- 范丽媛毛澄源秦洁史长河郑惠敏胡新超张槊胡正威范雨董亚丽杨靖许予明
- 关键词：线粒体脑肌病基因诊断
- 细胞因子诱导人脐血间充质干细胞分化过程中细胞巢蛋白、神经丝亚单位和端粒酶逆转录酶mRNA的表达被引量：12
- 2005年
- 目的:观察细胞因子EGF和bFGF联合诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中细胞 巢蛋白(nestin)、神经丝亚单位M(NF M)和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的变化。方法:采集健康自然分娩产 妇脐血,密度梯度离心分离单个核细胞(MNCs),PBS洗涤2次后重悬于含体积分数20%胎牛血清的DMEM/F12 中,接种于T 75培养瓶内(细胞密度为1×106ml-1),一组加入细胞因子EGF和bFGF,终浓度各为10μg/L,另一 组不加细胞因子,剩余细胞用液氮冻存。培养24h倾去全部液体以除去未贴壁细胞,以后每3d全量换液1次,倒 置显微镜下观察细胞形态。分别收集培养1d、4d、7d、14d贴壁细胞和冻存细胞,采用RT -PCR方法检测nestin、 NF M、hTERTmRNA的表达。结果:未培养的脐血MNCs(内含MSCs)nestin、NF M、hTERTmRNA均表达阳性。培 养后nestin、hTERTmRNA表达下降,至第7d已不能检出;而NF MmRNA的表达随培养时间延长而增强。与对照 组相比,细胞因子组NF MmRNA表达较高,nestin、hTERTmRNA表达的下降趋势延迟。结论:细胞因子EGF和 bFGF在联合诱导脐血MSCs分化为神经细胞的过程中,能下调hTERTmRNA的表达。
- 邢莹秦洁曹孟德韩雪飞鄢文海陈宗德刘计荣许燕龚光明
- 关键词：EGF间充质干细胞端粒酶逆转录酶巢蛋白
- 诱导多能干细胞的研究进展及其瓶颈被引量：3
- 2014年
- 背景:随着研究的深入,诱导多能干细胞被应用于疾病模型建立、药物筛选和再生医学等多个研究领域,尤其是应用于神经系统疾病的研究。目的:总结诱导多能干细胞目前的进展并结合相关领域的最新研究提出问题和展望。方法:第一作者检索2006年1月至2014年9月Pub Med数据库中有关诱导多能干细胞的相关文献,检索词为"i PS,induced pluripotent stem cell",包括综述、临床研究和基础研究,最终纳入60篇文献。结果与结论:2006年Yamanaka团队的诱导多能干细胞问世至2012年诺贝尔奖的颁发,短短6年间诱导多能干细胞相关的研究不断取得突破。诱导多能干细胞研究在疾病模型、药物筛选和再生医学等方面拥有广阔的前景,目前存在包括重编程方式、细胞稳定性、临床转化等一系列问题亟待解决,仍需进一步研究深化。
- 马迅秦洁许予明
- 关键词：干细胞诱导多能干细胞神经系统疾病疾病模型国家自然科学基金
- iPSC-NSCs脑立体定向注射对脑出血大鼠脑血肿周围组织中IL-6、TGF-β1表达及神经功能的影响被引量：8
- 2018年
- 目的:探讨脑立体定向注射诱导多能干细胞来源的神经干细胞(i PSC-NSCs)对脑出血(ICH)模型大鼠神经功能及脑血肿周围组织中IL-6、TGF-β1表达水平的影响。方法:选取84只雄性SD大鼠采用大鼠脑立体定位仪制作ICH模型,然后分成3组:假手术组(仅定位穿刺,不注射胶原酶和PBS)、对照组(ICH模型+PBS)、实验组(ICH模型+PBS含i PSC-NSCs),每组28只。随后通过m NSS评分评价各组10只ICH模型大鼠在造模后第1、3、7、14、28天神经功能的动态变化。用ELISA方法检测各组ICH模型大鼠血肿周围组织中IL-6、TGF-β1的表达水平,每组每个时间点有6只大鼠。结果:不同处理方法的ICH大鼠在不同时间点脑血肿周围组织中IL-6、TGF-β1的表达不同(P均<0.05)。实验组大鼠神经功能在第14、28天较对照组有明显改善。结论:i PSC-NSCs脑立体定向注射可调节ICH模型大鼠脑内主要促炎因子IL-6及抑炎因子TGF-β1的表达,并明显改善大鼠的神经功能。
- 秦洁马丹李珠孙石磊杨靖史长河宋波许予明
- 关键词：IL-6TGF-Β1
- 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化被引量：7
- 2004年
- 目的:探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)向神经细胞体外定向诱导分化的条件。方法:从正常SD大鼠骨髓中分离获取MSC,体外培养扩增纯化后传代于塑料培养皿中,采用丁羟茴醚(BHA)和二甲亚砜(DMSO)对传至3～5代的细胞进行体外诱导分化,采用免疫细胞化学对诱导后的细胞进行鉴定。结果:诱导1 h、2 h、3 h后有部分细胞表达神经干细胞标志蛋白nestin,且随诱导时间延长呈下降趋势;诱导5 h后,大部分细胞具有典型神经元形态,表达神经元标志物-神经元特异性烯醇化酶(NSE),少部分细胞呈星型胶质细胞状,表达胶质细胞标志物-胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论:骨髓间充质干细胞可以在体外培养扩增并诱导成为神经元样细胞和星型胶质样细胞。
- 许予明秦洁邢莹张博爱龚光明宋波陈宗德张苏明
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养神经细胞分化
- 干细胞的端粒酶活性研究进展被引量：7
- 2004年
- 龚光明秦洁陈宗德曹孟德
- 关键词：干细胞端粒酶
