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祝元锋: 作品数：14 被引量：18H指数：3; 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目重庆市应用基础研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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PMA诱导人中性粒细胞胞外诱捕网(NETS)形成的方法及其结构的研究被引量：4: 2016年; 目的:建立佛波酯(PMA)诱导人中性粒细胞NETS形成的方法,并研究NETS的结构组成。方法:提取人中性粒细胞,使用10、30、90 n M的PMA分别刺激细胞2、3、4 h,采用核酸染料sytox green染色后,通过共聚焦显微镜检测和比较各组NETS的形成情况,并通过活性氧(ROS)探针对NETS进行荧光染色,对弹性蛋白酶(Elastase)、髓过氧化物酶(MPO)和组蛋白H3(Histone H3)进行免疫荧光染色。结果:PMA低于30 n M刺激细胞4 h都不会产生NETS,90 n M刺激3 h就会形成NETS,使用90 n M刺激中性粒细胞4 h后,其形成的NETS含量最高,显著高于30 n M刺激4 h及90 n M刺激3h(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示NETS结构上含有大量ROS和Elastase,含有少量MPO,几乎不含Histone H3。结论:90 n M PMA刺激中性粒细胞4 h可促进NETS形成,其含有大量ROS和Elastase。; 祝元锋陈晓丽鲁永玲范士郡刘鑫; 关键词：佛波酯

蚕蛾溶茧酶的研究进展被引量：2: 2009年; 溶茧酶是蚕蛾在羽化的过程中分泌的一种酶,其作用是软化和溶解茧层以便使蚕蛾从茧里出来。据目前研究所知,蚕蛾羽化时,是由多个器官合成分泌的溶茧酶共同起作用的。本文从蚕蛾吐出液的研究,溶茧酶的来源、生理生化特征、基因克隆以及开发应用等方面综述了溶茧酶的研究进展。; 祝元锋冯丽春李傲祥; 关键词：蚕蛾

家蚕蛾吐出液的酶活性及蛋白质种类分析: 家蚕蛾羽化时用口腔吐出液溶解前端茧层的丝胶及少量丝素后脱茧而出,测定吐出液中各种酶类的活性以及鉴定吐出液中的蛋白质种类,对解析家蚕羽化过程的溶茧机制具有重要意义。在家蚕羽化前解剖收集嗉囊液,在家蚕羽化时收集蛾吐出液、解剖...; 祝元锋王赵群何宁佳冯丽春; 关键词：家蚕羽化酶活性蛋白质; 文献传递

PAMPs对抗体诱导类风关样小鼠模型的影响: 2016年; 目的探讨病原相关模式分子（PAMPs）对抗体诱导的关节炎（CAIA）样小鼠模型建立的影响。方法 7~8周龄Balb/c雌鼠,第0天使用抗体混合物诱导,第3天使用LPS（TLR4激动剂）或Cp G ODN 1826（TLR9激动剂）激发,每天定时观察四肢关节发病情况并进行关节评分;小鼠腹腔注射O111：B4和O55：B5,绘制生存曲线进行毒性分析;ELISA检测PAMPs刺激小鼠巨噬细胞后IL-6、TNF-α的分泌水平;鲎实验定量检测相同浓度下O111：B4和O55：B5的有效活性。结果 PAMPs成功激发CAIA模型炎症,其中O55：B5低死亡率、高成模率;O111：B4的毒性强于O55：B5;O55：B5的炎症因子分泌量显著高于O111：B4和Cp G ODN 1826（P〈0.01）;O111：B4的有效活性显著高于O55：B5（P〈0.01）。结论低毒高致炎性的O55：B5激发模型效果最佳,说明PAMPs能够影响建模效果,而低毒高致炎性PAMPs适合该模型的激发。; 刘万成杨雪姣祝元锋鲁永玲范仕郡李彦; 关键词：类风湿性关节炎 TOLL样受体

青蒿琥酯增加小鼠巨噬细胞抗菌性自噬效应的作用机制研究: 目的:探讨青蒿琥酯增加小鼠巨噬细胞的自噬水平、进而上调其抗菌活性的药理作用及可能机制.方法:分离小鼠腹腔巨噬细胞,加入青蒿琥酯预处理,采用超声裂解结合平板培养计数检测巨噬细胞胞内活菌数量,采用激光共聚焦显微镜和Weste...; 刘鑫祝元锋陈倩陈晓丽郑江

氯化二亚苯基碘鎓在制备治疗细菌感染药物中的用途: 本发明涉及一种氯化二亚苯基碘鎓在制备治疗细菌感染药物中的用途，该药物可上调天然免疫细胞对细菌的吞噬活性，抑制细菌感染所致的炎症反应，增强机体对细菌的抵抗能力，其特点是通过增加机体天然免疫细胞的吞噬能力实现对细菌的吞噬和杀...; 刘鑫祝元锋郑新川郑江王宁陈晓丽范仕郡; 文献传递

家蚕蛾吐出液蛋白质分析及相关分泌器官功能研究: 家蚕蛾吐出液是蚕蛾在羽化过程中分泌的一种液体，其中含有溶茧酶，作用是软化和溶解茧层以便使蚕蛾从茧里出来。为了研究家蚕吐出液分泌器官的功能，将生理学实验和蛋白质组学实验相结合，通过摘除下腭、涎腺，对摘除后的吐出液进行酶活性...; 祝元锋; 关键词：家蚕蛋白质蛋白质组学酶活性; 文献传递

CpG-c41对TLR9信号通路的干扰作用及其机制探究被引量：1: 2016年; 目的探讨Cp G-c41分子对TLR9信号通路的干扰作用及其机制。方法获取小鼠骨髓巨噬细胞,M-CSF刺激使骨髓细胞向单核巨噬细胞分化,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测诱导成功的巨噬细胞的比例;培养Raw264.7细胞,ELISA法检测Cp G-c41分子对TLR9激动剂Cp G-1826刺激小鼠来源骨髓巨噬细胞和Raw264.7细胞诱发的炎症因子TNF-α和IL-6的影响;Western blot检测Cp G-c41对TLR9-My D88依赖型信号通路中磷酸化NF-κB蛋白表达的影响;ELISA法检测非Cp G-ODN分子对Cp G-1826刺激Raw264.7细胞诱发的炎症因子TNF-α和IL-6的影响;免疫荧光检测Cp G-c41与TLR9的共定位情况以及Cp G-c41对Cp G-1826与TLR9结合的影响。结果 Cp G-c41抑制Cp G-1826诱导的炎症因子TNF-α和IL-6的释放(P<0.01);Cp G-c41抑制TLR9信号通路中NF-κB的磷酸化表达;非Cp G-ODN不影响Cp G-1826诱导TLR9释放TNF-α和IL-6;Cp G-c41通过与TLR9竞争性结合抑制Cp G-1826与TLR9识别。结论 Cp G-c41通过竞争性结合TLR9干扰TLR9-My D88信号通路的活化。; 杨雪姣刘万成祝元锋杨永军范仕郡李彦; 关键词：CP

青蒿琥酯通过活性氧自噬途径增加小鼠巨噬细胞杀菌活性被引量：6: 2017年; 目的研究青蒿琥酯(artesunate,AS)通过增加小鼠巨噬细胞的自噬水平进而上调其杀菌活性的药理作用及机制。方法分离及体外分化培养获得原代小鼠骨髓巨噬细胞。细菌计数实验分为大肠埃希菌(E.coli,EC)组、EC+AS组和EC+AS+抑制剂组(3-MA和Ly294002),建立EC感染细胞模型,给予AS和抑制剂处理,采用平板培养法检测胞内活菌数量。自噬和活性氧检测实验分为medium组、AS组、AS+自噬抑制剂组和AS+活性氧清除剂组[还原型谷胱甘肽(GSH)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)],RT-PCR和Western blot法检测自噬体标志物的表达,荧光探针法检测胞内活性氧水平。结果经定向分化后,获得形态良好的原代巨噬细胞。细菌计数实验结果显示,与EC组比较,EC+AS组细胞胞内EC数量显著减少(P<0.01),且具有剂量和时间效应关系。EC+AS+自噬抑制剂组和EC+AS+活性氧清除剂组细胞胞内细菌较EC+AS组显著升高(P<0.01)。自噬和活性氧检测结果显示,AS组较medium组自噬基因LC3B和Atg5的mRNA和蛋白表达均明显升高,且具有剂量效应关系(P<0.01)。AS+自噬抑制剂组或AS+活性氧清除剂组自噬蛋白的表达较AS组明显降低,AS+活性氧清除剂组ROS水平较AS组也显著降低(P<0.05)。结论青蒿琥酯能够增加巨噬细胞的杀菌活性,且该作用与其上调细胞活性氧水平,进而激活细胞自噬效应有关。; 鲁永玲祝元锋陈倩范仕郡郑江刘鑫; 关键词：青蒿琥酯巨噬细胞杀菌作用自噬活性氧

AMPK信号通路在调节小鼠骨髓巨噬细胞抗菌性自噬效应中的作用被引量：2: 2015年; 目的观察AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)对小鼠骨髓巨噬细胞自噬及杀菌活性的调节作用,并探讨其可能机制。方法分离和体外培养小鼠原代骨髓巨噬细胞(BMDM),观察大肠埃希菌刺激后对BMDM细胞自噬水平及AMPK活化状态的影响。使用AMPK激动剂和抑制剂干预其活化,进一步观察大肠埃希菌感染的BMDM细胞中AMPK活化、自噬水平以及杀菌能力的变化。结果大肠埃希菌感染后的小鼠BMDM细胞自噬相关分子LC3B和Beclin1的表达显著升高,同时LC3Ⅱ/Ⅰ比值也明显升高,且其AMPK的磷酸化水平也随之显著上调。AMPK活性增强后,能够进一步上调BMDM细胞的自噬水平以及对细菌的降解清除。而AMPK活性被抑制后,细胞自噬水平和杀菌活性均显著下降。结论 AMPK分子及其相关信号通路可能在调节巨噬细胞自噬水平以及抗菌效应方面发挥重要作用。; 范仕郡祝元锋杨永军刘鑫; 关键词：AMPK

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